03257nam a2200181 a 450000100080000000500110000800800410001910000200006024501440008026000160022430000100024050002200025052025410047065000130301165000090302465300220303365300200305521245132020-08-23 2020 bl uuuu m 00u1 u #d1 aLOPES, S. da S. aAnálise funcional do gene Pstol1 de arroz e de seus homólogos em milho e sorgo em plantas transgênicas de tabaco.h[electronic resource] a2020.c2020 a81 p. aTese (Doutorado em Bioengenharia) - Universidade Federal de São João del-Rei, Sete Lagoas, 2020. Orientadora: Sylvia Morais de Souza Tinoco. Coorientadoras: Andréa Almeida Carneiro e Cláudia Teixeira Guimarães. aA baixa disponibilidade de fósforo (P) no solo é uma das maiores limitações para a produtividade das culturas, especialmente em solos tropicais. O gene PhosphorusStarvation Tolerance 1 (OsPstol1) codifica uma proteína quinase que aumenta a área da superfície radicular, a aquisição de P e a produtividade de grãos em arroz. Homólogos do OsPstol1 foram identificados em sorgo e milho por mapeamento associativo e de QTL. A proteína OsPSTOL1 e ZmPSTOL3.06 são classificadas como quinases com receptor citoplasmatico (RLCKs), e as proteínas SbPSTOL1, ZmPSTOL8.02 e ZmPSTOL8.05_1 como proteínas quinases receptoras de membrana (RLKs), sendo que todas as proteínas apresentam o domínio serinatreonina quinase em comum. O objetivo deste trabalho foi analisar a função dos genes OsPstol1 de arroz e seus homólogos em milho (ZmPstol3.06, ZmPstol8.02 e ZmPstol8.05_1) e sorgo (Sb07g002840, Sb03g031690 e Sb03g006765) por meio da superexpressão em tabaco. Os genes Pstol1 foram clonados sob controle do promotor ubiquitina e o gene Bar como marcador de seleção e utilizados na transformação de tabaco via Agrobacterium tumefaciens. As dez proteínas preditas de tabaco com identidade entre 55% e 58% a OsPSTOL1 ficaram em um ramo separado das proteínas das gramíneas, apresentando diferentes combinações de domínios. A integração dos transgenes foi confirmada por PCR e após a obtenção de eventos cópia única e com expressão média e alta do transgene foram geradas linhagens homozigotas. Em meio de cultura com baixo P, as plantas superexpressando os genes OsPstol1 e ZmPstol3.06 apresentaram maior superfície radicular total, e as plantas superexpressando Sb03g006765 maior superfície de raízes superfinas comparadas ao controle negativo. Sob alto P as plantas superexpressando os genes ZmPstol8.02 e Sb07g002840 apresentaram maior superfície radicular total e de raízes superfinas em relação ao controle negativo. Em condição de solo, as plantas superexpressando os genes OsPstol1, ZmPstol3.06, Sb03g031690 e Sb03g006765 apresentaram maior peso seco de parte aérea e altura de plantas sob baixo P e o conteúdo de P de parte aérea foi maior nos eventos OsPstol1, ZmPstol3.06 e Sb03g031690. Além disso, as plantas superexpressando OsPstol1 apresentaram peso seco de raiz superior ao controle sob alto P. Os resultados indicaram que o Pstol1 e seus homólogos de milho e sorgo têm potencial para aumentar a superfície radicular, a aquisição de P e a produtividade em plantas dicotiledôneas. aFósforo aRaiz aProteína quinase aSuperexpressão