|
|
Registro Completo |
Biblioteca(s): |
Embrapa Pecuária Sudeste. |
Data corrente: |
18/10/2007 |
Data da última atualização: |
10/08/2011 |
Tipo da produção científica: |
Resumo em Anais de Congresso |
Autoria: |
IBELLI, A. M. G.; ANDRÉO, R.; COUTINHO, L. L.; GOUVEIA, J. J. S.; NAKATA, L. C.; OLIVEIRA, M. C. de S.; SOUZA, J. R. T.; ZAROS, L. G.; REGITANO, L. C. de A. |
Afiliação: |
ADRIANA MÉRCIA G. IBELLI, UFSCar/SÃO CARLOS, SP.; R. Andréo, ESALQ/USP/PIRACICABA,SP.; LUIZ L. COUTINHO, ESALQ/USP/PIRACICABA,SP.; J. J. S. Gouveia, UFSCar/SÃO CARLOS, SP.; L. C. Nakata, ESALQ/USP/PIRACICABA, SP.; MARCIA CRISTINA DE SENA OLIVEIRA, CPPSE; J. R. T. Souza, UNICEP/SÃO CARLOS, SP.; L. G. Zaros, CENTEC; LUCIANA CORREIA DE ALMEIDA REGITANO, CPPSE. |
Título: |
Seleção de genes constitutivos para estudos de expressão gênica em abomaso e linfonodo abomasal de bovinos |
Ano de publicação: |
2007 |
Fonte/Imprenta: |
In: CONGRESSO BRASILEIRO DE GENÉTICA, 53., 2007, Águas de Lindóia, SP. Anais... Águas de Lindóia: SBG, 2007. |
Páginas: |
p. 151 |
Idioma: |
Português |
Conteúdo: |
A quantificação de RNA mensageiro é amplamente utilizada em estudos de expressão gênica. O método de reação em cadeia da polimerase quantitativa (qPCR) em tempo real é um dos mais sensíveis e eficientes para examinar os padrões de expressão. Para que se tenha uma análise confiável, a escolha de genes constitutivos estáveis é essencial. Estes genes devem apresentar expressão constante, independentemente do tecido ou tratamento utilizado. Isto permite a normalização de diferenças existentes na quantidade inicial de RNA, em possíveis variações experimentais e na síntese de cDNA. Diversos genes como GAPDH, RNA ribossômico 18S e actinas são empregados, porém variações já foram observadas, sugerindo que nenhum gene possa ser considerado estável para todas as condições experimentais. O objetivo deste trabalho foi selecionar um gene constitutivo estável em abomaso e linfonodo abomasal de bovinos. Dez bezerros da raça Nelore foram mantidos livres de infecções por parasitos desde o nascimento. Esses animais foram separados em dois grupos: 5 animais submetidos a infecção artificial com larvas de Haemonchus spp (grupo tratamento) e 5 animais livres de infecção (grupo controle). A coleta de amostras de tecidos e linfonodos abomasais foi feita sete dias após a infecção. O isolamento do RNA total foi feito com reagente Trizol (Invitrogen) e síntese de cDNA por transcrição reversa. A quantificação dos genes RPL-19, GAPDH e HPRT-1 foi avaliada pela técnica de RT-PCR em tempo real utilizando SYBR Green como corante. As análises referentes às quantificações foram realizadas com os valores de Ct obtidos para cada gene. A fim de verificar possíveis variações entre os genes, foram utilizados os programas Analyse-it (Excel), o teste não paramétrico Randomisation test e o programa de normalização Genorm. Os resultados mostraram que para linfonodo abomasal os genes RPL-19 e GAPDH não apresentaram expressão diferencial entre os tratamentos (p>0,05), enquanto que HPRT-1 foi diferencialmente expresso (p<0,05) no teste não paramétrico Randomisation