07261nam a2200217 a 450000100080000000500110000800800410001910000190006024501180007926001580019750000750035552064750043065000200690565000230692565000090694865000170695765000170697465000240699165000190701565000090703415985012001-05-03 1998 bl uuuu m 00u1 u #d1 aGAVA, C. A. T. aSeleção de isolados de estreptomicetos para controle biológico de Ralstonia solanacearum e Erwinia carotovora. a1998. 134f. Tese (Mestrado em Agronomia, área de concentração Ciência do solo) - Universidade Federal Rural do Rio de Janeiro, Seropédica, RJ.c1998 aOrientado por: Maria Cristina Prata Neves; Osamu Kimura (in memorian). aO controle biológico de Erwinia carotovora e Ralstonia solanacearum representa uma alternativa promissora, uma vez que o controle químico convencional não tem demonstrado efeito significativo na redução dos elevados danos causados por estas bactérias na cultura do tomateiro. Por outro lado a busca de variedades resistentes tem mostrado resultados limitados. Este trabalho teve por objetivo selecionar isolados de actinomicetos com potencial para utilização no controle biológico destes fitopatogênicos. Na primeira fase isolou-se actinomicetos de solos sob cultivo de olerícolas do Estado do Rio de Janeiro, os quais foram avaliados quanto ao potencial para biocontrole junto com outros isolados oriundos de diversas regiões do cerrado brasileiro. Foram estudados aspectos relacionados com a ecologia da colonização da rizosfera por actinomicetos e a influência de características dos meios de cultura na promoção de antibiose in vitro. Os estudos iniciais mostraram diferenças na resposta da comunidade microbiana nativa de dois solos de regiões fluminenses produtoras de olerícolas, ao efeito da rizosfera de tomateiro cv. Santa Cruz Kada. O efeito rizosférico foi mais pronunciado no solo oriundo da região de Avelar, com incrementos nas densidades das populações de bactérias em geral e de actinomicetos, resultando numa maior razão R/S destas populações, quando comparada ao solo oriundo da região de Seropédica. Em estudos in vitro com 257 isolados de actinomicetos oriundos das regiões fluminenses citadas e de diferentes regiões do cerrado, verificou-se a existência de um grande número de antagonistas a E. carotovora (31%) e R. solanacearum (27%). Um maior número de isolados apresentou crescimento e promoção de antibiose em pH na faixa de 6.0 - 7.5, observando-se elevada incidência na faixa acima de pH 8,0. Alguns isolados apresentaram crescimento e antibiose na faixa de pH entre 4,5 - 6,5. A utilização de diferentes meios de cultura aparentemente não interferiu no número de antagonistas, entretanto o meio Waksman garantiu maior ocorrência de isolados com halos de antagonismo maiores que 10 mm. Vinte e cinco isolados foram taxonomicamente identificados, pertencendo todos ao gênero Streptomyces e foram antagonistas in vitro a E. carotovora, sendo 15 destes antagonistas também a R. solanacearum. Os isolados antagonistas in vitro a ambos os fitopatogenos foram avaliados quanto a colonização da rizosfera de tomateiro e de pimentão. Evidenciou-se a existência de seletividade na colonização rizosférica, expressa pelas diferenças nas densidades das populações bacterianas estabelecidas entre as plantas. Os dados indicaram, ainda, um predomínio pela colonização de regiões mais velhas das raízes, com estabelecimento de densidade elevada na ectorrizosfera e no rizoplano. Al?m disso, alguns isolados apresentaram capacidade de colonização endofítica, embora em baixa densidade, predominando nas regiões mais antigas das raízes que foram mais densamente colonizadas. A avaliação de seis isolados de estreptomicetos mostrou uma redução significativa da germinação de sementes de tomateiro, bem como um alongamento do tempo necessário para germinação máxima. Este efeito foi mais drástico em sementes diretamente inoculadas com esporos de estreptomicetos, quando comparada a semeadura em substrato previamente infestado. O efeito dos isolados sobre o crescimento das plantas foi alterado após o transplantio para substrato esterilizado em vaso de Leonard. A avaliação realizada em infectário infestado com R. solanacearum mostrou que o isolado LEM 384 de Streptomyces griseus, apresentou melhor índice de biocontrole, resultando na sobrevivência de 70% das plantas ao final do período experimental de 48 dias. Embora tenha sido demonstrado o potencial para o controle biológico de E. carotovora e R. solanacearum, são necessários outros estudos como, por exemplo, detectar a interferência da densidade de inoculo dos fitopatogenos no estabelecimento do controle. Estudos relacionados com a densidade de inoculo do agente de biocontrole, a capacidade de produção de metabolitos antibióticos e a proteção da rizosfera por estirpes dos antagonistas e, ainda, observações quanto a interações com características edafoclimáticas, deverão ser desenvolvidos para melhor conhecimento do comportamento dos isolados e seu efetivo uso no controle biológico. The conventional control of Erwinia carotovora and Ralstonia solanacearum using agrochemical has not been showed significant effect in the reduction of the high damages caused bt these bacterias in the tomato cuture. Others alternatives like the of resistant varieties has shown limited results. Thus, biological control represent a promising alternative. This thesis aims to select actinomycetes isolates with potential for use in the biological control of these phytopathogens . As first step some actonomycetes isolates were obtained from soils under vegetables crop from Rio de Janeiro state. These isolates and others from several areas in Brazilian cerrados were appraised to the potential for biocontrol. The antagonism in vitro and some aspects related with the ecology of rhizosphere colonization by actinomycetes were studied. Seeds of tomato cv. Santa Cruz Kada were cultivated in soil samples from Avelar and Seropedica. The rhizospheric effect on the native population of microrganisms was greater in the soil from Avelar. The increment in the density of general bacteria populations and actinomycetes was greater in soil from Avelar, resulting in a larger R/S reason than in soil from Seropedica. In vitro studies with 37 actinomycetes isolates from above areas and 220 from Brazilian cerrados showed the existence of a great number of antagonists to E. carotovora (31%) and R. solanacearum (27%). A large number of isolates exhibited growth and antibiosis promotion in pH ranging of 6.0 to 7.5. There was a high incidence above pH 8,0 and some isolates showed growth and antibiosis in the pH strip among 4,5 - 6,5. The use of different culture medium didn't interfere in the number of antagonistic, however Waksman media conferred larger occurrence of isolates with antagonism zone greater than 10 mm. Twenty-five isolates were identified taxonomically as belonging the Streptomyces genus. These isolates showed in vitro antagonism to E. carotovora and 15 of them to R. solanacearum. aActinomycetales abiological control asoil astreptomycin aActinomiceto aControle Biológico aEstreptomicina aSolo