03405nam a2200181 a 450000100080000000500110000800800410001910000250006024501210008526000160020630000100022250001560023252027730038865000110316165000200317265300220319265300090321421611002024-01-22       2023    bl uuuu  m   00u1 u    #d1 aSOUZA, J. F. da S. e  aEfeito das nanopartículas de óxido de zinco em oócitos bovinos expostos a choque térmico.h[electronic resource]  a2023.c2023  a71 f.  aDissertação (Mestrado em Genética e Biotecnologia) - Universidade Federal de Juiz de Fora, Juiz de Fora. Orientador: Luiz Sergio de Almeida Camargo.  aO choque térmico (HS) aumenta a produção de espécies reativas de oxigénio (ROS) em oócitos bovinos e reduz a competência de desenvolvimento. No entanto, o seu efeito nas células do cumulus circundantes não foi totalmente elucidado, embora essas células desempenhem um papel importante na competência do oócito. As nanopartículas de óxido de zinco (ZnONP) podem modular a geração de ROS em células de mamíferos, e podem contribuir para atenuar os efeitos do HS sobre oócitos e células do cumulus. Este estudo avaliou o efeito de ZnONP e HS durante a maturação in vitro de complexos de células do cumulus-oócitos (COCs) na geração de ROS e atividade mitocondrial em oócitos e nas células do cumulus que os rodeiam. Os COCs imaturos foram distribuídos aleatoriamente em quatro grupos de maturação in vitro (MIV): Controle (MIV sob 38,5°C por 24h), ZnONP (MIV a 38,5°C + 1 μg/mL ZnONP por 24h), HS (MIV sob 41,5°C por 24h) e HS+ZnONP (MIV sob 41,5°C + 1 μg/mL ZnONP por 24h). No primeiro ensaio (sete repetições), os oócitos maturados in vitro foram fertilizados in vitro e os zigotos presumidos foram cultivados durante oito dias. No segundo ensaio (duas repetições), as células do cumulus foram removidas dos oócitos após a MIV. Após a MIV. Os oócitos desnudados e as respectivas células do cumulus foram corados com os reagentes CellROX green, MitoTracker Red CMXRos e Hoechst 33342 (Thermo Fischer). As imagens foram captadas com um microscópio de epifluorescência e a intensidade da fluorescência foi calculada com o software ImageJ. As taxas mais baixas (P&lt0,05) de blastocistos foram encontradas nos grupos HS (22,4±8,7%) e HS+ZnONP (18,4±3,2%) e a mais alta (P&lt0,05) foi encontrada no grupo ZnONP (52,2±7,3%) quando comparado ao controle (42,1±9,2%). Os oócitos dos grupos ZnONP (22,7±1,1 unidades arbitrárias [au]), HS (23,4±1,3 au) e HS+ZnO (22,6±0,9 au) apresentaram mais ROS (P&lt0,05) do que os oócitos do grupo de controlo (18,3±0,9 au). A atividade mitocondrial aumentou (P&lt0,05) apenas no grupo HS+ZnONP (35,4±2,6 au) e não foram encontradas diferenças (P&gt0,05) (P&gt0,05) entre os grupos de controlo (21,7±2,5 au), ZnONP (27,9±2,8 au) e HS (28,0±2,9 au). Em contraste com os oócitos submetidos a choque térmico, as células do cumulus submetidas a choque térmico (grupo HS) apresentaram menor (P&lt0,05) geração de ROS (6,9±0,2 au) e atividade mitocondrial (3,7±0,1 au) do que as células do cumulus de controlo (10,2±1,1 e 6,8±0,8 au, respetivamente) e ZnONP (10,3±0,7 e 6,3 ±0,4 au, respetivamente). A geração de ROS (8,9±1,4 au) e a atividade mitocondrial (6,7±1,1 au) nas células do cumulus do grupo HS+ZnONP foram semelhantes (P&gt0,05) ao grupo de controle.  aBovino  aEmbrião Animal  aEstresse térmico  aPIVE