03305naa a2200313 a 450000100080000000500110000800800410001910000200006024502060008026000090028630000140029550000660030952022360037565000240261165000240263565000090265970000280266870000170269670000180271370000210273170000200275270000200277270000170279270000210280970000210283070000190285170000220287077300990289214691972008-03-19       2006    bl uuuu     u00u1 u    #d1 aPAIVA, A. A. R.  aAnálise da indução do promotor rd29A de Arabidopsis thaliana em soja após déficit hídrico através de ensaio histoquímico e fluorimétrico em plantas transformadas com a construção rd29AbGUS.  c2006  ap. 46-47.  aOrganizado por Odilon Ferreira Saraiva, Simone Ery Grosskopf.  aAdversidades climáticas, como o aumento de temperatura e períodos de estiagem cada vez mais freqüentes têm representado um sério problema à produção agrícola em todo o mundo. No Brasil, a seca tem afetado consideravelmente a cultura de soja, promovendo perdas significativas. A adoção de estratégias moleculares visando à obtenção de plantas com maior tolerância à seca tem sido utilizada, com sucesso, em espécies como trigo, tabaco e arroz. Entretanto, um fator importante nestas estratégias é a utilização de construções gênicas que possuam regiões promotoras ativadas somente no momento do estresse. Assim, o objetivo do estudo foi avaliar a eficiência de indução por seca do promotor rd29A obtido de A. thaliana e introduzido em soja por biobalística. Folíolos de linhagens transformadas com a construção rd29A:GUS foram submetidos à desidratação celular em temperatura de 37ºC. As amostras foram expostas a desidratação por períodos de 0, 30, 60, 90, 120, 180 e 210 minutos e, em seguida, avaliadas em ensaios histoquímicos e fluorimétricos. Através de ensaio histoquímico, observou-se a indução do promotor rd29A pela atividade da enzima b-glucuronidase (GUS), que em presença de X-Gluc e oxigênio, resulta em um precipitado insolúvel de cor azul. A coloração azul nos folíolos permitiu observar diferenças no nível de expressão nos diferentes tratamentos e nas diferentes linhagens analisadas. Os resultados foram confirmados por ensaio fluorimétrico, onde os níveis de expressão foram quantificados em fluorímetro pela atividade da enzima b-glucuronidase, utilizando com substrato o 4-metilumbeliferil B-D-glucuronídeo (MUG). Os resultados indicaram um aumento no nível de expressão de GUS nos folíolos submetidos à desidratação celular, à medida que aumentava o tempo de exposição a desidratação. Também foi possível observar diferenças no nível de expressão e tempo de indução entre as linhagens estudadas. Os resultados demonstraram que o promotor rd29A de A. thaliana é ativado em soja durante situações de déficit hídrico, mas possivelmente, dependendo do local de inserção no genoma pode provocar níveis diferenciais de indução.  aPlanta Transgênica  aResistência a Seca  aSoja1 aYAMAGUCHI-SHINOZAKI, K.1 aYAMANAKA, N.1 aNAKASHIMA, K.1 aFARIAS, J. R. B.1 aMARIN, S. R. R.1 aSILVEIRA, C. A.1 aLUGLE, S. M.1 aBENEVENTI, M. A.1 aABDELNOOR, R. V.1 aPOLIZEL, A. M.1 aNEPOMUCENO, A. L.  tIn: CONGRESSO BRASILEIRO DE SOJA, 4., 2006, Londrina. Resumos... Londrina: Embrapa Soja, 2006.