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Registro Completo |
Biblioteca(s): |
Embrapa Uva e Vinho. |
Data corrente: |
11/04/2008 |
Data da última atualização: |
08/08/2019 |
Tipo da produção científica: |
Artigo em Periódico Indexado |
Autoria: |
FAJARDO, T. V. M.; BARROS, D. R.; NICKEL, O.; KUHN, G.; ZERBINI, M. |
Afiliação: |
THOR VINICIUS MARTINS FAJARDO, CNPUV; Danielle R. Barros, UFV; OSMAR NICKEL, CNPUV; GILBERTO KUHN, CPACT; Murilo Zerbini, UFV. |
Título: |
Expression of grapevine leafroll-associated virus 3 coat protein gene in Escherichia coli and production of polyclonal antibodies. |
Ano de publicação: |
2007 |
Fonte/Imprenta: |
Fitopatologia Brasileira, Brasília, v. 32, n. 6, p. 496-500, 2007. |
Idioma: |
Inglês |
Conteúdo: |
Grapevine leafroll-associated virus 3 (GLRaV-3), the main viral species ofthe grapevine leafroll complex, causes yield and quality reduction in grapes (Vitis spp.). The coat protein gene was RT-PCR-amplified from total RNA extracted from infected grapevine leaves and the amplified fragment was cloned and completely sequenced. The fragment was subsequently subcloned into the pRSET-C expression vector. The recombinant plasmid was used to transform Escherichia coli BL21 :DE3 and express the capsid protein. The coat protein, fused to a 6 His-tag, was purified by affinity chromatography using an Ni-NTA resin. The identity ofthe purified protein was confirmed by SDS-PAGE and Westem blot. The in vitro-expressed protein was quantified and used for rabbit immunizations. The antiserum was shown to be sensitive and specific for the detection ofGLRaV-3 in grapevine extracts in Westem blot and DAS-ELISA assays, with no unspecific or heterologous reactions against other non-serologically related viruses being observed. Additional keywords: grapevine, GLRaV-3, recombinant protein, serology, antibodies. Expressão da proteína capsidial do Grapevine leafroll-associated virus 3 em Escherichia coli e produção de anticorpos policlonais Grapevine leafroll-associated virus 3 (GLRaV-3), a principal espécie viral do complexo do enrolamento da folha da videira tViüs spp.), causa reduções no rendimento e na qualidade da uva. O gene da proteína capsidial foi amplificado via RTPCR a partir de RNA total, extraído de folhas de videira infectadas. O fragmento amplificado foi clonado e completamente seqüenciado. Em seguida, o fragmento foi subclonado no vetor de expressão pRSET-C. O plasmídeo recombinante foi utilizado para a expressão da proteina capsidial em Escherichia co/i BL21:DE3. A proteína capsidial, ligada a uma cauda de 6-His, foi purificada por cromatografia de afinidade em coluna de Ni-NTA. A identidade da proteína purificada foi confirmada em SDSPAGE e Wesfern blot e, após quantificação, foi utilizada para imunizar coelhos. O anti-soro mostrou-se sensível e específico para a detecção do GLRaV-3 em extratos de videira por Wesfern blot e DAS-ELISA, não tendo sido observadas reações inespecíficas ou heterólogas contra outros vírus sorologicamente não relacionados. Palavras-chave adicionais: videira, GLRaV-3, proteína recombinante, sorologia, anticorpos. MenosGrapevine leafroll-associated virus 3 (GLRaV-3), the main viral species ofthe grapevine leafroll complex, causes yield and quality reduction in grapes (Vitis spp.). The coat protein gene was RT-PCR-amplified from total RNA extracted from infected grapevine leaves and the amplified fragment was cloned and completely sequenced. The fragment was subsequently subcloned into the pRSET-C expression vector. The