test. Entre os genes RPL-19 e GAPDH os valores de desvio e erro padrão foram 1,23, 0,39 e 2,24 e 0,71, respectivamente. Para abomaso, não houve diferença significativa entre os grupos experimentais para nenhum dos três genes analisados e o gene RPL-19 apresentou o menor desvio e erro padrão (2,34 e 0,74, respectivamente). A análise realizada pelo programa Genorm mostrou que para ambos os tecidos, o gene RPL-19 foi o mais estável entre os três. Desta maneira, o gene RPL-19 foi o que mostrou maior estabilidade entre os genes analisados, podendo ser empregado em estudos de expressão gênica com tecidos e linfonodos abomasais de bovinos. MenosA quantificação de RNA mensageiro é amplamente utilizada em estudos de expressão gênica. O método de reação em cadeia da polimerase quantitativa (qPCR) em tempo real é um dos mais sensíveis e eficientes para examinar os padrões de expressão. Para que se tenha uma análise confiável, a escolha de genes constitutivos estáveis é essencial. Estes genes devem apresentar expressão constante, independentemente do tecido ou tratamento utilizado. Isto permite a normalização de diferenças existentes na quantidade inicial de RNA, em possíveis variações experimentais e na síntese de cDNA. Diversos genes como GAPDH, RNA ribossômico 18S e actinas são empregados, porém variações já foram observadas, sugerindo que nenhum gene possa ser considerado estável para todas as condições experimentais. O objetivo deste trabalho foi selecionar um gene constitutivo estável em abomaso e linfonodo abomasal de bovinos. Dez bezerros da raça Nelore foram mantidos livres de infecções por parasitos desde o nascimento. Esses animais foram separados em dois grupos: 5 animais submetidos a infecção artificial com larvas de Haemonchus spp (grupo tratamento) e 5 animais livres de infecção (grupo controle). A coleta de amostras de tecidos e linfonodos abomasais foi feita sete dias após a infecção. O isolamento do RNA total foi feito com reagente Trizol (Invitrogen) e síntese de cDNA por transcrição reversa. A quantificação dos genes RPL-19, GAPDH e HPRT-1 foi avaliada pela técnica de RT-PCR em tempo real utilizando ... Mostrar Tudo |
Palavras-Chave: |
Bovinos; Gene constitutivo; RPL-19; RT-PCR em tempo real. |
Categoria do assunto: |
-- |
URL: |
https://ainfo.cnptia.embrapa.br/digital/bitstream/item/39628/1/PROCILCAR2007.00178.pdf
|
Marc: |
LEADER 03605nam a2200265 a 4500 001 1048105 005 2011-08-10 008 2007 bl uuuu u00u1 u #d 100 1 $aIBELLI, A. M. G. 245 $aSeleção de genes constitutivos para estudos de expressão gênica em abomaso e linfonodo abomasal de bovinos 260 $aIn: CONGRESSO BRASILEIRO DE GENÉTICA, 53., 2007, Águas de Lindóia, SP. Anais... Águas de Lindóia: SBG$c2007 300 $ap. 151 520 $aA quantificação de RNA mensageiro é amplamente utilizada em estudos de expressão gênica. O método de reação em cadeia da polimerase quantitativa (qPCR) em tempo real é um dos mais sensíveis e eficientes para examinar os padrões de expressão. Para que se tenha uma análise confiável, a escolha de genes constitutivos estáveis é essencial. Estes genes devem apresentar expressão constante, independentemente