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Registro Completo |
Biblioteca(s): |
Embrapa Agroenergia. |
Data corrente: |
20/02/2020 |
Data da última atualização: |
20/04/2020 |
Tipo da produção científica: |
Orientação de Tese de Pós-Graduação |
Autoria: |
SOARES NETO, C. B. |
Afiliação: |
Clemente Batista Soares Neto, UnB. |
Título: |
Degradação de gossipol por macrofungos e análise do secretoma de PANUS LECOMTEI durante crescimento em caroço de algodão. |
Ano de publicação: |
2019 |
Fonte/Imprenta: |
Brasília, DF, 2019. |
Páginas: |
208 p. |
Idioma: |
Português |
Notas: |
Tese apresentada à Universidade de Brasília como requisito para a obtenção do título de Doutor em Biologia Molecular pelo Programa de Pós-Graduação em Biologia Molecular. Orientador: Prof. Dr. Robert Neil Gerard Miller
Coorientador: Félix Gonçalves de Siqueira, pesquisador da Embrapa Agroenergia. |
Conteúdo: |
A torta de caroço de algodão (TCA) é um abundante subproduto obtido de agroindústrias, rico em proteínas. Entretanto, sua aplicação na nutrição de animais monogástricos é limitada pela presença de gossipol livre (GL), uma substância tóxica. Alguns fungos basidiomicetos são capazes de degradar TCA quando cultivados em fermentação em estado sólido (FES), secretando enzimas hidrolíticas e lignolíticas. Neste estudo, o potencial de macrofungos na degradação de GL foi avaliado e proteínas potencialmente envolvidas na biodestoxificação desse fator antinutricional foram identificadas. Para detectar de forma precisa o GL em níveis de traços, foi desenvolvido um método em cromatografia líquida de ultra eficiência (UHPLC) para quantificar GL em diferentes amostras. Os limites de detecção e quantificação foram observados em 0,2 e 0,5 μg/mL, respectivamente, com boa reprodutibilidade, precisão (RSDRelative Standard Deviation) <10% e recuperação superior a 94%. Empregando-se esse método foi possível selecionar diferentes macrofungos capazes de degradar GL quando cultivados em FES. Os macrofungos promissores foram Pleurotus ostreatus (CC389), Pleurotus sapidus (CC28), Panus lecomtei (CC40), Ganoderma lucidum (CC351) e Pycnoporus sanguineus (CC400). Em outro momento, foram comparados diferentes métodos de pré-tratamento para redução de GL em caroço de algodão. Um tratamento químico com Ca(OH)2 eliminou 99,9% do GL; a pré-compostagem biológica reduziu o GL em 99% após seis dias, e um método físico (autoclavagem) em 96,3% após exposição de 60 minutos. Um pré-tratamento utilizando um método combinado de autoclavagem seguida de FES por macrofungos, forneceu maiores níveis de reduções do que os mencionados acima, como também ofereceram melhorias nutricionais nas características do substrato final obtido, elevando os teores de proteína total e reduzindo lipídios totais. O substrato colonizado com os macrofungos P. ostreatus e P. lecomtei foi analisado quanto à presença de enzimas lacases e manganês peroxidase secretadas por fungos em um período de incubação de 15 dias. Na segunda etapa, P. lecomtei foi selecionado e novamente inoculado nas biomassas: caroço de algodão (CAT) tratado por autoclavagem e caroço de algodão tratado com Ca(OH)2 (CAT-TR). Extratos brutos (EBs) foram obtidos a partir de cada cultivo e foram testados quanto à capacidade em degradar gossipol sintético (gossipol acetato) e inibidores derivados da lignina. Foi observada degradação total do gossipol sintético em apenas 60 minutos de incubação com degradação de inibidores enzimáticos, com destaque para o EB derivado de CAT-TR, com degradação de até 95% de ácido sinápico ao final de 240 minutos de incubação. Foram utilizadas abordagens proteômicas com o intuito de caracterizar o perfil do secretoma desses EBs (obtidos após seis e 12 dias de cultivo), por