02988nam a2200145 a 450000100080000000500110000800800410001902400380006010000200009824501510011826000880026950000910035752023050044865300890275321562352023-08-30       2023    bl uuuu     u00u1 u    #d7 a10.51189/conbracib2023/192422DOI1 aSOUZA, A. M. de  aScreening de primers para detecção de lactobacillus através da técnica de pcr em tempo real em probióticos e produtos.h[electronic resource]  aIn: CONGRESSO BRASILEIRO DE CIÊNCIAS BIOLÓGICAS ON-LINE, 4.. 2023, on-line.c2023  aPublicado na Revista Multidisciplinar de Educação e Meio Ambiente, v. 4, n. 2, 2023.  aA etapa de desenho de primers é essencial para técnica de PCR em tempo real, uma vez que, características como: comprimento de primer, temperatura de melting (Tm), temperatura de anelamento, tamanho de amplicon e percentual de conteúdo CG determinam a especificidade do primer. Dessa forma, nesse estudo para detecção de Lactobacillus em produtos lácteos e probióticos, foram selecionados primers específicos para o gênero Lactobacillus desenhados a partir de regiões de identidade dentro da sequência de DNA ribossômico 16S (rDNA) de uma ampla diversidade de Lactobacillus spp., para definir com mais precisão a diversidade de Lactobacillus encontrados nestes produtos e detectar as principais espécies em relação à carga total de Lactobacillus por PCR em tempo real. Embora o consumo microrganismos ocorra há milhares de anos, apenas no século XX pesquisas científicas passaram a ser realizadas a fim de determinar os reais benefícios de produtos lácteos e fórmulas de probióticos. A maioria dos microrganismos probióticos são bactérias do ácido lático, Gram-positivo, não esporulantes e são definidos como microrganismos vivos que conferem benefícios à saúde do hospedeiro, de acordo com a quantidade administrada. As bactérias do ácido lático são um grupo microrganismos de grande diversidade taxonômica, e sendo assim, deve-se buscar a identificação inequívoca antes da seleção final de um microrganismo eleito à probiótico. A identificação de bactérias do ácido lático por métodos fenotípicos é morosa, sendo necessários, inúmeros testes para determinar uma linhagem de Lactobacillus ao nível de espécie, além das divergências na identificação. Dessa forma, técnicas moleculares tem ganhado espaço, na identificação inequívoca e ágil de gêneros de bactérias do ácido lático. A seleção de oligonucleotídeos, deste trabalho, orienta a escolha de primers para detectar e distinguir espécies de Lactobacillus. Espécies como, por exemplo, Lactobacillus casei/paracasei e Lactobacillus rhamnosus são extremamente semelhantes, o que causa muito erro de identificação, mas os primers selecionados neste trabalho distinguem perfeitamente essas espécies, como observado na tabela 5, com o auxílio dos controles positivos.  aPCR real time bactérias lácteas oligonucleotídeos formulações lácteas DNA alvo