02560nam a2200169 a 450000100080000000500110000800800410001910000250006024501230008526000160020830000110022450001970023552018930043265300230232565300240234865300180237220324612016-02-22 2015 bl uuuu m 00u1 u #d1 aARAÚJO, A. C. B. de aEnzimas celulolíticas e acessórias da microbiota brasileira para desconstrução de biomassa.h[electronic resource] a2015.c2015 a114 f. aDissertação (Pós-Graduação) - Universidade Católica de Brasília, Brasília, DF. Orientadora CNPAE: Dra. Betania Ferraz Quirino Co-orientadora CNPAE: Dra. Léia Cecília de Lima Fávaro aCom a crescente demanda mundial de combustíveis e materiais oriundos do petróleo, são necessárias alternativas sustentáveis a fim de minimizar o impacto ambiental. Atualmente os biocombustíveis e produtos sustentáveis são produzidos a partir de matérias-primas como a cana-de-açúcar ou o milho. Contudo, os resíduos agroindustriais, como o bagaço de cana, podem ser convertidos a açúcares fermentáveis. A utilização do material remanescente das indústrias reduziria a competição pelo uso destas matérias-primas no setor alimentício. Para que esse material seja convertido a açúcares são necessárias enzimas para bioconversão, não somente as celulases, mas também enzimas auxiliares, como por exemplo, as monoxigenases de polissacarídeos. Nesse contexto, este trabalho teve por objetivo avaliar a produção de celulases de duas linhagens de fungos filamentosos, o CBF13 oriundo de solo de Cerrado e o 147, isolado de folha de cana-de-açúcar. Ensaios enzimáticos em microplaca visando as atividades de FPase, -glicosidase, endoglucanase e exoglucanase foram realizados, obtendo uma alta atividade de FPase e endoglucanase. Além de celulases, outra importante classe de enzimas para a desconstrução de biomassa é a das enzimas acessórias que incluem as monoxigenases dependentes de cobre (LPMO). A fim de identificar uma monoxigenase em fungo filamentosos foi realizada uma PCR no isolado CBF13, encontrando similaridade com LPMO de outros Penicillia. Para identificação de enzimas desta classe, foi realizada uma triagem em biblioteca metagenômica de pequenos insertos de rúmen de caprino, com auxílio de primers degenerados com foco nos filos Firmicutes e Bacterioidetes. Estes primers foram testados em indivíduos da ordem Bacillales e em biblioteca de rúmen de caprino, contudo não foi possível amplificar nenhuma LPMO bacteriana. aEnsaio enzimático aFungos filamentosos aMonoxigenases