02809nam a2200181 a 450000100080000000500110000800800410001910000220006024500920008226000160017430000100019050002900020052020560049065300170254665300080256365300170257165300390258811907542023-12-20       2008    bl uuuu  m   00u1 u    #d1 aMADEIRA, L. de M.  aExpressão de Cyanovirin-N, um microbicida anti-HIV, em plantas.h[electronic resource]  a2008.c2008  a53 f.  aDissertação (Mestrado em Biologia Molecular) - Universidade de Brasília, Departamento de Biologia Celular, Brasília. Orientador: Elíbio Leopoldo Rech Filho, Embrapa Recursos Genéticos e Biotecnologia; Co-orientador: Cristiano Lacorte, Embrapa Recursos Genéticos e Biotecnologia.  aO Vírus da imunodeficiência humana (HIV) é um vírus envelopado e as proteínas do seu envelope, em especial a gp120, controlam os eventos necessários para a sua entrada em células suscetíveis. A Síndrome da Imunodeficiência Adquirida (AIDS) é a manifestação clínica da infecção por HIV. Apesar dos esforços globais de combate à AIDS, o número de portadores de HIV no mundo continua crescendo. O contato heterossexual é a principal forma de transmissão e tem acarretado no aumento alarmante do número de mulheres infectadas. Os microbicidas são medicações antimicrobianas capazes de prevenir a transmissão do HIV quando aplicadas na vagina ou reto antes da relação sexual, e surgiram como uma ferramenta adicional de combate à AIDS direcionada às mulheres. Cyanovirin-N (CV-N) é uma proteína candidata à microbicida capaz de inativar várias linhagens do HIV se ligando irreversivelmente à gp120 viral. A produção de CV-N, assim como de qualquer microbicida,para ser economicamente viável e suprir a demanda mundial deve ser alcançada em níveis muito altos. Dessa forma, plantas geneticamente modificadas oferecem um sistema adequado para a produção de CV-N. Neste trabalho, plantas de soja transgênicas para a expressão de CV-N sob o controle do promotor da ?-conglicinina ?` foram produzidas e a análise das sementes R1 mostrou que CV-N está acumulando a 6% do total de proteínas solúveis da semente, um nível significativamente alto quando comparado a outros trabalhos semelhantes.Adicionalmente, foi testado o sistema de expressão transiente de CV-N e CV-N mutada(Asn30Gln/Pro51Gly) em folhas de Nicotiana benthamiana, com três diferentes tipos de endereçamento celular. Os resultados demonstraram que todas as construções produziram CV-N capaz de se ligar à gp120, com níveis de expressão de aproximadamente 0,1%, sendo assim bastante inferiores aos observados em soja. Este trabalho é um exemplo das vantagens de produção de proteínas recombinantes em sementes quando comparada a folhas.  aCyanovirin-N  aHIV  aMicrobicidas  aVírus da imunodeficiência humana