02250nam a2200253 a 450000100080000000500110000800800410001910000220006024501340008226000440021630000100026049000500027052014790032065000200179965000130181965000210183265000240185365300230187765300320190065300220193265300110195465300120196570000190197720073982015-09-10 2014 bl uuuu u0uu1 u #d1 aLOBO, A. M. B. O. aConsiderações estatísticas na análise de dados de expressão gênica gerados pela técnica de RT-qPCR.h[electronic resource] aSobral: Embrapa Caprinos e Ovinosc2014 a32 p. a(Embrapa Caprinos e Ovinos. Documentos, 112). aA transcriptase reversa (RT) seguida de quantificação utilizando a técnica da reação em cadeia da polimerase (qPCR) em tempo real ou, simplesmente reverse transcription-qPCR (RT-qPCR), é um método in vitro para amplificação enzimática de sequências definidas de DNA complementar obtido a partir do RNA. A técnica de RT-qPCR é uma das mais utilizadas em experimentos de quantificação da expressão gênica por ser considerado um dos métodos mais sensível e específico de quantificação gênica dos que outros utilizados para esta finalidade. No entanto, para obter resultados, pela técnica de RT-qPCR, que possam ser adequadamente analisados é necessário que o experimento tenha um desenho experimental com tratamentos, ensaios, unidade experimental e delineamento bem definidos. Muitas vezes, as considerações estatísticas, principalmente, no delineamento experimental para distribuição dos genes e das amostras (biológicas e técnicas) na placa de PCR (para controle de variação) não são consideradas e, dados gerados dessa maneira não são confiáveis. Após obtenção dos resultados da quantificação é primordial, antes de qualquer análise, avaliar a distribuição dos dados por meio de testes de normalidade. Baseado nisso, recomenda-se, para a comunidade acadêmica, como um roteiro prático para o correto delineamento experimental e a correta análise estatística dos dados para experimentos que utilizam a técnica de RT-qPCR. aGene expression aGenetics aGenética animal aGenética molecular aExpressão gênica aExpressão gênica relativa aGenetic processes aRT-PCR aRT-qPCR1 aLOBO, R. N. B.