03895nam a2200181 a 450000100080000000500110000800800410001910000170006024500790007726000160015630000100017250001560018252033030033865000090364165300280365065300230367865300120370120139632016-02-19       2015    bl uuuu  m   00u1 u    #d1 aNEGRI, B. F.  aCaracterização funcional de homólogos do gene Pstol1 de arroz em milho.  a2015.c2015  a64 f.  aDissertação (Mestrado em Bioengenharia) - Universidade Federal de São João del Rei, São João del Rei. Orientadora: Sylvia Morais de Sousa Tinoco.  aO milho é considerado uma cultura com alta exigência de fertilidade do solo, portanto o desenvolvimento de genótipos de milho mais eficientes no uso de fósforo é vantajoso tanto para agrossistemas de baixa quanto para os de alta produtividade. As plantas desenvolveram diversos mecanismos de adaptação a condições de baixo fósforo (P), o que indica que esta é uma característica complexa. O principal mecanismo relacionado com a eficiência na aquisição de P envolve mudanças na morfologia radicular. Em arroz, o Phosphorus-starvation tolerance 1 (Pstol1) foi identificado como o gene responsável pelo locus Pup1, que codifica uma proteína quinase, responsável pelo aumento do crescimento precoce das raízes, absorção de P e, consequentemente, a produção de grãos. Recentemente o grupo da Embrapa Milho e Sorgo realizou um mapeamento de QTLs em uma população de linhagens endogâmicas recombinantes de milho, onde foram identificados genes candidatos à homólogos do Pstol1 de arroz em milho (ZmPstol1, ZmPstol4, e ZmPstol6) baseado na co-localização de QTLs relacionados com caracteristicas radiculares e de eficiência de uso de P em solução nutritiva sob deficiência de P. No presente estudo, objetivou-se analisar o perfil transcricional dos homólogos do gene Pstol1 de arroz em milho, ZmPstol1, ZmPstol4 e ZmPstol6. Foi analisada a expressão gênica espacial e temporal destes homólogos Pstol1 de milho em dois genótipos de milho contrastantes para aquisição de P (L3-eficiente e L22 - ineficiente) e também foram analisadas suas regiões codificantes e não codificantes. A expressão gênica foi determinada através de PCR quantitativo (qPCR-RT) utilizando ensaios TaqMan em planta adulta cultivada em vasos em casa de vegetação e plantas crescidas em solução nutritiva sob baixo P (2,5uM) em um sistema de pasta de papel. O perfil de expressão de genes foi avaliado em diferentes tecidos de milho (inflorescência, folha, caule, semente e raiz) colhidos durante o florescimento, revelando que ZmPstol1 e ZmPstol6 são mais expressos nas raízes e inflorescência da linhagem ineficiente (L22), enquanto ZmPstol4 foi mais expresso nestes mesmos tecidos, mas na linguagem eficiente (L3). Também foram analisadas diferentes partes do sistema radicular (raiz primária, lateral, raízes seminais não embrionárias, raízes seminais embrionárias e a coroa da raiz) de L3 e L22 cultivadas em solução nutritiva com 17 dias após a germinação. Estes resultados mostraram que ZmPstol1 e ZmPstol6 foram mais expressos em todos os tipos de raiz de linhagem L22 e ZmPstol4 foi mais expresso em L3 na raiz primária, especialmente na zona de diferenciação. A análise dos elementos cis da região promotora mostrou que há diversos elementos potencialmente relacionados com a raiz e a resposta a estresse. Quinases citoplasmáticas compreendem a maior família de receptores em plantas e as diversas estruturas dos domínios das quinases sugerem que há uma probabilidade de haver várias funções biológicas para essas proteínas. Estes resultados lançam uma luz sobre as funções dos genes ZmPstol, no entanto, mais estudos funcionais são necessários para compreender o caminho real que conduz a modulação do sistema radicular pelo Pstol1.  aRaiz  aEficiência de fósforo  aExpressão gênica  aQuinase