Data/hora: 23/06/2024 06:53:58

Biblioteca(s): 	Embrapa Gado de Corte.	
Data corrente: 	15/03/2010	
Data da última atualização: 	15/03/2010	
Autoria: 	BASTOS, R.; ROSINHA, G. M. S.; FORNER, O.; SOARES, C. O.; ARAUJO, F. R.; ELISEI, C.; FUNES-HUACCA, M.; SHIMADA, M. K.; FRAGOSO, S. P.	
Afiliação: 	R. BASTOS, UNIDERP - BOLSISTA PBIC; GRACIA MARIA SOARES ROSINHA, CNPGC; ODINEIA FORNER, UFPR; CLEBER OLIVEIRA SOARES, CNPGC; FLABIO RIBEIRO ARAUJO, CNPGC; CARINA ELISEI, BOLSISTA DCR/CNPq; M. FUNES-HUACCA, BOLSISTA DTI II/CNPq; M. K. SHIMADA, INSTITUTO DE BIOLOGIA MOLECULAR DO PARANÁ; S. P. FRAGOSO, INSTITUTO DE BIOLOGIA MOLECULAR DO PARANÁ.	
Título: 	Screening de uma biblioteca genômica de Corynebacterium pseudotuberculosis na busca de genes candidatos à vacina gênica contra linfadenite caseosa.	
Ano de publicação: 	2008	
Fonte/Imprenta: 	In: JORNADA CIENTÍFICA DA EMBRAPA GADO DE CORTE, 4., 2008, Campo Grande, MS. Anais [da]... Campo Grande, MS: Embrapa Gado de Corte, 2008. 1 CD-ROM. Editores técnicos Valdemir Antônio Laura, Paulo Henrique Nogueira Biscola.	
Páginas: 	2 p.	
Descrição Física: 	1 CD-ROM.	
Idioma: 	Português	
Conteúdo: 	Corynebacterium pseudotuberculosis é o agente etiológico da linfadenite caseosa, doença que acomete, principalmente, ovinos e caprinos, causadora de grandes
problemas na ovinocaprinocultura, como a condenação de peles e carcaças. Objetivou-se neste estudo construir uma biblioteca genômica de C. pseudotuberculosis e identificar, por immunoscreening, antígenos com potencial imunoprotetor para a construção de vacinas gênicas contra linfadenite caseosa. A biblioteca foi construída no vetor bacteriófago ZAP Express. A cepa selvagem de C. pseudotuberculosis, isolada de ovino com forte sintomatologia para linfadenite caseosa, foi utilizada para a extração e digestão parcial do DNA genômico. Seqüências entre 1.000 e 5.000 pares de bases foram cortadas do gel, purificadas com auxílio de kit comercial e os fragmentos obtidos do DNA digerido foram ligados no vetor e, posteriormente, empacotados em fagos. A biblioteca apresentou um título de 7x108 pfu/mL, representando 10 vezes o genoma de C. pseudotuberculosis. Para o screening imunológico utilizou-se um soro de animal positivo e um de negativo para linfadenite caseosa, os quais foram limpos para anticorpos específicos contra Escherichia coli em membranas de nitrocelulose. Após, para finalizar a limpeza, estes soros foram passados em coluna de Sephadex, adsorvida com antígeno de E. coli. Estes, após a limpeza, foram testados por Western blot, em várias diluições, quanto ao reconhecimento inespecífico e específico contra E. coli e C. pseudotuberculosis, respectivamente. A melhor diluição encontrada foi de 1.500, a qual foi utilizada no screening. No primeiro imunoscreening, foram identificados seis clones fortemente acesos, os quais foram confirmados como quatro, após a realização do segundo immunoscreening. Até a obtenção dos clones para a identificação dos antígenos por sequenciamento, mais dois immunoscreenings serão realizados. O uso de immunoscreening em bacteriófago, desde que utilizado em vetor apropriado, apresenta-se como uma técnica sensível e eficiente na identificação de prováveis genes imunodominantes candidatos à vacina contra linfadenite caseosa.	
Thesagro: 	Caprino; Corynebacterium Pseudotuberculosis; Linfadenite Caseosa; Ovino; Sanidade Animal.	
Categoria do assunto: 	H Saúde e Patologia	
Registro original: 	Embrapa Gado de Corte (CNPGC)	
Exemplares: 	CNPGC - (12997-1) - UMT - PL - CD - CD-110 - JOR -  - DIS