02655nam a2200169 a 450000100080000000500110000800800410001910000180006024500930007826000160017130000100018750002090019752020250040665000110243165000210244265300220246311878022012-03-12 2008 bl uuuu m 00u1 u #d1 aMORAIS, A. T. aClonagem e estudo funcional do promotor do gene DREB da mamoneira (Ricinus cummunis L.). a2008.c2008 a67 f. aDissertação (Mestrado em Botânica) - Instituto de Ciências Biológicas, Universidade de Brasília, Brasília, DF. Orientador: Francisco Jose Lima Aragão , Embrapa Recursos Genéticos e Biotecnologia. aUm dos principais estresses que restringem a capacidade e a eficiência da planta realizar os processos bioquímicos importantes é a falta de água. As conseqüências para o vegetal vão desde alterações no volume celular à desnaturação de importantes proteínas, e dependendo da intensidade do estresse, poderá ocasionar a morte da planta. Com isso, as plantas apresentam mecanismos bioquímicos que respondem ao estresse hídrico. Estas respostas envolvem as funções de muitos ganes que podem ocorrer em segundos ou levar horas, conferindo ao vegetal a capacidade de tolerar aquela condição desfavorável. Um dos mecanismos gênicos envolvidos na geração de respostas ao estresse hídrico em plantas, é mediado pela expressão do gene OREB-CBF (Oehydration-responsive e/ement binding protein/C-repeat-binding factor). Este gene codifica para uma proteína regulatória, proteína OREB, um fator de transcrição que está envolvido na ativação de outros genes relacionados à tolerância ao estresse hídrico. Então, iniciamos um trabalho para a obtenção e caracterização biológica do promotor do gene OREB da mamoneira (Ricinus communis L.), conhecidamente uma planta com grande tolerância à seca, por meio da técnica da T AIL-PCR. Com a finalidade de estudar a expressão deste promotor sob condições de estresse hídrico, realizamos a construção quimérica do promotor ao gene repórter gus, originando um vetor final denominado pRCOREB1pro, utilizado para transformar plantas de fumo (Nicotiana tabacum). Folhas de uma planta transgênica foram utilizadas em um ensaio de simulação de estresse hídrico. Os resultados revelaram a expressão do gene gus, sob o controle do promotor OREB, apenas nas condições de estresse. Uma análise filogenética do gene RcOREB clonado mostrou que se trata de um gene do grupo A-5 (gene envolvidos com resposta aos estresses hídrico e salino). Este trabalho será a base para geração de plantas agricultáveis tolerantes ao estresse hídrico. aMamona aRicinus Communis aEstresse hídrico