02331nam a2200301 a 450000100080000000500110000800800410001910000180006024500920007826000160017030000100018650001230019652014600031965000240177965000160180365000110181965000200183065000220185065300260187265300120189865300150191065300090192565300240193465300230195865300120198165300240199365300120201715162432019-10-31       2000    bl uuuu  m   00u1 u    #d1 aSALLES, H. O.  aInjeção intracitoplasmatica de espermatozóide em ovocitos bovino maturados in vitro.  a2000.c2000  a53 p.  aDissertação (Mestrado em Biologia Molecular) -  Universidade de Brasília, Brasília, DF. Orientador: Rodolfo Rumpf.  aObjetivando estabelecer a tecnica de injecao intracitoplasmatica de espermatozide (ICSI) em bovino, ovocitos imaturos recuperados de foliculos de 2 a 8 mm foram maturados em TCM-199 por 22, 24 e 28 horas. Para a realizacao da ICSI as celulas do cumulus foram removidas e os ovocitos selecionados quanto a presenca do primeiro corpusculo polar. Os ovocitos sem corpusculo polar nessa avaliacao foram fixados  e corados para posterior determinacao do estadio de maturacao nuclear. Todos os ovocitos injetados com espermatozoide ou nao (controle) foram ativados com 50mM de calcio ionoforo por 10 min. Entre 18 e 22 horas apos a ativacao, os ovocitos foram avaliados quanto a taxa de fecundacao (presenca dos pro-nucleos masculino e feminino). No primeiro experimento, 2129 ovocitos foram maturados em diferentes tempos de cultivo e observou-se maior taxa de presenca do primeiro corpusculo polar (P&lt0,05), nos ovocitos maturados por 22 horas (52,82%) em relacao aos maturados por 24 (45,15%) e 28 horas (30,65%). No segundo experimento, os ovocitos foram maturados por um periodo de 22 horas. Apos serem desnudados, um grupo retornava para o cultivo ate 24 e 28 horas. Para cada tempo de maturacao foi realizada a dosagem de glutationa e a ICSI em grupos distintos de ovocitos oriundos do mesmo pool inicial. Nao se observou diferencao significativa (P&gt0,05) na quantidade de glutationa/ovocito entre os tres grupos e entre esses e os ovocitos imaturos.  aanimal reproduction  aSpermatozoa  aBovino  aEspermatozóide  aReproducao animal  aAtivação oocitária  aBovinae  aGlutationa  aICSI  aIn vitro maturation  aMaturacao in vitro  aOócito  aOocyte preservation  aOvocito