02326nam a2200205 a 450000100080000000500110000800800410001910000170006024501020007726000830017952017210026265000240198365000110200765000110201865300120202965300110204170000200205270000260207270000220209821665562024-08-15       2015    bl uuuu     u00u1 u    #d1 aCOSTA, D. P.  aOtimização de protocolos para detecção molecular de viroses em inhame.h[electronic resource]  aMagistra, Cruz das Almas – BA, V. 27, N.3/4, p.442-451, Jul./Dez.2015.c2015  aResumo: A presença de sintomas de viroses é frequente nos plantios de inhame (Dioscorea rotundata) do Nordeste e constitui-se um dos fatores limitantes de produção. Mundialmente, já foram relatados na cultura, vírus dos gêneros Badnavirus, Curtovirus, Potyvirus. Destacam-se pela importância e distribuição geográfica, espécies dos gêneros Badnavirus e Potyvirus. O objetivo deste trabalho foi otimizar e tornar reprodutível protocolos para a detecção molecular de espécies dos gêneros Badnavirus e Potyvirus em inhame. Foram coletadas túberas de 40 plantas com e sem sintomas de viroses nos municípios de São Felipe, Maragojipe, São Félix e Cruz das Almas, Bahia. Para a detecção de Badnavirus, o DNA total foi extraído com base no protocolo de Kamal Sharma (2008) com modificações na quantidade de material vegetal processado, nas centrifugações, na concentração do DNA e na temperatura de anelamento no testede PCR. Enquanto para Potyvirus (Yam mosaic virus - YMV e Yam mild mosaic virus - YMMV), o RNA foi extraído testando as seguintes metodologias: Kits de extração de RNA Total Axygen, Easyzol e protocolo de Gambino (2008), com modificações semelhantes às avaliadas no protocolo de extração de DNA. Para Badnavirus detectou-se uma banda de 580 pares de bases (pb). Na detecção de Potyvirus, obteve-se um fragmento de 586 pb com os primers para o YMV. O YMMV não foi detectado em nenhuma das amostras analisadas. Contudo, os protocolos que apresentaram melhores respostas para a extração de DNA e RNA foram Kamal Sharma (2008) e Gambino (2008), respectivamente. Os fragmentos genômicos obtidos foram sequenciados, apresentando alta homologia com Badnavirus e YMV.  aDioscorea rotundata  aInhame  aVírus  aRCA-PCR  aRT-PCR1 aABREU, E. F. M.1 aMEISSNER FILHO, P. E.1 aSILVA, S. de O. e