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Registro Completo |
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Biblioteca(s): |
Embrapa Cerrados; Embrapa Recursos Genéticos e Biotecnologia. |
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Data corrente: |
19/03/2012 |
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Data da última atualização: |
12/11/2024 |
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Tipo da produção científica: |
Orientação de Tese de Pós-Graduação |
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Autoria: |
BESSA, I. R. |
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Afiliação: |
ISABELA REBOUÇAS BESSA. |
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Título: |
Perfil da expressão de genes candidatos para aquisição da competência durante o crescimento ovocitário em bovinos. |
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Ano de publicação: |
2011 |
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Fonte/Imprenta: |
2011. |
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Páginas: |
72 f. |
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Idioma: |
Português |
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Notas: |
Dissertação (Mestrado) - Faculdade de Agronomia e Medicina Veterinária, Universidade de Brasília, Brasília, DF. Orientadora: Margot Alves Nunes Dode, Embrapa Recursos Genéticos e Biotecnologia. |
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Conteúdo: |
O objetivo do presente estudo foi estudar o perfil da expressão de genes candidatos para a aquisição da competência durante o crescimento ovocitário em bovinos utilizando ovócitos de diferentes tamanhos provenientes de várias categorias de folículos. Os genes candidatos foram selecionados por estarem possivelmente envolvidos com a aquisição da competência (BMP15, 00SP1, HIFOO, H2A, H3A, H4, SLBP, DNMT1, DNMT3B, HAT, HDAC e SUV39Hl). Para determinar o tamanho dos ovócitos a serem utilizados, foi realizado um pré- experimento, em que os folículos pré-antrais foram classificados morfologicamente, agrupados em diferentes categorias em primordial, primário, secundário inicial e secundário final. Após a classificação, os ovócitos de cada folículo foram individualmente isolados e medidos. Folículos pré-antrais e antrais foram isolados de ovários
de vacas Nelore (Bos taurus indicusy, por dissociação mecânica utilizando o Tissue Chopper. Para o isolamento dos ovócitos, os folículos foram expostos à colagenase tipo 11 (0,5 mg/ml) e então submetidos a sucessivas pipetagens. Os ovócitos foram medidos através do programa Motic images Plus 2.0 e classificados de acordo com seu diâmetro nas seguintes categorias: 1) ovócitos de folículos primordiais: diâmetro de até 20 um; 2) ovócitos de folículos primários: 25 a 35 um; 3) ovócitos de folículos secundários iniciais: 40 a 60 um e 4) ovócitos de folículos secundários finais; 65 a 85 um. Para a obtenção dos ovócitos oriundos de folículos antrais incompetentes e competentes, foram utilizadas as medidas de 100 a 120 um e acima de 128 um respectivamente. O RNA total foi extraído de 4 pools de 25 ovócitos, de cada categoria de folículo, e os transcritos dos genes foram quantificados por qPCR. Os valores de expressão dos genes alvos foram normalizados pela expressão do gene constitutivo CYC A. Os resultados foram analisados através do teste não paramétrico Kruskall Wallis, para comparar os tamanhos de folículos e ovócitos e avaliar o efeito do tamanho do ovócito na quantidade de expressão gênica. O nível de significância considerado foi PO,05) entre os grupos de ovócitos de folículos antrais e pré-antrais, A expressão da 00SP1, SLBP, BMPI5, Hl FOO, DNMT1, DNMT3B e HAT foram menores (PMenosO objetivo do presente estudo foi estudar o perfil da expressão de genes candidatos para a aquisição da competência durante o crescimento ovocitário em bovinos utilizando ovócitos de diferentes tamanhos provenientes de várias categorias de folículos. Os genes candidatos foram selecionados por estarem possivelmente envolvidos com a aquisição da competência (BMP15, 00SP1, HIFOO, H2A, H3A, H4, SLBP, DNMT1, DNMT3B, HAT, HDAC e SUV39Hl). Para determinar o tamanho dos ovócitos a serem utilizados, foi realizado um pré- experimento, em que os folículos pré-antrais foram classificados morfologicamente, agrupados em diferentes categorias em primordial, primário, secundário inicial e secundário final. Após a classificação, os ovócitos de cada folículo foram individualmente isolados e medidos. Folículos pré-antrais e antrais foram isolados de ovários
