04086nam a2200193 a 450000100080000000500110000800800410001910000200006024501970008026000160027750002140029352032540050765000130376165000250377465000210379965000250382065300300384565300170387520829752017-12-20       2017    bl uuuu  m   00u1 u    #d1 aFERREIRA, L. G.  aCaracterização de genes relacionados à síntese de fitormônios no desenvolvimento de ovários de plantas de reprodução sexual e apomítica de Brachiaria brizantha.h[electronic resource]  a2017.c2017  aTese (Doutorado em Biologia Molecular) - Instituto de Ciências Biológicas, Universidade de Brasília, Brasília, DF. Orientadora: Vera Tavares de Campos Carneiro, Embrapa Recursos Genéticos e Biotecnologia.  aBrachiaria brizantha, forrageira da família Poaceae, possui plantas de reprodução sexual ou assexual por apomixia, as quais apresentam saco embrionário (SE) do tipo Polygonum e Panicum, respectivamente. O objetivo desta tese de doutorado foi identificar a associação de genes da via de fitormônios disponíveis em bibliotecas de RNA-Seq de ovários de B. brizantha, com o desenvolvimento de SE de plantas sexuais e apomíticas. A análise destas bibliotecas de RNA-Seq em estádios de megasporogênese e megagametogênese revelou genes diferencialmente expressos entre os modos de reprodução sexual e apomítico, e associados com a via de fitormônios. Entre eles foram estudados: BbrizGID1, com similaridade de 92% ao gene receptor de giberelina GID1 (Gibberellin Insensitive Dwarf1), BbrizIPT9, com 90% de similaridade com o gene IPT9 (isopentenyltransferase 9), relacionado com a biossíntese de citocinina e BbrizLOG com similaridade de 100% com o gene LOG (LONELY GUY), associado com a ativação da citocinina. Foi detectada a presença destes genes nos genótipos de B. brizantha sexual e apomítico. Os genes em estudo apresentaram expressão diferenciada nos diferentes estádios de desenvolvimento dos SE. BbrizGID1 apresentou maior expressão no início da megasporogênese de plantas sexuais e apomíticas, BbrizIPT9 em megasporogênese e megagametogênese de plantas sexuais e BbrizLOG nos estádios finais da megasporogênese e início da megagametogênese em plantas apomíticas. Os transcritos de BbrizGID1 foram detectados na célula mãe do megásporo (CMM) de B. brizantha sexual e apomítica. Somente nas plantas apomíticas, a expressão foi também observada nas células nucelares, região na qual as células iniciais apospóricas se diferenciam para formar o SE de plantas apomíticas. BbrizIPT9 apresentou forte expressão na CMM tanto de plantas apomíticas como de sexuais. Os transcritos de BbrizLOG foram detectados na CMM e forte expressão na célula inicial apospórica de ovários de plantas apomíticas, célula que formará o SE do tipo Panicum. A expressão dos genes AtGID1a e AtGID1b de A. thaliana foi localizada nos tegumentos interno e externo dos óvulos desta planta modelo, sem expressão na CMM e nas células nucelares. A superexpressão ectópica de AtGID1a e a ausência de expressão de AtIPT9 em mutante de A. thaliana ocasionaram a diferenciação de células semelhantes à CMM na região nucelar, sugerindo a associação destes genes com o desenvolvimento do óvulo e SE. Estas células semelhantes à CMM, detectadas em plantas transgênicas superexpressando AtGID1a, não apresentaram identidade de CMM, enquanto, as células observadas no mutante ipt9 não tiveram a sua identidade de CMM verificada. Não foram observados duplos SE durante a análise de óvulos maduros destas plantas, sugerindo que apenas uma CMM completou a divisão meiótica e entrou no processo de gametogênese. Nosso estudo demonstrou que os três genes associados as vias de fitormônios atuam nos estádios iniciais do desenvolvimento do SE de plantas apomíticas e sexuais de B. brizantha. A participação no desenvolvimento reprodutivo dos genes AtGID1a e AtIPT9 em A. thaliana foi também demonstrada.  aApomixia  aBrachiaria Brizantha  aCapim Brachiaria  aReprodução Vegetal  aDesenvolvimento do óvulo  aFitormônios