02992nam a2200325 a 450000100080000000500110000800800410001910000230006024501530008326001290023630000200036552018990038565000200228465000130230465000190231765300290233665300240236565300490238970000210243870000170245970000200247670000220249670000180251870000210253670000200255770000240257770000210260170000200262270000240264221277582020-12-07 2020 bl uuuu u00u1 u #d1 aSILVA, C. de O. G. aProdução heteróloga e caracterização funcional de mono­-oxigenases líticas de polissacarídeos de fungos e bactérias.h[electronic resource] aIn: ENCONTRO DE PESQUISA E INOVAÇÃO DA EMBRAPA AGROENERGIA, 6., 2020, Brasília, DF. Anais... Brasília, DF: Embrapac2020 ap. 224-232cil. aMono-oxigenases líticas de polissacarídeos (LPMOs) são enzimas de grande interesse industrial por serem capazes de despolimerizar polissacarídeos recalcitrantes, como a celulose, e apresentarem sinergismo com hidrolases na degradação destes polímeros, tendo potencial para aplicação em diversos processos. Este trabalho teve como objetivo produzir e caracterizar LPMOs recombinantes de origem fúngica e bacteriana e desvendar seu potencial para aplicações biotecnológicas. Três LPMOs dos fungos Neurospora crassa, Gloeophyllum trabeum e Botryobasidium botryosum (subfamília AA9) e cinco LPMOs das bactérias extremófilas Thermobifida fusca, Hahella ganghwensis, Salinispora pacifica, Verrucosispora maris e Moritella dasanensis (subfamília AA10) foram selecionadas e expressas pela levedura metilotrófica Pichia pastoris X­-33 (reclassificada como Komagataella phaffii). As enzimas recombinantes foram caracterizadas combinando ensaio fluorométrico e ensaio de despolimerização de celulose avaliado por cromatografia líquida acoplada a espectrometria de massas. Das oito LPMOs recombinantes obtidas, cinco foram caracterizadas e mostraram -se funcionais por pelo menos um dos métodos utilizados, sendo que três foram capazes de despolimerizar a celulose. A LPMO da bactéria S. pacifica apresentou regioseletividade C1/C4, enquanto as pertencentes a H. ganghwensis e T. fusca apresentaram regioseletividade C1, apresentando potencial para diferentes aplicações biotecnológicas. A capacidade de despolimerizar a celulose faz desse conjunto de LPMOs recombinantes um ativo tecnológico que poderá ser avaliado como insumo para o desenvolvimento de novos produtos/processos que dependem da despolimerização da celulose, p. ex.:, sacarificação de biomassa lignocelulósica para produção de etanol 2G, ração animal, indústria têxtil, entre outras aplicações. aPichia pastoris aCelulose aEspectrometria aBactérias extremófilas aFungos filamentosos aMono-oxigenases líticas de polissacarídeos1 aRODRIGUES, K. B.1 aSOUZA, A. A.1 aMONCLARO, A. V.1 aANASTÁCIO, G. S.1 aMENDES, T. D.1 aGONCALVES, S. B.1 aSALUM, T. F. C.1 aRODRIGUES, D. de S.1 aDAMASO, M. C. T.1 aABDELNUR, P. V.1 aFAVARO, L. C. de L.