02637nam a2200313 a 450000100080000000500110000800800410001910000150006024000830007524501310015826000690028949000950035852015480045365000160200165000120201765000240202965000130205365000130206665000090207965300220208865300260211065300290213665300260216565300300219165300370222170000200225870000210227870000240229921522682023-03-13       2023    bl uuuu     u0uu1 u    #d1 aNIELEN, S.  aIsolation of giant cells from legume rootgalls by laser microdissection (LMD).  aIsolamento de células gigantes em galhas de raízes de leguminosas por microdissecção a laser (MDL).h[electronic resource]  aBrasília, DF: Embrapa Recursos Genéticos e Biotecnologiac2023  a(Embrapa Recursos Genéticos e Biotecnologia. Boletim de Pesquisa e Desenvolvimento, 379).  aO desenvolvimento de novas estratégias para a produção de cultivares resistentes aos nematoides das galhas inclui o maior conhecimento de genes envolvidos no desenvolvimento de células gigantes (CG), formadoras dos sítios de alimentação, durante a infecção de plantas suscetíveis por nematoides da galha. A análise transcricional baseada em todo o tecido da raiz ou da galha formada pelo parasita resulta na identificação de numerosos genes diferencialmente expressos. Para identificar genes específicos da interação planta-nematoides formadores de galhas (NFG) e genes de suscetibilidade que possibilitam a infecção, uma abordagem promissora é estudar o transcritoma específico das CGs. Neste estudo, a técnica de microdissecção a laser foi estabelecida para isolamento de CGs produzidas por Meloidogyne spp., em formação nas raízes de leguminosas (soja e amendoim) suscetíveis. Para tal, CGs de segmentos de raízes coletados após a inoculação com Juvenis 2 (J2) e incluidos em Paraplast foram microdissectadas a laser, e utilizadas para extração do RNA, seguida da síntese de DNA complementar, e da amplificação por PCR de genes expressos constitutivamente, como indicação indireta da integridade do RNA. O detalhamento do método e fluxo de trabalho aqui descritos para microdissecção a laser de CGs e células vasculares das raízes dessas leguminosas, com subsequente isolamento de RNA, constitui uma ferramenta importante para a análise molecular detalhada durante a interação planta-patógeno.  aGiant cells  aPeanuts  aRoot-knot nematodes  aSoybeans  aAmendoim  aSoja  aCélulas gigantes  aLaser microdissection  aMicrodissecção a laser  aNematoides das galhas  aSingle-cell transcriptome  aTranscritoma célula-específico1 aSA, M. F. G. de1 aGUIMARAES, P. M.1 aARAUJO, A. C. G. de