do tecido ou tratamento utilizado. Isto permite a normalização de diferenças existentes na quantidade inicial de RNA, em possíveis variações experimentais e na síntese de cDNA. Diversos genes como GAPDH, RNA ribossômico 18S e actinas são empregados, porém variações já foram observadas, sugerindo que nenhum gene possa ser considerado estável para todas as condições experimentais. O objetivo deste trabalho foi selecionar um gene constitutivo estável em abomaso e linfonodo abomasal de bovinos. Dez bezerros da raça Nelore foram mantidos livres de infecções por parasitos desde o nascimento. Esses animais foram separados em dois grupos: 5 animais submetidos a infecção artificial com larvas de Haemonchus spp (grupo tratamento) e 5 animais livres de infecção (grupo controle). A coleta de amostras de tecidos e linfonodos abomasais foi feita sete dias após a infecção. O isolamento do RNA total foi feito com reagente Trizol (Invitrogen) e síntese de cDNA por transcrição reversa. A quantificação dos genes RPL-19, GAPDH e HPRT-1 foi avaliada pela técnica de RT-PCR em tempo real utilizando SYBR Green como corante. As análises referentes às quantificações foram realizadas com os valores de Ct obtidos para cada gene. A fim de verificar possíveis variações entre os genes, foram utilizados os programas Analyse-it (Excel), o teste não paramétrico Randomisation test e o programa de normalização Genorm. Os resultados mostraram que para linfonodo abomasal os genes RPL-19 e GAPDH não apresentaram expressão diferencial entre os tratamentos (p>0,05), enquanto que HPRT-1 foi diferencialmente expresso (p<0,05) no teste não paramétrico Randomisation test. Entre os genes RPL-19 e GAPDH os valores de desvio e erro padrão foram 1,23, 0,39 e 2,24 e 0,71, respectivamente. Para abomaso, não houve diferença significativa entre os grupos experimentais para nenhum dos três genes analisados e o gene RPL-19 apresentou o menor desvio e erro padrão (2,34 e 0,74, respectivamente). A análise realizada pelo programa Genorm mostrou que para ambos os tecidos, o gene RPL-19 foi o mais estável entre os três. Desta maneira, o gene RPL-19 foi o que mostrou maior estabilidade entre os genes analisados, podendo ser empregado em estudos de expressão gênica com tecidos e linfonodos abomasais de bovinos. 653 $aBovinos 653 $aGene constitutivo 653 $aRPL-19 653 $aRT-PCR em tempo real 700 1 $aANDRÉO, R. 700 1 $aCOUTINHO, L. L. 700 1 $aGOUVEIA, J. J. S. 700 1 $aNAKATA, L. C. 700 1 $aOLIVEIRA, M. C. de S. 700 1 $aSOUZA, J. R. T. 700 1 $aZAROS, L. G. 700 1 $aREGITANO, L. C. de A.
Download
Esconder MarcMostrar Marc Completo |
Registro original: |
Embrapa Pecuária Sudeste (CPPSE) |
|
Biblioteca |
ID |
Origem |
Tipo/Formato |
Classificação |
Cutter |
Registro |
Volume |
Status |
URL |
Voltar
|
|
Registros recuperados : 14 | |
1. | | ANDRÉO, R.; ALENCAR, M. M. de; VENERONI, G.; MEIRELLES, S. L.; OLIVEIRA, H. N.; REGITANO, L. C. de A. Análise de associação entre o marcador microssatélite CYP21 e espessura de gordura em bovinos da raça Canchim. In: SIMPÓSIO DE INICIAÇÃO CIENTÍFICA DA EMBRAPA PECUÁRIA SUDESTE, 2006, São Carlos, SP. Anais... São Carlos: Embrapa Pecuária Sudeste, 2006. 1p.Tipo: Resumo em Anais de Congresso |