recombinant plasmid was used to transform Escherichia coli BL21 :DE3 and express the capsid protein. The coat protein, fused to a 6 His-tag, was purified by affinity chromatography using an Ni-NTA resin. The identity ofthe purified protein was confirmed by SDS-PAGE and Westem blot. The in vitro-expressed protein was quantified and used for rabbit immunizations. The antiserum was shown to be sensitive and specific for the detection ofGLRaV-3 in grapevine extracts in Westem blot and DAS-ELISA assays, with no unspecific or heterologous reactions against other non-serologically related viruses being observed. Additional keywords: grapevine, GLRaV-3, recombinant protein, serology, antibodies. Expressão da proteína capsidial do Grapevine leafroll-associated virus 3 em Escherichia coli e produção de anticorpos policlonais Grapevine leafroll-associated virus 3 (GLRaV-3), a principal espécie viral do complexo do enrolamento da folha da videira tViüs spp.), causa reduções no rendimento e na qualidade da uva. O gene da proteína capsidial foi amplificado via RTPCR a partir de RNA total,... Mostrar Tudo |
Palavras-Chave: |
Enrolamento da folha da videira; Proteína recombinante; Sorologia. |
Thesagro: |
Anticorpo; Doença de Planta; Uva; Vírus; Viticultura. |
Thesaurus Nal: |
Grapevine leafroll-associated virus 3. |
Categoria do assunto: |
-- |
URL: |
https://ainfo.cnptia.embrapa.br/digital/bitstream/item/200453/1/9763-2007-p.496-500.pdf
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Marc: |
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Registro original: |
Embrapa Uva e Vinho (CNPUV) |
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Registros recuperados : 151 | |
41. | | BARROS, D. V.; GARCIA, A. R.; NAHUM, B. de S.; QUINZEIRO NETO, T. Uso de dispositivo eletrônico para controle e rastreabilidade de búfalos na Amazônia Oriental. In: SEMINÁRIO DE INICIAÇÃO CIENTÍFICA, 14., 2010, Belém, PA. Bolsista de iniciação científica: um aporte ao desenvolvimento da pesquisa agropecuária: anais. Belém, PA: Embrapa Amazônia Oriental, 2010. 1 CD-ROM. PIBIC 2010.Tipo: Artigo em Anais de Congresso |
Biblioteca(s): Embrapa Amazônia Oriental. |
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44. | | SILVA, A. C. P. da; COELHO, E. F.; BORGES, A. L.; BARROS, D. L.; ANDRADE NETO, T. M. Atributos químicos do solo sob aplicação de lâminas e doses de nitrogênio em bananeira CV. D'Angola. In: REUNIÃO ANUAL DE CIÊNCIA, TECNOLOGIA, INOVAÇÃO E CULTURA NO RECÔNCAVO DA BAHIA - RECONCITEC, 2., 2012, Cruz das Almas. Energias Renováveis, Educação, Tecnologia e Sociedade. Cruz das Almas, BA: UFRB, 2012.Tipo: Artigo em Anais de Congresso |
Biblioteca(s): Embrapa Mandioca e Fruticultura. |
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47. | | VASCONCELOS, M. A. M.; FIGUEIREDO, R. F. de; SILVA, S. S. da; BARROS, D. de S.; KATO, O. R. Assessoria técnica inovadora e participativa para transição agroecológica no nordeste paraense. In: ENCONTRO AMAZÔNICO DE AGRÁRIAS, 4., 2012, Belém, PA. Agricultura familiar: mecanismos de desenvolvimento no cenário amazônico: anais. Belém, PA: UFRA, 2012. 1 CD-ROM.Tipo: Artigo em Anais de Congresso |
Biblioteca(s): Embrapa Amazônia Oriental. |
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48. | | NUMAZAWA, S.; SHIBATA, H. Y.; BARROS, D. S. de; COSTA, I. A.; COSTA, E. T. da; FERREIRA, J. E. R. Análises das propriedades físicas, químicas e mecânica do carvão de resíduos florestais proveniente de fornoso 'rabo-quente' no município de Paragomina-PA. In: CONGRESSO BRASILEIRO SOBRE FLORESTAS ENERGÉTICAS, 1., 2009, Belo Horizonte. Anais. Colombo: Embrapa Florestas, 2009. 1 CD-ROM. (Embrapa Florestas. Documentos, 178). Seção: Matéria Prima e Processos de Conversão Energética.Biblioteca(s): Embrapa Florestas. |
