04128nam a2200181 a 450000100080000000500110000800800410001910000200006024501170008026000160019730000100021350002190022352034100044265000260385265000170387865300330389565300180392820534032016-09-23       2015    bl uuuu  m   00u1 u    #d1 aNUNES, H. C. A.  aInfluência do tipo e das variáveis de celulases por Ganoderma lucidum e Trichoderma sp.h[electronic resource]  a2015.c2015  a91 f.  aDissertação (Mestrado em Engenharia Ambiental) - Centro de Ciências Tecnológicas, Universidade Regional de Blumenau, Blumenau. Orientadora: Lorena Benathar Ballod Tavares; Co-orientadora: Cristiane Vieira Helm.  aO uso de biomassas lignocelulósicas, sobretudo resíduos, ricos em açúcares, para a geração de energia na forma de etanol de segunda geração, é uma alternativa para mitigar alguns problemas que a produção de biocombustíveis vem enfrentando, como por exemplo, a disponibilidade de terras para as monoculturas de cana-de-açúcar e milho. Além disto, o uso destas biomassas minimiza problemas ambientais como a sua disposição em aterros e aumenta a quantidade de empregos e rendas ao longo da cadeia de produção. Todavia, para a produção de etanol a partir dessas biomassas etapas de pré-tratamento para a retirada da lignina e de hidrólise da celulose são necessárias. A hidrólise ainda é uma das etapas de maior custo, principalmente pelo valor elevado das enzimas (celulases) necessárias para a quebra da celulose e liberação da glicose. Por este motivo estudos baseados na produção destas celulases, principalmente por fungos, e na otimização de extratos usando biomassas lignocelulósicas vem sendo desenvolvidos. Neste estudo foi analisada a influência do tipo de cultivo (fermentação submersa- FSm e em estado sólido - FES) e de algumas variáveis de cultivo (pH inicial, umidade, concentração de soja e solução de sais), com auxílio de planejamento fatorial na produção das enzimas endoglucanase (CMCase) exoglucanase (Avicelase) e β-glicosidase (Beta) produzidas por Trichoderma sp (TRI1-LEB), Ganoderma lucidum (EF-35), isoladamente e em cultura mista. Além disto, foram analisados três métodos de concentração de proteínas e o perfil proteico por eletroforese SDS-PAGE. O extrato com maior atividade enzimática foi aplicado na hidrólise de serragem de Eucalyptus urophylla e do hibrido de E. urophylla e E. grandis. O cultivo isolado de G.lucidum apresentou as melhores atividades enzimáticas para FES e FmS (1,468 UI/g e 0,057 UI/mL para CMCase 1,441 UI/g e 0,054 UI/mL para Avicelase e 9,193UI/g e 0,500 UI/mL para Beta, respectivamente). A cultura mista foi o cultivo que menos sofreu influência das variáveis analisadas. A FES apresentou atividades enzimáticas maiores do que a FSm, sendo que o cultivo isolado de G. lucidum apresentou maior diferença entre esses dois processos fermentativos. Entre as variáveis da FES, a umidade foi a mais significante. De forma geral, menores umidades apresentaram maiores atividades enzimáticas. Para a FmS a atividade de Avicelase não mostrou influência dos parâmetros analisados. Nas demais enzimas o pH inicial foi a variável mais significativa, sendo que os valores mais ácidos acarretaram em maiores atividades de celulases. Os métodos de concentração utilizados aumentaram a quantidade de proteínas totais das amostras. Todavia, constatou-se que a concentração pela retirada de água em temperatura amena foi a única técnica que aumentou a atividade das celulases. Pelo perfil proteico foi possível observar algumas proteínas que podem ser responsáveis pela maior atividade dessas enzimas. Mesmo após a concentração do melhor extrato, o mesmo não apresentou bons resultados quando aplicado na hidrólise das espécies de eucalipto testadas (máximo de 0,14g/L de glicose). A partir destes resultados conclui-se que a FES é o processo mais indicado para a produção de celulases, principalmente usando G. lucidum em menor umidade e concentrando por estufa a vácuo.  aAtividade Enzimática  aEletroforese  aConcentração de proteínas  aCultura mista