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Registro Completo |
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Biblioteca(s): |
Embrapa Soja. |
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Data corrente: |
31/07/2009 |
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Data da última atualização: |
10/07/2025 |
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Tipo da produção científica: |
Artigo em Anais de Congresso |
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Autoria: |
ROLLA, A. A. P.; BENEVENTI, M. A.; FUGANTI, R.; MARIN, S. R. R.; FARIAS, J. R. B.; BINNECK, E.; ABDELNOOR, R. V.; NEPOMUCENO, A. L.; MARCELINO, F. C. |
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Afiliação: |
AMANDA A. PAIVA ROLLA, UNIVERSIDADE ESTADUAL DE LONRINA; M. A. BENEVENTI, UNIVERSIDADE FEDERAL DO RIO GRANDE DO SUL; RENATA FUGANTI; SILVANA REGINA ROCKENBACH MARIN, CNPSO; JOSE RENATO BOUCAS FARIAS, CNPSO; ELISEU BINNECK, CNPSO; RICARDO VILELA ABDELNOOR, CNPSO; ALEXANDRE LIMA NEPOMUCENO, CNPSO; FRANCISMAR CORREA MARCELINO, CNPSO. |
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Título: |
Desenvolvimento e validação de um método de determinação do número de cópias de transgenes no genoma da soja por quantificação relativa por QPCR. |
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Ano de publicação: |
2009 |
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Fonte/Imprenta: |
In: CONGRESSO BRASILEIRO DE SOJA, 5.; MERCOSOJA 2009, Goiânia. Anais... Londrina: Embrapa Soja, 2009. Seção trabalhos, t. 168. 1 CD-ROM. Editado por Adilson de Oliveira Júnior, Odilon Ferreira Saraiva, Clara Beatriz Hoffmann Campo, César de Castro. |
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Idioma: |
Português |
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Conteúdo: |
A caracterização molecular de plantas geneticamente modificadas (PGMs) quanto ao número de cópias do transgene em seu genoma, bem como do sítio de inserção, permite inferir sobre a estabilidade do genoma receptor após a transformação gênica. Este trabalho teve como principal objetivo avaliar a eficácia e exatidão da quantificação do número de cópias de transgenes no genoma da soja utilizando à metodologia de PCR quantitativo (qPCR), comparado a técnica pioneira de Southern blotting. Foram testados dois sistemas de quantificação por qPCR que empregam a quantificação relativa: o método do 2-∆∆Ct, previamente descrito para estudos de expressão gênica, e o apresentado neste trabalho que propõe a utilização da própria referência endógena, o gene lectina, com calibrador, sendo necessário o ajuste da fórmula para 2-∆Ct/2. Neste caso, como o gene lectina apresenta uma cópia por genoma haplóide, enquanto as plantas GM geradas são hemizigotas para cada lócus onde qual o transgene se inseriu, o resultado final de número de cópias do transgene comparado ao número de cópias do gene lectina deve ser divido por 2. A exatidão de cada sistema foi determinada por comparações com a técnica de Southern blotting. Quatro eventos PGM contendo o gene DREB1A, tiveram o número de cópias do transgene quantificados via qPCR por quantificação relativa. De acordo com os resultados três eventos tiveram o número de cópias dos cassetes determinados pelas duas metodologias de quantificação por qPCR e confirmados por Southern blotting. Somente um evento apresentou número de cópias superior por Southern blotting em relação ao qPCR. Os resultados demonstram a potencialidade da técnica na caracterização molecular em programas que desenvolvem plantas GM em larga escala, devido praticidade, rapidez e exatidão. MenosA caracterização molecular de plantas geneticamente modificadas (PGMs) quanto ao número de cópias do transgene em seu genoma, bem como do sítio de inserção, permite inferir sobre a estabilidade do genoma receptor após a transformação gênica. Este trabalho teve como principal objetivo avaliar a eficácia e exatidão da quantificação do número de cópias de transgenes no genoma da soja utilizando à metodologia de PCR quantitativo (qPCR), comparado a técnica pioneira de Southern blotting. Foram testados dois sistemas de quantificação por qPCR que empregam a quantificação relativa: o método do 2-∆∆Ct, previamente descrito para estudos de expressão gênica, e o apresentado neste trabalho que propõe a utilização da própria referência endógena, o gene lectina, com calibrador, sendo necessário o ajuste da fórmula para 2-∆Ct/2. Neste caso, como o gene lectina apresenta uma cópia por genoma haplóide, enquanto as plantas GM geradas são hemizigotas para cada lócus onde qual o transgene se inseriu, o resultado final de número de cópias do transgene comparado ao número de cópias do gene lectina deve ser divido por 2. A exatidão de cada sistema foi determinada por comparações com a técnica de Southern blotting. Quatro eventos PGM contendo o gene DREB1A, tiveram o número de cópias do transgene quantificados via qPCR por quantificação relativa. De acordo com os resultados três eventos tiveram o número de cópias dos cassetes determinados pelas duas metodologias de quantificação por qPCR e confirm... Mostrar Tudo |
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Palavras-Chave: |