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49. | | REZENDE, F. A. de; MAIA, C. M. B. de F.; SANTOS, V. A. H. F. dos; BARROS, D. L. de. Biocarvão: multifuncionalidade no gerenciamento e reutilização de co-produtos agroindustriais. In: FARIAS NETO, A. L. de; NASCIMENTO, A. F. do; ROSSONI, A. L.; MAGALHÃES, C. A. de S.; ITUASSU, D. R.; HOOGERHEIDE, E. S. S.; IKEDA, F. S.; FERNANDES JUNIOR, F.; FARIA, G. R.; ISERNHAGEN, I.; VENDRUSCULO, L. G.; MORALES, M. M.; CARNEVALLI, R. A. (Ed.). Embrapa Agrossilvipastoril: primeiras contribuições para o desenvolvimento de uma agropecuária sustentável. Brasília, DF: Embrapa, 2019. pt. 2, cap. 1, p. 95-103.Tipo: Capítulo em Livro Técnico-Científico |
Biblioteca(s): Embrapa Agrossilvipastoril; Embrapa Florestas. |
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50. | | ANDRADE NETO, T. M. de; COELHO, E. F.; COSTA, F. da S.; BARROS, D. L.; AMORIM, M. Concentração de nitrato na solução do solo com aplicação de diferentes concentrações na água de irrigação de nitrato de potássio. In: REUNIÃO BRASILEIRA DE FERTILIDADE DO SOLO E NUTRIÇÃO DE PLANTAS, 29.; REUNIÃO BRASILEIRA SOBRE MICORRIZAS, 13.; SIMPÓSIO BRASILEIRO DE MICROBIOLOGIA DO SOLO, 11.; REUNIÃO BRASILEIRA DE BIOLOGIA DO SOLO, 8., 2010, Guarapari. Fontes de nutrientes e produção agrícola: modelando o futuro: anais. Viçosa, MG: Sociedade Brasileira de Ciência do Solo, 2010. 1 CD-ROM. 1312 pdfTipo: Artigo em Anais de Congresso |
Biblioteca(s): Embrapa Mandioca e Fruticultura. |
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51. | | ANDRADE NETO, T. M. de; COELHO, E. F.; COSTA, F. da S.; BARROS, D. L.; AMORIM, M. Concentração de nitrato na solução do solo com aplicação de diferentes concentraçoes na água de irrigação de nitrato de potássio. In: REUNIÃO BRASILEIRA DE FERTILIDADE DO SOLO E NUTRIÇÃO DE PLANTAS, 29.; REUNIÃO BRASILEIRA SOBRE MICORRIZAS, 13.; SIMPÓSIO BRASILEIRO DE MICROBIOLOGIA DO SOLO, 11.; REUNIÃO BRASILEIRA DE BIOLOGIA DO SOLO, 8., 2010, Guarapari. Fontes de nutrientes e produção agrícola: modelando o futuro: anais. Viçosa: SBCS, 2010. 1 CD-ROM.Tipo: Artigo em Anais de Congresso |
Biblioteca(s): Embrapa Agrobiologia. |
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57. | | NUMAZAWA, S.; BARROS, D. S. de; COSTA, E. T. da; COSTA, I. A.; SHIBATA, H. Y.; FERREIRA, J. E. R. Caracterização do carvão de resíduos de exploração florestal produzido em forno metálico no município de Paragominas/PA. In: CONGRESSO BRASILEIRO SOBRE FLORESTAS ENERGÉTICAS, 1., 2009, Belo Horizonte. Anais. Colombo: Embrapa Florestas, 2009. 1 CD-ROM. (Embrapa Florestas. Documentos, 178). Seção: Matéria Prima e Processos de Conversão Energética.Biblioteca(s): Embrapa Florestas. |
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60. | | BARROS, D. L.; COELHO, E. F.; RAMALHO, S. C. de O.; LIMA, L. W. F.; OLIVEIRA, R. L. de. Pulverização foliar de caulim em plantas de mamoeiro sob condição de deficit hídrico no solo. In: CONGRESSO BRASILEIRO DE FRUTICULTURA, 26., 2019, Juazeiro, BA/Petrolina, PE. Fruticultura de precisão: desafios e oportunidades - anais. Petrolina: Embrapa Semiárido: UNIVASF: SBF, 2019. 4 p.Tipo: Artigo em Anais de Congresso |
Biblioteca(s): Embrapa Mandioca e Fruticultura. |
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