Data/hora: 01/06/2024 09:39:47

Biblioteca(s): | Embrapa Gado de Corte.
Data corrente: | 30/04/2009
Data da última atualização: | 30/04/2009
Autoria: | ARAÚJO, F. R. de; MELO, E. S. de P.; RAMOS, C. A. do N.; SOARES, C. O.; ROSINHA, G. M. S.; ELISEI, C.
Afiliação: | Flábio Ribeiro de Araújo, CNPGC; Elaine Silva de Pádua Melo, Bolsista de Mestrado da Fundect-CNPq; Carlos Alberto do Nascimento Ramos, bolsista de Mestrado Fundect-CNPq; Cleber Oliveira Soares, CNPGC; Gracia Maria Soares Rosinha, CNPGC; Carina Elisei, B.
Título: | ELISA com MSP5 recombinante truncada para detecção de anticorpos contra Anaplasma marginale em bovinos.
Ano de publicação: | 2006
Fonte/Imprenta: | In: SÉRIES Embrapa: [coletânea de publicações seriadas da Embrapa Gado de Corte - 2006 - 2007 -2008]. Campo Grande, MS: Embrapa Gado de Corte, 2009.
Páginas: | 27 p.
Descrição Física: | 1 CD-ROM.
Série: | (Embrapa Gado de Corte. Documentos, 163).
Idioma: | Português
Conteúdo: | Os objetivos buscados pelos autores neste estudo foram produzir e solubilizar a proteína MSP5 recombinante truncada de Anaplasma marginale e avaliar seu desempenho em um ensaio de imunoadsorção enzimática indireto para detecção de anticorpos contra a riquétsia. O gene msp5, exceto a região N-terminal hidrofóbica, foi amplificado por reação em cadeia da polimerase, clonado em plasmídeo pTrcHis-TOPO e expresso em Escherichia coli. A solubilização da proteína recombinante foi avaliada em diferentes pHs e concentrações de uréia. A sensibilidade e a especificidade do ensaio foram avaliados testando-se 66 soros de animais infectados experimentalmente com A. marginale e 96 soros negativos, com o estado de infecção desses animais confirmado por reação em cadeia da polimerase. Um total de 1.666 amostras de soros bovinos, provenientes do Brasil - Rio Grande do Sul (73), Mato Grosso do Sul (91), Pernambuco (86), Bahia (314) e Minas Gerais (267), assim como do Uruguai (32) e Costa Rica (803) foram testadas nos ELISAs com MSP5 truncada e com MSP1a recombinantes, e a concordância entre os dois testes foi avaliada. O ELISA indireto com MSP5 truncada foi capaz de detectar animais infectados com 96,97% de sensibilidade e 100% de especificidade. Nos animais infectados experimentalmente, o ELISA detectou anticorpos do 12o dia após a inoculação (DPI) até o último dia de observação (37o DPI). Os ELISAs para MSP5 e MSP1a apresentaram concordância de 95,67%, com índice kappa de 0,81. Os resultados discordantes apresentaram uma diferença significativa (P < 0,001). Anticorpos contra A. marginale foram detectados em animais de todas asregiões estudadas. O ELISA com MSP5 recombinante truncada apresentou bom desempenho na detecção de anticorpos contra A. marginale, com alta sensibilidade e especificidade, representando uma importante ferramenta para o diagnóstico da anaplasmose bovina em estudos epidemiológicos.
Palavras-Chave: | MSP5; Proteína recombinante.
Thesagro: | Anaplasma Marginale; Anaplasmose; Bovino; Elisa; Imunologia; Técnica Imunoenzimática.
Categoria do assunto: | --
URL: | http://ainfo.cnptia.embrapa.br/digital/bitstream/CNPGC-2009-09/12411/1/DOC163.pdf
Registro original: | Embrapa Gado de Corte (CNPGC)
Exemplares: | CNPGC - (12411-1) - UMT - PL - -- - CD-91 - SER -  - DIS