Data/hora: 21/06/2024 19:40:44

Biblioteca(s): | Embrapa Milho e Sorgo.
Data corrente: | 22/06/2009
Data da última atualização: | 17/10/2023
Autoria: | SILVA, R. B. da.
Afiliação: | Rosane Bezerra da Silva.
Título: | Caracterização molecular de Bacillus thuringiensis utilizando REP-PCR e perfil plasmídial.
Ano de publicação: | 2009
Fonte/Imprenta: | 2009.
Páginas: | 83 f.
Idioma: | Português

Notas:

Dissertação (Mestrado) - Universidade Federal de Lavras, Lavras. 
Orientador: Fernando Hercos Valicente.

Conteúdo: | Os insetos constituem uma das principais causas de danos à produção agrícola no mundo. O controle de insetos tem sido realizado essencialmente por meio de agroquímicos. A bactéria entomopatogênica Bacillus thuringiensis tem sido utilizada como alternativa de controle. É uma bactéria Gram-positiva que ocorre naturalmente no solo e produz proteínas na forma de cristais que são tóxicas a uma variedade de insetos entre as ordens Lepidoptera, Diptera, e Coleóptera. Apresenta alta variabilidade genética e está amplamente distribuída na natureza. O presente trabalho objetivou a caracterização de cepas pertencentes ao banco de B. thuringiensis da EMBRAPA-CNPMS, quanto ao perfil plasmídial e avaliar a diversidade genética com base nas sequências repetitivas ERIC e REP. O perfil plasmidial foi avaliado pela migração das bandas em gel de agora se sendo possível visualizar o perfil de 49 das 60 cepas utilizadas. Cepas pertencentes a uma mesma subespécie apresentaram diferentes migrações de plasmídeos, com exceção das cepas 348L e 462A pertencentes à subespécie galleriare. A cepa T09 Bt tolworthi apresentou migração plasmidial idêntica as duas cepas galleriare citadas à cima. Assim obtivemos 46 cepas com perfil plasmidiais distintos, fazendo desta técnica uma ferramenta útil para discriminar cepas específicas, tomando-se valiosa em termos de propriedade intelectual e reivindicações. A divergência genética entre 56 cepas foi estimada utilizando ferramenta com base em PCR com primers específicos para as seqüências ERIC e REP. Sendo os fragmentos gerados analisados por eletroforese em géis de agarose ou poliacrilamida. As distâncias genéticas foram obtidas pelo complemento do coeficiente de Jaccard e os agrupamentos foram realizados pelo método UPGMA com aplicação de bootstrap para verificar a consistências dos agrupamentos. Uma segunda análise de grupos foi realizada pelo método de Tocher. Os primers ERIC e Bc-REP detectaram grande divergência genética entre as 56 cepas de B. thuringiensis com formação de 21 grupos quando considerado um ponto de corte de 60%. Entre estes houve valores de bootstrap acima de 50% e grupos com valores de bootstrap abaixo de 50%, parece estarem relacionados com número de bandas, que foram menores nestes casos. Alguns grupos formados com o método Tocher estavam de acordo com os grupos obtidos com o agrupamento UPGMA. Aparentemente, alguns dos grupos formados parecem estar relacionados com mortalidade e procedência, necessitando mais estudos para confirmação.
Palavras-Chave: | Caracterização molecular; Perfil plasmidial; REP-PCR.
Thesagro: | Bacillus Thuringiensis.
Categoria do assunto: | --
Registro original: | Embrapa Milho e Sorgo (CNPMS)
Exemplares: | CNPMS - (21652-1) - UPA - TS - DD -  -  -  - DIS