03538nam a2200133 a 450000100080000000500110000800800410001910000210006024502100008126000160029130000110030750001090031852029770042714694692008-02-08       2006    bl uuuu  m   00u1 u    #d1 aBENEVENTI, M. A.  aTransformação genética em soja pela inserção da construção gênica contendo a região promotora do gene rd29A e a região codante do gene DREB1A de Arabidopsis thaliana, visando tolerância à seca.  a2006.c2006  a126 f.  aDissertação (Mestrado em Genética e Biologia Molecular) -Universidade Estadual de Londrina, Londrina.  aNo Brasil a soja é um dos principais produtos da economia nacional refletindo em vários setores da sociedade, principalmente aqueles que possuem renda diretamente relacionada aos complexos de produção, transporte, e comercialização, movimentando cerca de US$ 50 bilhões anuais, ao longo da extensa cadeia produtiva. Apesar dos aspectos positivos relacionados a cultura, estresses abióticos como a seca tem  afetado constantemente a cultura da soja no país, reduzindo os rendimentos. Em resposta ao déficit hídrico as plantas desencadeiam um complexo de mecanismos de respostas em nível, molecular, fisiológico e morfológico. Em nível molecular, a expressão de uma série de genes tem sido demonstrada em resposta ao déficit hídrico. 0 produto desses genes podle ser classificado basicamente dentro de dois grupos: aqueles que atuam diretamente na proteção celular e aqueles que regulam a expressão e a transmissão de sinais em resposta ao estresse. Em particular, uma família de fatores de transcrição em Arabidopsis thaliana conhecida como DREB (Dehydration Responsive Element Binding) ou CBF (C-Repeat-Binding factor) tem sido estudada. A proteína DREB1A é um fator de transcrição responsável pela ativação de uma sérle de genes envolvidos na defesa celular contra a desidratação, que ocorre quando plantas são submetidas à seca, frio e/ou salinidade. A inserção do vetor de expressão contendo a proteína DREB1A e o promotor rd29A, estresse-induzido, ambos de A. thaliana, tem permitido o aumento da tolerância à seca em várias espécies como arroz, trigo, tabaco e A. thaliana. Visando a obtenção de genótipos de soja geneticamente modificada para tolerância à seca, os vetores de expressão pBIG rd29A:DREB1A e pBIrd29A:GUS foram inseridos em embriões  de soja pela técnica de biobalística. Através desse processo de transformação, foi possível introduzir as construções rd29A:DREB1A e rd29A:GUS em soja, com uma eficiência aproximada de 1,8%. A estabilidade de transmissão do transgene foi confirmada  na geração R1. Análises histoquímicas com GUS permitiram identificar a indução do promotor rd29A em tecido foliar sob condições de desidratação celular e verificar a eficiência do processo de transformação em embriões, ambos transformados com a construção rd29A:GUS. 0 uso da técnica de PCR em tempo real, permitiu detectar a indução do promotor rd29A de A. thaliana em folíolos de plantas de soja transformadas com a construção rd29A :DREB 1A submetidas a tratamento de desidratação celular, assim como, aumento do fator de transcrição AtDREB1A. Esses resultados indicam que o promotor rd29A de A. thaliana é ativado em soja em condições de desidratação celular, promovendo a expressão do fator de transcrição AtDREB1A. Análises sobre o aumento do nível de expressão de genes ativados por AtDREB1A e de tolerância ao déficit hídrico em soja estão sendo iniciadas.