03032nam a2200229 a 450000100080000000500110000800800410001910000200006024501390008026000160021930000110023550000770024652023210032365000110264465000170265565000290267265000140270165000240271565300240273965300200276365300190278315290442024-04-02 2001 bl uuuu m 00u1 u #d1 aJOBIM, M. I. M. aPerfil eletroforético das proteínas do plasma seminal e sua relação com a congelabilidade do sêmen bovino.h[electronic resource] a2001.c2001 a156 f. aTese (Doutorado) - Universidade Federal de Santa Maria, Santa Maria, RS. aO objetivo do presente estudo foi relacionar o perfil eletroforético das proteínas do plasma seminal bovino com a congelabilidade do sêmen. Foi utilizado o plasma seminal de 16 reprodutores bovinos de alta e baixa congelabilidade de uma central de inseminação artificial. Foi utilizada a eletroforese bidimensional em géis de poliacrilamida a 15% e 8%, respectivamente, para a análise das proteínas de baixo e alto peso molecular. Foram encontradas 12 bandas protéicas nas amostras de plasma seminal analisados nos géis SDS-PAGE a 15%, corados com azul de Comassie. Apenas 6 das 12 bandas foram detectadas em todos os ejaculados estudados, sendo que somente as bandas protéicas 3 (15-16Da), 5 (16-17 kDa) e 7 (10-12 kDa) não apresentaram variação significativa entre as amostras de plasma seminal dos reprodutores. Das proteínas focalizadas neste estudo, 4 apresentaram-sequantitativamente superiores (<0,005) nas amostras dos reprodutores pertencentes ao grupo de alta congelabilidade, as bandas 3 (15-16 kDa), 7 (11-12kDa), 11 (13-14 kDa), e 23 (20-22 kDa), enquanto que a banda protéica 25 (25-26 kDa) mostrou-se significativamente superior (P<0,00%) nos reprodutores de baixa congelabilidade do sêmen. A seqüência do N-terminal da banda protéica 7 mostrou-se idêntica à proteína ácida do fluido seminal bovino (aSFP). O resultado do seqüenciamento, após digestão por tripsina, da proteína 23 mostrou similaridade estrutural com a clusterina bovina. Nos géis SDS-PAGE a 8%, foram analisadas somente as bandas protéicas identificadas em 100% das amostras de plasma seminal. Foram quantificadas três protéicas que apresentaram diferentes pesos moleculares e pontos isoelétricos: 190-195 kDa, pI 6,5-7,5; 66 kDa. A albumina e a osteopontina apresentaram densidade óptica sigficativamente superior (P<0,005) nas amostras dos reprodutores de alta cobgelabilidade do sêmen. As evidências encontradas neste estudo mostram que existem diferenças no perfil protéico dos reprodutores com alta e baixa congelabilidade do sêmen, sugerindo as proteínas ácida do fluido seminal bovino, clusterina, osteopondina, albumina e as bandas protéicas 3 e 11 como possíveis marcadores de alta congelabilidade do sêmen e a proteína 25 como indicativo da baixa congelabilidade do sêmen. aBovino aEletroforese aInseminação Artificial aProteína aReprodução Animal aBioquímica seminal aCongelabilidade aPlasma seminal