Biblioteca(s): Embrapa Pecuária Sudeste. |
| |
2. | | MACHADO, R.; BERGAMASCHI, M. A. C. M.; FIGUEIREDO, R. A.; BARBOSA, R. T.; ANDREO, R.; BERTAN, C. M.; BINELLI, M. Comportamento reprodutivo e função ovariana em vacas de corte Nelore (Bos taurus indicus) após indução da ovulação e tratamento com GnRH e hCG. Acta Scientiae Veterinariae, v. 36, Supl. 2, s451, 2008.Tipo: Resumo em Anais de Congresso |
Biblioteca(s): Embrapa Pecuária Sudeste. |
| |
3. | | VENERONI, G. B.; SANTIAGO, A. C.; ANDREO, R.; MEIRELLES, S. L.; OLIVEIRA, H. N.; ALENCAR, M. M. de; REGITANO, L. C. de A. Associação do polimorfismo da Leptina com espessura de gordura em bovinos da raça Canchim. In: SIMPÓSIO DE INICIAÇÃO CIENTÍFICA DA EMBRAPA PECUÁRIA SUDESTE, 2006, São Carlos, SP. Anais... São Carlos: Embrapa Pecuária Sudeste, 2006. 2p. (Documentos / Embrapa Pecuária Sudeste, 62).Tipo: Resumo em Anais de Congresso |
Biblioteca(s): Embrapa Pecuária Sudeste. |
| |
4. | | SANTIAGO, A. C.; VENERONI, G. B.; ANDREO, R.; MEIRELLES, S. L.; OLIVEIRA, H. N.; ALENCAR, M. M. de; CORREA, L. de A. Distribuição do polimorfismo da leptina em bovinos da raça Canchim. In: SIMPÓSIO DE INICIAÇÃO CIENTÍFICA DA EMBRAPA PECUÁRIA SUDESTE, 2., 2007, São Carlos, SP. Anais... São Carlos: Embrapa Pecuária Sudeste, 2007. (Documentos / Embrapa Pecuária Sudeste; 76).Tipo: Resumo em Anais de Congresso |
Biblioteca(s): Embrapa Pecuária Sudeste. |
| |
5. | | IBELLI, A. M. G.; NAKATA, L. C.; ANDREO, R.; OLIVEIRA, M. C. de S.; BIANCHIN, I.; BARBOSA, R. T.; REGITANO, L. C. de A. Quantificação das citocinas IL-2, IL-12 e IL-13 em linfonodos de bezerros Nelore infectados com Haemonchus spp. In: SIMPÓSIO DE INICIAÇÃO CIENTÍFICA DA EMBRAPA PECUÁRIA SUDESTE, 2006, São Carlos, SP. Anais... São Carlos: Embrapa Pecuária Sudeste, 2006.Tipo: Resumo em Anais de Congresso |
Biblioteca(s): Embrapa Pecuária Sudeste. |
| |
6. | | IBELLI, A. M. G.; NAKATA, L. C.; ANDREO, R.; OLIVEIRA, M. C. de S.; BIANCHIN, I.; BARBOSA, R. T.; REGITANO, L. C. de A. Quantificação das citocinas IL-2, IL-8 e IL-13 em bezerros Nelore artificialmente infectados com Haemonchus spp. In: SIMPÓSIO DE INICIAÇÃO CIENTÍFICA DA EMBRAPA PECUÁRIA SUDESTE, 2006, São Carlos, SP. Anais... São Carlos: Embrapa Pecuária Sudeste, 2006.Tipo: Resumo em Anais de Congresso |
Biblioteca(s): Embrapa Pecuária Sudeste. |
| |
7. | | IBELLI, A. M. G.; NAKATA, L. C.; ANDREO, R.; OLIVEIRA, M. C. de S.; BIANCHIN, I.; BARBOSA, R. T.; REGITANO, L. C. de A. Quantificação das citocinas IL-2, IL-8 e IL-13 em Nelore infectados com Haemonchus spp abomaso de bezerros. In: SIMPÓSIO DE INICIAÇÃO CIENTÍFICA DA EMBRAPA PECUÁRIA SUDESTE, 2006, São Carlos, SP. Anais... São Carlos: Embrapa Pecuária Sudeste, 2006.Tipo: Resumo em Anais de Congresso |
Biblioteca(s): Embrapa Pecuária Sudeste. |
| |
8. | | IBELLI, A. M. G.; NAKATA, L. C.; ANDRÉO, R.; OLIVEIRA, M. C. de S.; COUTINHO, L. L.; REGITANO, L. C. de A. Quantificação de mRNA de genes relacionados a resposta imune em abomaso de bovinos infectados com endoparasitos Haemonchus spp. In: REUNIÃO ANUAL DA SOCIEDADE BRASILEIRA DE ZOOTECNIA, 44., Jaboticabal, SP. Anais... Jaboticabal: SBZ: UNESP, 2007.Tipo: Artigo em Anais de Congresso / Nota Técnica |
