02645nam a2200277 a 450000100080000000500110000800800410001910000210006024500860008126000160016730000100018350001760019352017930036965000110216265000160217365000110218965000130220065000200221365000170223365000180225065000150226865300230228365300270230665300160233365300180234911804642005-06-01       2001    bl uuuu  m   00u1 u    #d1 aPEIXER, M. A. S.  aSexagem de espermatozoides bovinos e producao de embrioes "in vitro" e "in vivo".  a2001.c2001  a70 p.  aDissertacao (Mestrado em Patologia Molecular) - Faculdade de Medicina, Universidade de Brasilia, Brasilia. Orientador: Jaime Santana e Antonio Emidio Dias Feliciano Silva.  aCom o objetivo de desenvolver e adaptar métodos de sexagem de espermatozóides, fundamentados na densidade das células espermáticas, foram desenvolvidos experimentos de separação espermática utilizando gradientes de Perco II e de BSA. Para os experimentos, foram utilizado sêmen congelado de touros da raça Nelore e Simental. Para a sexagem espermática, foram elaborados cinco diferentes grupos: Grupo NaCI (GNaCI) -uma coluna de Perco II 45% sobreposta à outra de Perco II 90%, com centrifugação a 700g, por 30 minutos; Grupo Perco II 7 Colunas (GP7C) -Gradiente de Perco II com 7 colunas, denominadas Perco II 30%, 40%, 50%, 60%, 70%, 80% e 90%, com centrifugação a 250g, por 10 minutos; Grupo NaCI-Modificado (GNaCI-M) -Gradiente Perco II 45/90 com centrifugação a 250g, por 10 minutos; Grupo BSA (GBSA) -Gradiente Perco" 45/90, com centrifugação a 700g, por 30 minutos. O sedimento obtido foi ressuspenso e novamente centrifugado em gradiente de BSA constituído de 3 colunas sobrepostas (12,5%; 20% e 25%), com velocidade de 100g, por 5 minutos; Grupo Controle (GC) -Neste grupo, o sêmen foi descongelado e não sofreu passagens por gradientes de densidade. O sêmen foi analisado quanto à perda de acrossoma, patologias de cabeça, peça intermediária e cauda, bem como a integridade da cromatina. Os resultados indicam que as metodologias utilizadas não afetaram a integridade da cromatina dos espermatozóides. O GP7C induziu a uma perda total ou parcial do acrossoma. A utilização do GP7C e GNaCI-M levaram a uma relação macho:fêmea diferente de 1: 1 com tendência a produção de fêmeas. Os trabalhos in vivo mostraram que a separação espermática visando a sexagem não foi viável para a produção de embriões viáveis, em vacas superovuladas.  acattle  aspermatozoa  aBovino  aEmbrião  aEspermatozóide  aFecundação  aInseminação  aProdução  aColheita de sêmen  aDiferenciação sexual  aRaca Nelore  aRaca Simental