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Registro Completo
Biblioteca(s):  Embrapa Uva e Vinho.
Data corrente:  07/01/2011
Data da última atualização:  12/04/2019
Tipo da produção científica:  Nota Técnica/Nota Científica
Autoria:  BASSO, M. F.; FAJARDO, T. V. M.; EIRAS, M.; AYUB, R. A.; NICKEL, O.
Afiliação:  MARCOS FERNANDO BASSO, UNIVERSIDADE ESTADUAL DE PONTA GROSSA; THOR VINICIUS MARTINS FAJARDO, CNPUV; MARCELOS EIRAS, INSTITUTO BIOLÓGICO; RICARDO ANTÔNIO AYUB, UNIVERSIDADE ESTADUAL DE PONTA GROSSA; OSMAR NICKEL, CNPUV.
Título:  Produção de antissoro policlonal utilizando a proteína capsidial recombinante do Rupestris stem pitting-associated virus.
Ano de publicação:  2010
Fonte/Imprenta:  Ciência Rural, Santa Maria, v. 40, n. 11, p. 2385-2388, 2010.
DOI:  10.1590/S0103-84782010001100022
Idioma:  Português
Notas:  Nota técnica.
Conteúdo:  O Rupestris stem pitting-associated virus (RSPaV) é o agente causal das caneluras do lenho da videira. Este trabalho teve como objetivo produzir antissoro policlonal a partir da proteína capsidial (CP) recombinante do RSPaV e avaliar a sua especificidade e sensibilidade. O gene da CP do RSPaV, com 780pb, foi previamente caracterizado. Esse gene foi subclonado no sítio de restrição EcoRI, no vetor de expressão pRSET-B e o plasmídeo recombinante foi utilizado para induzir a expressão da CP em Escherichia coli. A CP, ligada a uma cauda de seis histidinas, foi purificada por meio de cromatografia de afinidade em coluna de Ni-NTA a partir do extrato de proteínas totais extraídas de E. coli. A identidade da proteína purificada foi confirmada em SDS-PAGE e Western blot, utilizando-se anticorpos comerciais contra a cauda de seis histidinas. A CP recombinante expressada in vitro apresentou massa molecular de cerca de 31kDa. A proteína purificada foi quantificada e 2,55mg foram utilizados para a imunização de um coelho. O antissoro policlonal obtido reagiu com diferentes isolados deste vírus, extraídos de videiras em ELISA indireto.
Palavras-Chave:  Canelura do lenho; Detecção; Limpeza clonal; RSPaV; Sorologia.
Thesagro:  Doença de planta; Uva; Vírus; Viticultura.
Categoria do assunto:  --
URL:  https://ainfo.cnptia.embrapa.br/digital/bitstream/item/29760/1/a784cr3959.pdf
Marc:  Mostrar Marc Completo
Registro original:  Embrapa Uva e Vinho (CNPUV)
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Tipo: Nota Técnica/Nota Científica
Biblioteca(s): Embrapa Uva e Vinho.
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