Eventos GM; Número de cópias; PCR quantitativo. |
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Thesagro: |
Genoma; Planta Transgênica; Soja. |
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Thesaurus Nal: |
Polymerase chain reaction; Southern blotting. |
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Categoria do assunto: |
X Pesquisa, Tecnologia e Engenharia |
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Marc: |
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520 $aA caracterização molecular de plantas geneticamente modificadas (PGMs) quanto ao número de cópias do transgene em seu genoma, bem como do sítio de inserção, permite inferir sobre a estabilidade do genoma receptor após a transformação gênica. Este trabalho teve como principal objetivo avaliar a eficácia e exatidão da quantificação do número de cópias de transgenes no genoma da soja utilizando à metodologia de PCR quantitativo (qPCR), comparado a técnica pioneira de Southern blotting. Foram testados dois sistemas de quantificação por qPCR que empregam a quantificação relativa: o método do 2-∆∆Ct, previamente descrito para estudos de expressão gênica, e o apresentado neste trabalho que propõe a utilização da própria referência endógena, o gene lectina, com calibrador, sendo necessário o ajuste da fórmula para 2-∆Ct/2. Neste caso, como o gene lectina apresenta uma cópia por genoma haplóide, enquanto as plantas GM geradas são hemizigotas para cada lócus onde qual o transgene se inseriu, o resultado final de número de cópias do transgene comparado ao número de cópias do gene lectina deve ser divido por 2. A exatidão de cada sistema foi determinada por comparações com a técnica de Southern blotting. Quatro eventos PGM contendo o gene DREB1A, tiveram o número de cópias do transgene quantificados via qPCR por quantificação relativa. De acordo com os resultados três eventos tiveram o número de cópias dos cassetes determinados pelas duas metodologias de quantificação por qPCR e confirmados por Southern blotting. Somente um evento apresentou número de cópias superior por Southern blotting em relação ao qPCR. Os resultados demonstram a potencialidade da técnica na caracterização molecular em programas que desenvolvem plantas GM em larga escala, devido praticidade, rapidez e exatidão.
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Registro original: |
Embrapa Soja (CNPSO) |
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Biblioteca |
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Origem |
Tipo/Formato |
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Registro |
Volume |
Status |
URL |
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| Registros recuperados : 149 | |
| 14. |  | CRUZ, T. V.; PEIXOTO, C. P.; MARTINS, M. C.; PÍPOLO, A. E. Teores de óleo, proteínas e produtividade de soja em diferentes épocas de semeadura. In: CONGRESSO BRASILEIRO DE SOJA, 5.; MERCOSOJA 2009, Goiânia. Resumos... Londrina: Embrapa Soja, 2009. p. 23, trab. 17. Editado por Adilson de Oliveira Júnior, Odilon Ferreira Saraiva, Clara Beatriz Hoffmann Campo, César de Castro.| Biblioteca(s): Embrapa Soja. |
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| 15. | | CRUZ, T. V.; PEIXOTO, C. P.; MARTINS, M. C.; PIPOLO, A. E. Teores de óleo, proteínas e produtividade de soja em diferentes épocas de semeadura. In: CONGRESSO BRASILEIRO DE SOJA, 5.; MERCOSOJA 2009, Goiânia. Anais... Londrina: Embrapa Soja, 2009. Seção trabalhos, t. 17. 1 CD-ROM. Editado por Adilson de Oliveira Júnior, Odilon Ferreira Saraiva, Clara Beatriz Hoffmann Campo, César de Castro.| Tipo: Artigo em Anais de Congresso |
| Biblioteca(s): Embrapa Soja. |
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| 16. | | GODOY, C. V.; MEYER, M. C.; SIQUERI, F.; NAVARINI, L.; MARTINS, M. C. Sustentabilidade pressionada. Cultivar, Grandes culturas, v. 17, n. 202, p. 26-29, mar. 2016.| Tipo: Artigo em Periódico Indexado | Circulação/Nível: B - 5 |
| Biblioteca(s): Embrapa Soja. |
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| 17. | | TAMAI, M. A.; ALVES, S. B.; LOPES, R. B.; FAION, M.; MARTINS, M. C. Patogenicidade de conídio, blastósporo e célula de levedura de Beauveria bassiana para Tetranychus urticae. In: SIMPOSIO DE CONTROLE BIOLÓGICO, 12., 2011, São Paulo. Mudanças climáticas e sustentabilidade: quebra de paradigmas: anais. São Paulo: Sociedade Entomológica do Brasil, 2011. PT. 13.06.| Tipo: Resumo em Anais de Congresso |
| Biblioteca(s): Embrapa Recursos Genéticos e Biotecnologia. |
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| 19. | | TAMAI, M. A.; HOFFMANN-CAMPO, C. B.; MARTINS, M. C.; LOPES, P. V. L.; ANDRADE, N. S.; ALMEIDA, N. S. Aspéctos biológicos de Sternechus subsignatus no oeste da Bahia. In: REUNIÃO DE PESQUISA DE SOJA DA REGIÃO CENTRAL DO BRASIL, 27., 2005. Cornélio Procópio. Resumos... Londrina: Embrapa Soja, 2005. p. 164-165. (Embrapa Soja. Documentos, 257). Organizado por Odilon Ferreira Saraiva, Janete Lasso Ortiz, Simone Ery Grosskopf.| Biblioteca(s): Embrapa Soja. |
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| Registros recuperados : 149 | |
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