Biblioteca(s): Embrapa Pecuária Sudeste. |
| |
9. | | MOREIRA, I. C.; CARVALHO, M. E.; ANDRÉO, R.; GASPARIN, G.; MIYATA, M.; OLIVEIRA, M. C. de S.; ALENCAR, M. M. de; SILVA, A. M.; REGITANO, L. C. de A. Avaliação de dois marcadores microssatélites quanto à resistência ao carrapato Boophilus microplus em bovinos. In: SIMPÓSIO DE INICIAÇÃO CIENTÍFICA DA EMBRAPA PECUÁRIA SUDESTE, 2006, São Carlos, SP. Anais... São Carlos: Embrapa Pecuária Sudeste, 2006.Tipo: Resumo em Anais de Congresso |
Biblioteca(s): Embrapa Pecuária Sudeste. |
| |
10. | | IBELLI, A. M. G.; NAKATA, L. C.; ANDRÉO, R.; COUTINHO, L. L.; OLIVEIRA, M. C. de S.; AMARANTE, A. F. T.; FURLONG, J.; ZAROS, L. G.; REGITANO, L. C. de A. mRNA profile of Nellore calves after primary infection with Haemonchus placei. Veterinary Parasitology, v. 176, n. 2-3, p. 195-200, mar. 2011.Tipo: Artigo em Periódico Indexado | Circulação/Nível: A - 1 |
Biblioteca(s): Embrapa Pecuária Sudeste. |
| |
11. | | REGITANO, L. C. de A.; CARVALHO, M. E.; MELETI, L. C.; ANDRÉO, R.; VENERONI, G. B.; GASPARIN, G.; MIYATA, M.; MOREIRA, I. C.; ALENCAR, M. M. de; SILVA, A. M. Caracterização molecular de bovinos cruzados ½ Angus ½ Nelore e ½ Canchim ½ Nelore. In: CONGRESSO BRASILEIRO DE GENÉTICA , 51., 2005, Águas de Lindóia. Lindóia: SBG, 2005. p. 362.Tipo: Resumo em Anais de Congresso |
Biblioteca(s): Embrapa Pecuária Sudeste. |
| |
12. | | REGITANO, L. C. de A.; OLIVEIRA, M. C. de S.; ALENCAR, M. M. de; CARVALHO, M. E.; ANDRÉO, R.; MOREIRA, I. C.; NÉO, T. A.; BARIONI JUNIOR, W.; SILVA, A. M. DA. Avaliação da resistência de bovinos de diferentes grupos genéticos ao carrapato e à babesiose. São Carlos, SP: Embrapa Pecuária Sudeste, 2006. 48 p. (Embrapa Pecuária Sudeste. Boletim de pesquisa, 9).Tipo: Boletim de Pesquisa e Desenvolvimento |
Biblioteca(s): Embrapa Pecuária Sudeste. |
| |
13. | | REGITANO, L. C. de A.; OLIVEIRA, M. C. de S.; ALENCAR, M. M. de; ESPERÂNDIO, M. C.; ANDRÉO, R.; MELETI, L.; GASPARIN, G.; MIYATA, M.; BARIONI JUNIOR, W.; SILVA, A. M. Investigação de marcadores para resistência ao carrapato em bovinos da raça Nelore e seus cruzamentos. In: REUNIÓN DE LA ASOCIACIÓN LATINOAMERICANA DE PRODUCIÓN ANIMAL, 19.; REUNIÓN DE LA ASOCIACIÓN MEXICANA DE PRODUCIÓN ANIMAL, 30., 2005, Tampico, ME. Analles... Tampico: ALPA, 2005. 1 CD-ROM.Tipo: Artigo em Anais de Congresso |
Biblioteca(s): Embrapa Pecuária Sudeste. |
| |
14. | | IBELLI, A. M. G.; ANDRÉO, R.; COUTINHO, L. L.; GOUVEIA, J. J. S.; NAKATA, L. C.; OLIVEIRA, M. C. de S.; SOUZA, J. R. T.; ZAROS, L. G.; REGITANO, L. C. de A. Seleção de genes constitutivos para estudos de expressão gênica em abomaso e linfonodo abomasal de bovinos In: CONGRESSO BRASILEIRO DE GENÉTICA, 53., 2007, Águas de Lindóia, SP. Anais... Águas de Lindóia: SBG, 2007. p. 151Tipo: Resumo em Anais de Congresso |
Biblioteca(s): Embrapa Pecuária Sudeste. |
| |
Registros recuperados : 14 | |
|
Nenhum registro encontrado para a expressão de busca informada. |
|
|