04878nam a2200205 a 450000100080000000500110000800800410001910000200006024501850008026000160026530000110028150002140029252040260050665000360453265000220456865000180459065000100460865000200461865300340463821463352022-09-12 2022 bl uuuu m 00u1 u #d1 aSOUSA, J. A. T. aEmbriogênese somática, criopreservação e patogenicidade de fungos endofíticos do híbrido Pinus elliottii var. elliottii x P. caribaea var. hondurensis.h[electronic resource] a2022.c2022 a108 f. aDissertação (Mestrado em Engenharia Florestal) - Universidade Federal do Paraná. Orientador: Celso Garcia Auer. Coorientadores: Juliana Degenhardt, Álvaro Figueredo dos Santos, Giovana Bomfim de Alcantara. aResumo. O híbrido Pinus elliottii var. elliottii (PEE) x Pinus caribaea var. hondurensis (PCH) vem se destacando pela produção de madeira e resina. Visando dar suporte ao melhoramento genético do híbrido, este trabalho teve como objetivos (I) otimizar um protocolo de clonagem baseado na embriogênese somática, (II) otimizar um protocolo de criopreservação de massas embriogênicas e (III) verificar a patogenicidade de fungos endofíticos encontrados em sementes imaturas do híbrido. Para a embriogênese somática foram analisados o efeito do genótipo na indução da embriogênese somática. Na fase de maturação, foram avaliadas diferentes composições de meio e estresses abióticos, e analisado o efeito de antibiótico na taxa de crescimento das massas embriogênicas. Na criopreservação, foram testadas duas soluções crioprotetoras, PSD e PVS3, avaliando a concentração de PSD e o tempo de exposição ao PVS3 das massas embriogênicas. Para os fungos endofíticos, foram realizados experimentos para avaliar a patogenicidade em sementes, plântulas in vitro e mudas de Pinus elliottii var. elliottii. A iniciação de massas embriogênicas mostrou-se dependente do genótipo, com uma taxa de indução de 5,45 %. Nos experimentos de maturação, não foi observada formação de embriões somáticos. No que diz respeito a criopreservação, os dois protocolos mostraram-se aplicáveis às massas embriogênicas do híbrido. No experimento em que massas embriogênicas foram tratadas com o crioprotetor PVS3, após 90 dias, o tempo de exposição não influenciou no crescimento das massas submetidas a criopreservação. A utilização de antibióticos no meio de proliferação, não afetou estatisticamente a taxa de crescimento das massas embriogênicas. Dentre os fungos endofíticos isolados, Fusarium spp. e Diplodia pinea foram patogênicos em sementes, plântulas in vitro e em mudas de Pinus elliottii var. elliottii. A espécie Sporothrix pallida foi relatada pela primeira vez associada ao gênero Pinus. Abstract. The hybrid Pinus elliottii var. elliottii (PEE) x Pinus caribaea var. hondurensis (PCH) is of great interest for the production of wood and resin. Aiming to support the genetic breeding program, the objectives of this work were (I) to optimize a somatic embryogenesis protocol, (II) to optimize a cryopreservation of embryogenic masses protocol and (III) to evaluate the pathogenicity of endophytic fungi isolated from immature seeds of the hybrid. For somatic embryogenesis, the effect of genotype on initiation of somatic embryogenesis was evaluated. In the maturation phase, several compositions of medium and abiotic stresses were evaluated, and the effect of antibiotics on the growth rate of embryogenic masses was also evaluated. In cryopreservation, two cryoprotectant solutions were tested, PSD and PVS3 and the concentration of PSD and the time of exposure to PVS3 of the embryogenic masses were evaluated. Regarding the endophytic fungi, we carried out experiments to evaluate the pathogenicity in seeds, in vitro seedlings and seedlings of Pinus elliottii var. elliottii. We observed that the initiation of embryogenic masses was genotype dependent, with an initiation rate of 5.45%. Regarding the maturation experiments, the development of somatic embryos was not observed. In the cryopreservation experiments, both protocols proved to be applicable to the embryogenic masses of the hybrid. In the experiment in which embryogenic masses were treated with the cryoprotectant PVS3, after 90 days, the exposure time did not influence the growth of the masses submitted to cryopreservation. The use of antibiotics in the proliferation medium did not affect the growth rate of embryogenic masses. Among the isolated endophytic fungi, Fusarium spp. and Diplodia pinea were pathogenic for seeds, in vitro seedlings and seedlings of Pinus elliottii var. elliottii. The species Sporothrix pallida was reported for the first time associated with the genus Pinus. aPinus caribaea var. hondurensis aCriopreservação aEmbriogénese aFungo aPraga de Planta aPinus elliottii var elliottii