02929nam a2200169 a 450000100080000000500110000800800410001910000170006024501320007726000160020930000100022550001110023552023660034665000130271265300150272565300190274018794392023-10-17       2010    bl uuuu  m   00u1 u    #d1 aPORTO, B. N.  aExpressão de genes SOD e PG em milho BRS 4154 submetido à hipoxia na presença e ausência de cálcio.h[electronic resource]  a2010.c2010  a44 f.  aDissertação (Mestrado) - Universidade Federal de lavras, Lavras. Co-orientador: Paulo César Magalhães.  aO presente trabalho teve como objetivo avaliar os níveis de expressão dos genes SOD e PG, em plântulas de milho BRS 4154 (Saracura), relacionados com o mecanismo de tolerância à hipoxia , na presença e ausência de cálcio, por meio de PCR em Tempo Real. A germinação foi realizada em papel germitest embebidos em água ou solução de CACI2 (0,75% p/v), em câmara de germinação úmida a 25+-2oC, por quatro dias. Após esse período, o alagamento foi realizado pela submersão das plântulas em tubos de PVC com tampão contendo ou não CACI2 (0,75% p/v), borbulhando-se nitrogênio gasoso por 3 minutos. Os tubos foram vedados e mantidos no escuro por quatro, cinco seis e sete dias. Para os controles (não alagados), os rolos foram mantidos na câmara de germinação. Após cada período, parte dos mesocótilos foram coletados em nitrogênio líquido e armazenados me freezer a ?80oC para análises moleculares, ao mesmo tempo outra parte foi acondicionada em FAA e para as análises anatômicas, e o restante foram fixados em Karnovsky para as análises de microscopia eletrônica de transmissão. A adição de cálcio exógeno retardou o aparecimento da constrição no mesocótilo, prolongando a sobrevivência. Esse aspecto foi observado na microscopia fotônica pelo retardamento no aparecimento de aerênquimas na região do mesocótilo em relação às amostras sem esse cátion no tampão de alagamento. Sendo, nesse caso, a origem do aerênquima esquizógena. Os dados relativos à microscopia eletrônica de transmissão a total desestruturação da parede celular após seis dias de hipoxia na ausência de cálcio. No entanto, a presença do cálcio contribui para a manutenção da integridade da parede celular em mesocótilos de plântulas submetidas a sete dias de hipoxia. Paralelamente, nessa fase a expressão do gene PG por PCR em Tempo Real foi mais elevada devido à parede celular ainda se apresenta intacta, e consequentemente disponibilizar substrato suficiente para essa enzima. Na ausência do cálcio o pico da expressão dessa enzima foi numa fase anterior, devido ao aparecimento precoce na constrição. Tanto na presença do cálcio quanto na ausência a expressão do gene SOD ocorre possivelmente porque o produto desse gene atua no sequestro de radicais livres formados em períodos de estresse mais intenso.  aZea mays  aAlagamento  aParede celular