02773nam a2200169 a 450000100080000000500110000800800410001910000230006024501310008326000160021450002190023052020950044965000110254465300130255565300120256865300230258019494142019-02-13       2012    bl uuuu  m   00u1 u    #d1 aCIPRIANO, T. de M.  aCaracterização de um promotor pólen-específico da família AP2/ERF de mamona (Ricinus communis L.).h[electronic resource]  a2012.c2012  aTese (Doutorado) - Instituto de Ciências Biológicas, Departamento de Botânica, Universidade de Brasília, Brasília, DF. Orientador: Dr. Francisco José Lima Aragão, Embrapa Recursos Genéticos e Biotecnologia.  aOs fatores de transcrição (TF) chamados de OREB pertencem à grande família AP2/ERF e tem envolvimento em interações proteína-proteína e ligação com o DNA. As proteínas AP2/ERF têm funções importantes na regulação da transcrição de genes de uma grande variedade de processos biológicos relacionados com o crescimento e desenvolvimento, bem como várias respostas a estímulos ambientais, regulando a expressão de genes vegetais que respondem a estresses bióticos e abióticos. Neste estudo, um fator de transcrição AP2/ERF (chamado de RcDREB1) foi isolado de mamona (Ricinus communis L.) e sua a expressão foi analisada em sementes em desenvolvimento, folhas, caules e flores (sépalas, anteras e ovários) de plantas cultivadas sob condições de campo. Os transcritos foram detectados em grãos de pólen, com um pico durante a antese. A sequência de aminoácidos do RcDREB1 foi comparada com outras proteínas AP2/ERF TF e apresentou identidade de 38-78%. A análise filogenética resultou na classificação desse gene como um membro da subfamília CBF/OREB, sendo enraizado juntamente com genes do subgrupo A-5. O promotor RcDREB 1 foi fusionado com o gene repórter gus e utilizado para transformar tabaco (Nicoliana tabacum L.) por Agrobacterium tumefaciens. As plantas transgênicas foram submetidas a vários tratamentos de estresse abiótico (temperaturas baixas e elevadas, seca, salinidade e ABA exógeno) e nenhuma expressão de GUS foi detectada, sugerindo que o promotor RcDREB1 não é ativo nas condições testadas. As análises in si/ico revelaram a presença de três cópias do elemento regulador pólen-específico (AGAAA) na região 5' do RcDREB1. No entanto a expressão de GUS foi observada somente em grãos de pólen, começando durante a abertura da flor e permanecendo no início do processo de senescência, no qual, grãos de pólen maduros são liberados das anteras. Além disso, os grãos de pólen desidratados também expressaram o gene gus. Este é o primeiro estudo sobre um gene DREB apresentando expressão pólen-específica.  aMamona  aGene gus  aRcDREB1  aRicinus communis L