LC-MS/MS. Diferentes perfis proteicos foram identificados de acordo com o tipo de pré-tratamento empregado na biomassa bem como em função dos tempos de cultivo. Sendo assim, é provável que diferentes proteínas estejam envolvidas na sobrevivência do fungo e também na degradação de compostos tóxicos como o gossipol. As proteínas/enzimas com potencial biotecnológico obtidas dos EBs incluíram as lacases, peroxidases, oxidoredutases, heat shock proteins, metaloproteases, glucanases e citocromo b5, que atuam em vias envolvidas na oxidação de substratos, destoxificação de fatores tóxicos, estresse oxidativo, na quelação de metais, degradação de lignina e respiração celular. A produção dessas enzimas pode ocorrer devido à presença do gossipol, com participação destas na biodestoxificação de GL, potencializando o uso de CAT na nutrição de animiais monogástricos. Em resumo, os resultados deste estudo demonstraram eficiente degradação de GL por ação de diferentes abordagens econômicas e não poluentes. Os mecanismos enzimáticos envolvidos na degradação de GL foram investigados, com P. lecomtei apresentando considerável capacidade de produzir enzimas para a degradação GL, assim como da parede celular vegetal, com significativo potencial biotecnológico. MenosA torta de caroço de algodão (TCA) é um abundante subproduto obtido de agroindústrias, rico em proteínas. Entretanto, sua aplicação na nutrição de animais monogástricos é limitada pela presença de gossipol livre (GL), uma substância tóxica. Alguns fungos basidiomicetos são capazes de degradar TCA quando cultivados em fermentação em estado sólido (FES), secretando enzimas hidrolíticas e lignolíticas. Neste estudo, o potencial de macrofungos na degradação de GL foi avaliado e proteínas potencialmente envolvidas na biodestoxificação desse fator antinutricional foram identificadas. Para detectar de forma precisa o GL em níveis de traços, foi desenvolvido um método em cromatografia líquida de ultra eficiência (UHPLC) para quantificar GL em diferentes amostras. Os limites de detecção e quantificação foram observados em 0,2 e 0,5 μg/mL, respectivamente, com boa reprodutibilidade, precisão (RSDRelative Standard Deviation) <10% e recuperação superior a 94%. Empregando-se esse método foi possível selecionar diferentes macrofungos capazes de degradar GL quando cultivados em FES. Os macrofungos promissores foram Pleurotus ostreatus (CC389), Pleurotus sapidus (CC28), Panus lecomtei (CC40), Ganoderma lucidum (CC351) e Pycnoporus sanguineus (CC400). Em outro momento, foram comparados diferentes métodos de pré-tratamento para redução de GL em caroço de algodão. Um tratamento químico com Ca(OH)2 eliminou 99,9% do GL; a pré-compostagem biológica reduziu o GL em 99% após seis dias, e um m... Mostrar Tudo |
Palavras-Chave: |
Caroço de algodão; Gossipol livre; Macrofungos; Secretoma. |
Categoria do assunto: |
-- |
URL: |
https://ainfo.cnptia.embrapa.br/digital/bitstream/item/211021/1/CLEMENTE-SOARES-NETO-FINAL-DR-BIOLOGIA-MOLECULAR-enviado.pdf
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Marc: |
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Embrapa Agroenergia (CNPAE) |
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3. | | SOARES, A. C.; SOARES, J. C.; RODRIGUES, V. C.; OLIVEIRA JUNIOR, O. N.; MATTOSO, L. H. C. Técnicas de visualização de informações aplicadas em dados de biossensoriamento para detecção de Staphylococcus aureus. In: JORNADA CIENTÍFICA - EMBRAPA SÃO CARLOS, 12., 2020, São Carlos, SP. Anais... São Carlos: Embrapa Instrumentação: Embrapa Pecuária Sudeste, 2020. Editores técnicos: Cristiane Sanchez Farinas, Daniel Souza Corrêa, José Manoel Marconcini, Maria Fernanda Berlingieri Durigan, Paulo Sérgio de Paula Herrmann Junior. 40 Embrapa Instrumentação. Documentos, 71.Tipo: Resumo em Anais de Congresso |