de vacas Nelore (Bos taurus indicusy, por dissociação mecânica utilizando o Tissue Chopper. Para o isolamento dos ovócitos, os folículos foram expostos à colagenase tipo 11 (0,5 mg/ml) e então submetidos a sucessivas pipetagens. Os ovócitos foram medidos através do programa Motic images Plus 2.0 e classificados de acordo com seu diâmetro nas seguintes categorias: 1) ovócitos de folículos primordiais: diâmetro de até 20 um; 2) ovócitos de folículos primários: 25 a 35 um; 3) ovócitos de folículos secundários iniciais: 40 a 60 um e 4) ovócitos de folículos secundários finais; 65 a 85 um. Para a obtenção dos ovócitos oriundos de folículos antr... Mostrar Tudo |
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Palavras-Chave: |
Expressão gênica; Folículos; Ovócitos; Pré-antrais. |
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Categoria do assunto: |
-- |
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Marc: |
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520 $aO objetivo do presente estudo foi estudar o perfil da expressão de genes candidatos para a aquisição da competência durante o crescimento ovocitário em bovinos utilizando ovócitos de diferentes tamanhos provenientes de várias categorias de folículos. Os genes candidatos foram selecionados por estarem possivelmente envolvidos com a aquisição da competência (BMP15, 00SP1, HIFOO, H2A, H3A, H4, SLBP, DNMT1, DNMT3B, HAT, HDAC e SUV39Hl). Para determinar o tamanho dos ovócitos a serem utilizados, foi realizado um pré- experimento, em que os folículos pré-antrais foram classificados morfologicamente, agrupados em diferentes categorias em primordial, primário, secundário inicial e secundário final. Após a classificação, os ovócitos de cada folículo foram individualmente isolados e medidos. Folículos pré-antrais e antrais foram isolados de ovários de vacas Nelore (Bos taurus indicusy, por dissociação mecânica utilizando o Tissue Chopper. Para o isolamento dos ovócitos, os folículos foram expostos à colagenase tipo 11 (0,5 mg/ml) e então submetidos a sucessivas pipetagens. Os ovócitos foram medidos através do programa Motic images Plus 2.0 e classificados de acordo com seu diâmetro nas seguintes categorias: 1) ovócitos de folículos primordiais: diâmetro de até 20 um; 2) ovócitos de folículos primários: 25 a 35 um; 3) ovócitos de folículos secundários iniciais: 40 a 60 um e 4) ovócitos de folículos secundários finais; 65 a 85 um. Para a obtenção dos ovócitos oriundos de folículos antrais incompetentes e competentes, foram utilizadas as medidas de 100 a 120 um e acima de 128 um respectivamente. O RNA total foi extraído de 4 pools de 25 ovócitos, de cada categoria de folículo, e os transcritos dos genes foram quantificados por qPCR. Os valores de expressão dos genes alvos foram normalizados pela expressão do gene constitutivo CYC A. Os resultados foram analisados através do teste não paramétrico Kruskall Wallis, para comparar os tamanhos de folículos e ovócitos e avaliar o efeito do tamanho do ovócito na quantidade de expressão gênica. O nível de significância considerado foi P<O,05. Os resultados mostraram que os transcritos da H2A, H3, H4 e SUV39Hl não diferiram (P>O,05) entre os grupos de ovócitos de folículos antrais e pré-antrais, A expressão da 00SP1, SLBP, BMPI5, Hl FOO, DNMT1, DNMT3B e HAT foram menores (P<O,05) em ovócitos pré-antrais quando comparados com os de folículos antrais. A H3A foi o único gene em que foi detectado a expressão de RNAm em ovócito de folículo primordial. De todos os genes estudados, apenas a HDAC apresentou diferença significativa entre ovócitos de folículos antrais competentes e incompetentes. Os resultados sugerem que o acúmulo dos estoques dos genes analisados ocorre antes do estágio final da folículogênese e provavelmente não são marcadores para a competência. A HDAC foi o único gene que pode estar relacionado à competência do ovócito, pois mostrou uma diminuição (P<O,05) no nível de transcrito nos grupos de ovócitos competentes quando comparados com o grupo de antrais iniciais (1 a 3mm).
653 $aExpressão gênica
653 $aFolículos
653 $aOvócitos
653 $aPré-antrais
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Registro original: |
Embrapa Cerrados (CPAC) |
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| Registros recuperados : 4 | |
| 1. |  | NEPOMUCENO, A. L.; STEWART, J. M.; OOSTERHUIS, D.; TURLEY, R.; NEUMAIER, N.; FARIAS, J. R. B. Isolation of a cotton NADP(H) oxidase homologue induced by drought stress. Pesquisa Agropecuaria Brasileira, Brasilia, v.35, n.7, p.1407-1416, jul. 2000.| Biblioteca(s): Embrapa Soja; Embrapa Unidades Centrais. |
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| 2. | | NEPOMUCENO, A. L.; OOSTERHUIS, D.; STEWART, J. M.; TURLEY, R.; NEUMAIER, N.; FARIAS, J. R. B. Expression of heat shock protein and trehalose-6-phosphate synthase homologues induced during water deficit in cotton. Brazilian Journal of Plant Physiology, Londrina, v. 14, n. 1, p.11-20, 2002.| Biblioteca(s): Embrapa Soja. |
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| Registros recuperados : 4 | |
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