04093naa a2200289 a 450000100080000000500110000800800410001910000200006024501450008026000090022530000140023450000300024852030810027870000220335970000160338170000130339770000290341070000200343970000210345970000160348070000170349670000220351370000220353570000200355770000210357777302050359814700162007-05-22       2006    bl uuuu     u00u1 u    #d1 aSILVA, D. C. G.  aConstrução e análise de bibliotecas subtrativas de cDNA de genótipos de soja sob interação com o fungo causador da ferrugem asiática.  c2006  c1 CD-ROM.  aÁrea Plantas - pdf 1270.  aEntre os problemas que afetam a produção de soja no Brasil, a doença fúngica chamada ferrugem asiática, causada por Phakopsora pachyrhizi Sydow & Sydow, tem sido responsável por severos danos econômicos. Apesar de se saber a localização genômica de alguns dos locos de resistência vertical a ferrugem asiática, nada se sabe quanto ao mecanismo molecular da interação do fungo com a soja e as complexas vias metabólicas que são ativadas em genótipos suscetíveis e resistentes em função desta interação, culminando na efetiva infecção da planta pelo patógeno ou no impedimento da proliferação do mesmo. O objetivo deste estudo foi construir e analisar bibliotecas subtrativas de cDNA em genótipos suscetíveis e resistentes a P. pachyrhizi em situação de infecção precoce e tardia, visando conhecer os genes que são diferencialmente expressos durante essa interação. Para a obtenção de cDNA, foram montados quatro tratamentos: amostras de folhas do genótipo resistente PI230970 e do genótipo suscetível Embrapa 48, coletadas às 24 e 192hs após inoculação com o fungo. Para a construção das bibliotecas subtrativas utilizou-se a metodologia de Hibridização Subtrativa Supressiva (SSH) que promove o enriquecimento de populações de mRNA diferencialmente expressos, durante a qual houve a subtração dos quatro tratamentos pelos seus equivalentes falso inoculados. Os fragmentos amplificados através dessa técnica foram clonados e sequenciados, e as seqüências obtidas foram comparadas a acessos de seqüências de nucleotídeos e de proteínas do GenBank, utilizando o algoritmo BLASTX. Para as quatro bibliotecas, foram obtidos cerca de 6000 clones. Destes, 384 foram seqüenciados até o momento, sendo 96 de cada biblioteca, sendo que apenas 142 (37 %) eram de sequências únicas, demonstrando uma alta redundância de clones nas bibliotecas. A categorização dos transcritos de ambas as bibliotecas construídas com cDNA da Embrapa 48 resultou em 34% de proteínas relacionadas ao metabolismo, 3% de proteínas de estrutura celular, 11% de proteínas de defesa celular, 6% de proteínas relacionadas a transcrição e tradução, 1% de proteínas de transdução de sinal, 3% de proteínas de transporte, 3% de proteínas da organização celular e divisão, 11% de proteínas de classificação incerta ou desconhecida e 20% não apresentou similaridade com as seqüências disponíveis no GenBank. Já para as bibliotecas da PI230970 houve 17% de proteínas relacionadas ao metabolismo, 37% de proteínas de defesa celular, 4% de proteínas de transdução de sinal, 8% de proteínas de transporte, 1% de proteínas da organização celular e divisão, 13% de proteínas de classificação incerta ou desconhecida e 20% não apresentou similaridade com as seqüências disponíveis no GenBank. Os resultados deste trabalho irão contribuir para um avanço na compreensão dos mecanismos de resistência das plantas de soja a este patógeno, e assim auxiliar no desenvolvimento de métodos mais eficientes de controle.1 aMORTEL, M. van de1 aWHITHAM, S.1 aBAUM, T.1 aPASSIANOTTO, A. L. de L.1 aNOGUEIRA, L. M.1 aBENEVENTI, M. A.1 aBINNECK, E.1 aYAMANAKA, N.1 aNEPOMUCENO, A. L.1 aALMEIDA, A. M. R.1 aDI MAURO, A. O.1 aABDELNOOR, R. V.  tIn: CONGRESSO BRASILEIRO DE GENÉTICA, 52.; CONGRESO DE LA ASOCIACIÓN LATINOAMERICANA DE GENÉTICA, 12., 2006, Foz do Iguaçu. Resumos... Ribeirão Preto, SP: Sociedade Brasileira de Genética, 2006.