Biblioteca(s): Embrapa Instrumentação. |
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4. | | SOARES, A. C.; SOARES, J. C.; RODRIGUES, V. C.; BRANDAO, H. de M.; OLIVEIRA JR, O. N.; MATTOSO, L. H. C. Biossensores microfluidicos aplicados na detecção de mastite em gados leiteiros. In: SIMPÓSIO NACIONAL DE INSTRUMENTAÇÃO AGROPECUÁRIA, 4., 2019, São Carlos, SP. Ciência, inovação e mercado: anais. São Carlos, SP: Embrapa Instrumentação, 2019. Editores: Paulino Ribeiro Villas-Boas, Maria Alice Martins, Débora Marcondes Bastos Pereira Milori, Ladislau Martin Neto. SIAGRO 2019. 651-653Tipo: Artigo de Divulgação na Mídia |
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5. | | SOARES, J. C.; SOARES, A. C.; RODRIGUES, V. C.; BRANDAO, H. de M.; OLIVEIRA JR, O. N.; MATTOSO, L. H. C. Biossensores poliméricos nanoestruturados aplicados para diagnóstico de mastite. In: SIMPÓSIO NACIONAL DE INSTRUMENTAÇÃO AGROPECUÁRIA, 4., 2019, São Carlos, SP. Ciência, inovação e mercado: anais. São Carlos, SP: Embrapa Instrumentação, 2019. Editores: Paulino Ribeiro Villas-Boas, Maria Alice Martins, Débora Marcondes Bastos Pereira Milori, Ladislau Martin Neto. SIAGRO 2019. 654-657Tipo: Artigo em Anais de Congresso |
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6. | | PITOMBO, R. S.; SOUZA, D. D. N.; RAMALHO, R. O. S.; FIGUEIREDO, A. B. A.; RODRIGUES, V. C.; FREITAS, D. de G. C.; FERREIRA, J. C. S. Qualidade da carne de bovinos superprecoces terminados em confinamento. Arquivo Brasileiro de Medicina Veterinária e Zootecnia, Belo Horizonte, v. 65, n. 4, p. 1203-1207, 2013.Tipo: Artigo em Periódico Indexado | Circulação/Nível: A - 2 |
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7. | | SOARES, A. C.; SOARES, J. C.; PASCHOALIN, R. T.; RODRIGUES, V. C.; MELENDEZ, M. E.; REIS, R. M.; CARVALHO, A. L.; MATTOSO, L. H. C.; OLIVEIRA, O. N. Immunosensors containing solution blow spun fibers of poly(lactic acid) to detect p53 biomarker. Materials Science & Engineering C, v. 115, 2020. 1-10Tipo: Artigo em Periódico Indexado | Circulação/Nível: A - 1 |
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8. | | SOARES, J. C.; MELENDEZ, M. E.; SOARES, A. C.; ARANTES, L. M. R. B.; RODRIGUES, V. C.; CARVALHO, A. L.; REIS, R. M.; MATTOSO, L. H. C.; OLIVEIRA JUNIOR, O. N. Detection of HPV16 in cell lines deriving from cervical and head and neck cancer using a genosensor made with a DNA probe on a layer-by-layer matrix. Materials Chemistry Frontiers, v. 4, n. 11, 2020. 3258-3266Tipo: Artigo em Periódico Indexado |
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9. | | SOARES, J. C.; IWAKI, L. E. O.; SOARES, A. C.; RODRIGUES, V. C.; MELENDEZ, M. E.; FREGNANI, J. H. T. G.; REIS, M. R.; CARVALHO, A. L.; CORREA, D. S.; OLIVEIRA JUNIOR, O. N. Immunosensor for pancreatic cancer based on electrospun nanofibers coated with carbon nanotubes or gold nanoparticles. ACS Omega, v. 2, p. 6975-6983, 2017.Tipo: Artigo em Periódico Indexado | Circulação/Nível: A - 1 |
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10. | | SOARES, J. C.; SOARES, A. C.; RODRIGUES, V. C.; OITICICA, P. R. A.; RAYMUNDO-PEREIRA, P. A.; BOTT-NETO, J. L.; BUSCAGLIA, L. A.; CASTRO, L. D. C. de; RIBAS, L. C.; SCABINI, L.; BRAZACA, L. C.; CORREA, D. S.; MATTOSO, L. H. C.; OLIVEIRA, M. C. F. de; CARVALHO, A. C. P. L. de; CARRILHO, E.; BRUNO, O. M.; MELENDEZ, M. E.; OLIVEIRA JR, O. N. Detection of a SARS-CoV-2 sequence with genosensors using data analysis based on information visualization and machine learning techniques. Materials Chemistry Frontiers, v. 5, 2021. 5658-5670Tipo: Artigo em Periódico Indexado | Circulação/Nível: A - 1 |
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