Data/hora: 25/06/2024 11:49:25

Biblioteca(s): | Embrapa Gado de Corte.
Tipo da produção científica: | Artigo em Periódico Indexado
Circulação/Nível: | B - 5
Data corrente: | 13/12/2017
Data da última atualização: | 13/12/2017
Autoria: | SANTOS JUNIOR, A. G. dos; PIRAINE, R. E. A.; CUNHA, R. C.; NIZOLI, L. Q.; ANDREOTTI, R.; LEITE, F. P. L.
Afiliação: | Alceu Gonçalves dos Santos Junior, Doutorando/Programa de Pós-Graduação em Veterinária/UFPEL; Renan Eugênio Araújo Piraine, Doutorando/Programa de Pós-Graduação em Biotecnologia/UFPEL; Rodrigo Casquero Cunha, Pós-Doc/Programa de Pós-Graduação em Biotecnologia/UFPEL; Leandro Quintana Nizoli, Professor/Doutor/Faculdade de Veterinária/UFPEL; RENATO ANDREOTTI E SILVA, CNPGC; Fábio Pereira Leivas Leite, Professor/Doutor/Curso de Biotecnologia/UFPEL.
Título: | Avaliação de métodos para obtenção de proteínas recombinantes.
Ano de publicação: | 2017
Fonte/Imprenta: | Science and Animal Health, v.5, n.2, p. 166-177, maio/ago. 2017.
Idioma: | Português
Conteúdo: | A utilização de Pichia pastoris para a produção de proteínas recombinantes apresenta inúmeras vantagens que esse sistema agrega, destacando-se a exportação das moléculas para o meio extracelular. Isto permite que a obtenção das proteínas possa ser realizada por métodos de precipitação, com uso de sais neutros ou solventes orgânicos, sem trazer prejuízos. O objetivo deste trabalho foi avaliar a utilização de sulfato de amônio, acetona e metanol para obtenção da proteína recombinante Bm86 do carrapato Rhipicephalus microplus expressa por P. pastoris. A ação provocada pelos solventes orgânicos ocasionou uma solubilidade parcial das proteínas. Na quantificação por densitometria da proteína rBm86-CG, verificou-se que utilizando acetona (1:2) foi obtido 30,3 mg/L, metanol (1:2) 60,5 mg/L e com sulfato de amônio a 70% (83,5 mg/L). A manutenção das características antigênicas após a precipitação foi verificada pela técnica de Western Blot, sendo que a proteína rBm86-CG obtida pelos três métodos foi reconhecida por anticorpos específicos. Os resultados sugerem que a precipitação com sais neutros e solventes orgânicos pode ser utilizada para obtenção de proteínas recombinantes como a rBm86-CG, sem trazer prejuízos a sua antigenicidade.
Palavras-Chave: | Antigenicidade; Sais neutros.
Thesagro: | Solvente orgânico.
Thesaurus Nal: | Pichia pastoris; Rhipicephalus microplus.
Categoria do assunto: | --
URL: | http://ainfo.cnptia.embrapa.br/digital/bitstream/item/168971/1/Avaliacao-de-metodos-para-obtencao-de-proteinas.pdf
Registro original: | Embrapa Gado de Corte (CNPGC)
Exemplares: | CNPGC - (17003-1) - UPC - AP - DD -  -  -  - DIS