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Biblioteca(s): | Embrapa Meio Ambiente.
Data corrente: | 26/04/2004
Data da última atualização: | 16/10/2017
Autoria: | JESUS, K. R. E. de.
Afiliação: | Embrapa Meio Ambiente.
Título: | Estudo da alteração da expressão gênica em linhagens de Aspergillus nidulans submetidas ao tratamento com RNA heterólogo.
Ano de publicação: | 2003
Fonte/Imprenta: | 2003.
Páginas: | 143f.
Idioma: | Português
Notas: | Tese (Doutorado) - Programa de Pós-Graduação Interunidades em Biotecnologia USP/Instituto Butantan/IPT, São Paulo.
Conteúdo: | Fungos filamentosos, em particular Aspergillus, têm sido explorados pela sua habilidade em produzir altos níveis de proteínas extra-celulares de maneira econômica. Desde que muitas proteínas humanas com potencial terapêutico são secretadas e requerem modificação pós-tradução para apresentarem atividade biológica, sistemas de expressão-secreção, têm sido alvo de pesquisas. Desenvolvimentos recentes em sistemas de transformação mediada por DNA têm permitido a utilização de Aspergillus como hospedeiro para produção de proteínas de interesse biotecnológico, uma vez que esse fungo apresenta características interessantes, tais como genética bem caracterizada e a disponibilidade de muitos mutantes. Em trabalhos anteriores, realizados pelo nosso grupo, protoplastos de Aspergillus nidulans foram tratados com RNA de uma linhagem de Saccharomyces cerevisiae altamente produtora de insulina. Através desta metodologia, foram obtidas linhagens instáveis que apresentavam rápido consumo de glicose do meio de cultura. A análise da instabilidade mitótica das linhagens tratadas foi realizada através da observação da alteração do comportamento dos seus marcadores genéticos e dos seus setores. O tratamento com RNA foi o responsável tanto pela instabilidade, como por promover ativação/inativação gênica, mitótica e meiótica evidenciada através da análise das variações das frequências de recombinações nos cruzamentos das linhagens tratadas, com linhagens Master de Aspergillus nidulans. A alteração do perfil protéico e micotoxigênico das linagens tratadas em relação à linhagem controle UT448, nos permitiu comprovar o efeito estressante do tratamento com RNA no genoma das linhagens. As linhagens tratadas não apresentaram o gene da insulina inserido nos seus genomas. O elevado consumo de glicose nestas linhagens foi decorrente de um aumento na produção da enzima glicose oxidase, evidenciado nos sobrenadantes das culturas.
Thesagro: | Aspergillus Nidulans; Biotecnologia; Micotoxina.
Categoria do assunto: | --
Registro original: | Embrapa Meio Ambiente (CNPMA)
Exemplares: | CNPMA - (5049-1) - UPC - TS - PP - 0494 -  - 2004.00494 - DIS