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Biblioteca(s): 	Embrapa Pecuária Sudeste.	
Data corrente: 	28/03/2011	
Data da última atualização: 	12/08/2019	
Autoria: 	SARAIVA, N. Z.	
Título: 	Citoplastos receptores produzidos por diferentes técnicas de enucleação na transferência nuclear em bovinos.	
Ano de publicação: 	2010	
Fonte/Imprenta: 	Tese (Doutoradao em Zootecnia) - Faculdade de Ciências Agrárias e Veterinárias, Universidade Estadual Paulista, Jaboticabal.	
Páginas: 	p. 133	
Idioma: 	Português	
Notas: 	Sob co-orientação  Dra. Simone Cristina Méo Niciura.	
Conteúdo: 	Uma das etapas mais críticas do procedimento de transferência nuclear (TN) é a remoção da cromatina do oócito para a produção de citoplastos. O objetivo deste trabalho foi estudar o efeito de diferentes ambientes citoplasmáticos obtidos a partir de três técnicas de enucleação (convencional, assistida quimicamente e induzida quimicamente) sobre o remodelamento nuclear e desenvolvimento embrionário, avaliando-se o perfil de expressão dos genes XIST, G6PD e HSPA1A em embriões bovinos. Para isso, quatro experimentos foram delineados. No primeiro experimento, verificou-se que o processo de enucleação pode ser iniciado a partir de 1,0 h de tratamento com demecolcina nas duas técnicas de enucleação química. A dinâmica nuclear e de microtúbulos de oócitos ativados tratados com demecolcina foi avaliada em um segundo experimento, e oócitos tratados apresentaram redução da densidade dos microtúbulos, porém, essas estruturas não desapareceram completamente na maioria dos oócitos. No experimento III, a demecolcina não apresentou efeitos significativos na atividade do fator promotor de maturação (MPF) e da proteína cinase ativada por mitógeno (MAPK) quando utilizada na concentração 0,05&#956;g/mL. No último experimento, a demecolcina não prejudicou o desenvolvimento embrionário e também não alterou o perfil de expressão dos genes XIST, G6PD e HSPA1A em embriões reconstituídos com células embrionárias; porém, quando foram avaliados os níveis de transcritos desses genes em embriões reconstituídos com células somáticas, observou-se maior expressão relativa do XIST e do G6PD em embriões oriundos da técnica de enucleação assistida quimicamente em comparação aos embriões produzidos pela técnica convencional. Portanto, conclui-se que a enucleação química não altera a reprogramação nuclear nem o desenvolvimento embrionário quando são utilizadas células doadoras embrionárias no procedimento de TN. Ainda, a técnica de enucleação assistida quimicamente promove incrementos na expressão dos genes XIST e G6PD quando são utilizadas células somáticas, mostrando que o uso da demecolcina é uma importante ferramenta no procedimento de transferência nuclear.	
Palavras-Chave: 	Democolcina; Enucleação química.	
Thesagro: 	Bovino; Clonagem.	
Categoria do assunto: 	--	
URL: 	http://ainfo.cnptia.embrapa.br/digital/bitstream/item/31227/1/2445.pdf	
Registro original: 	Embrapa Pecuária Sudeste (CPPSE)	
Exemplares: 	CPPSE - (20171-1) - UPA - TS - DD - TS-2011.00739 - ZOC - 2011.00739 - DIS