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Registro Completo |
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Biblioteca(s): |
Embrapa Uva e Vinho. |
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Data corrente: |
11/04/2008 |
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Data da última atualização: |
08/08/2019 |
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Tipo da produção científica: |
Artigo em Periódico Indexado |
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Autoria: |
FAJARDO, T. V. M.; BARROS, D. R.; NICKEL, O.; KUHN, G.; ZERBINI, M. |
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Afiliação: |
THOR VINICIUS MARTINS FAJARDO, CNPUV; Danielle R. Barros, UFV; OSMAR NICKEL, CNPUV; GILBERTO KUHN, CPACT; Murilo Zerbini, UFV. |
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Título: |
Expression of grapevine leafroll-associated virus 3 coat protein gene in Escherichia coli and production of polyclonal antibodies. |
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Ano de publicação: |
2007 |
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Fonte/Imprenta: |
Fitopatologia Brasileira, Brasília, v. 32, n. 6, p. 496-500, 2007. |
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Idioma: |
Inglês |
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Conteúdo: |
Grapevine leafroll-associated virus 3 (GLRaV-3), the main viral species ofthe grapevine leafroll complex, causes yield and quality reduction in grapes (Vitis spp.). The coat protein gene was RT-PCR-amplified from total RNA extracted from infected grapevine leaves and the amplified fragment was cloned and completely sequenced. The fragment was subsequently subcloned into the pRSET-C expression vector. The recombinant plasmid was used to transform Escherichia coli BL21 :DE3 and express the capsid protein. The coat protein, fused to a 6 His-tag, was purified by affinity chromatography using an Ni-NTA resin. The identity ofthe purified protein was confirmed by SDS-PAGE and Westem blot. The in vitro-expressed protein was quantified and used for rabbit immunizations. The antiserum was shown to be sensitive and specific for the detection ofGLRaV-3 in grapevine extracts in Westem blot and DAS-ELISA assays, with no unspecific or heterologous reactions against other non-serologically related viruses being observed. Additional keywords: grapevine, GLRaV-3, recombinant protein, serology, antibodies. Expressão da proteína capsidial do Grapevine leafroll-associated virus 3 em Escherichia coli e produção de anticorpos policlonais Grapevine leafroll-associated virus 3 (GLRaV-3), a principal espécie viral do complexo do enrolamento da folha da videira tViüs spp.), causa reduções no rendimento e na qualidade da uva. O gene da proteína capsidial foi amplificado via RTPCR a partir de RNA total, extraído de folhas de videira infectadas. O fragmento amplificado foi clonado e completamente seqüenciado. Em seguida, o fragmento foi subclonado no vetor de expressão pRSET-C. O plasmídeo recombinante foi utilizado para a expressão da proteina capsidial em Escherichia co/i BL21:DE3. A proteína capsidial, ligada a uma cauda de 6-His, foi purificada por cromatografia de afinidade em coluna de Ni-NTA. A identidade da proteína purificada foi confirmada em SDSPAGE e Wesfern blot e, após quantificação, foi utilizada para imunizar coelhos. O anti-soro mostrou-se sensível e específico para a detecção do GLRaV-3 em extratos de videira por Wesfern blot e DAS-ELISA, não tendo sido observadas reações inespecíficas ou heterólogas contra outros vírus sorologicamente não relacionados. Palavras-chave adicionais: videira, GLRaV-3, proteína recombinante, sorologia, anticorpos. MenosGrapevine leafroll-associated virus 3 (GLRaV-3), the main viral species ofthe grapevine leafroll complex, causes yield and quality reduction in grapes (Vitis spp.). The coat protein gene was RT-PCR-amplified from total RNA extracted from infected grapevine leaves and the amplified fragment was cloned and completely sequenced. The fragment was subsequently subcloned into the pRSET-C expression vector. The recombinant plasmid was used to transform Escherichia coli BL21 :DE3 and express the capsid protein. The coat protein, fused to a 6 His-tag, was purified by affinity chromatography using an Ni-NTA resin. The identity ofthe purified protein was confirmed by SDS-PAGE and Westem blot. The in vitro-expressed protein was quantified and used for rabbit immunizations. The antiserum was shown to be sensitive and specific for the detection ofGLRaV-3 in grapevine extracts in Westem blot and DAS-ELISA assays, with no unspecific or heterologous reactions against other non-serologically related viruses being observed. Additional keywords: grapevine, GLRaV-3, recombinant protein, serology, antibodies. Expressão da proteína capsidial do Grapevine leafroll-associated virus 3 em Escherichia coli e produção de anticorpos policlonais Grapevine leafroll-associated virus 3 (GLRaV-3), a principal espécie viral do complexo do enrolamento da folha da videira tViüs spp.), causa reduções no rendimento e na qualidade da uva. O gene da proteína capsidial foi amplificado via RTPCR a partir de RNA total,... Mostrar Tudo |
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Palavras-Chave: |
Enrolamento da folha da videira; Proteína recombinante; Sorologia. |
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Thesagro: |
Anticorpo; Doença de Planta; Uva; Vírus; Viticultura. |
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Thesaurus Nal: |
Grapevine leafroll-associated virus 3. |
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Categoria do assunto: |
-- |
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URL: |
https://ainfo.cnptia.embrapa.br/digital/bitstream/item/200453/1/9763-2007-p.496-500.pdf
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Marc: |
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Registro original: |
Embrapa Uva e Vinho (CNPUV) |
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 | Acesso ao texto completo restrito à biblioteca da Embrapa Soja. Para informações adicionais entre em contato com valeria.cardoso@embrapa.br. |
Registro Completo
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Biblioteca(s): |
Embrapa Soja. |
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Data corrente: |
14/06/2002 |
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Data da última atualização: |
05/07/2006 |
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Autoria: |
SILVA, L. O. E.; NUNES JÚNIOR, J.; GUIMARÃES, L. B. S.; MONTEIRO, P. M. F. O.; ASSUNÇÃO, M. S.; GUERZONI, R. A.; SOUZA, P. I. M. |
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Título: |
Produtividade de cultivares de soja do Convênio Goiás avaliadas nas ultimas três safras agrícolas em função da época e da densidade de semeadura. |
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Ano de publicação: |
2002 |
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Fonte/Imprenta: |
In: CONGRESSO BRASILEIRO DE SOJA, 2.; MERCOSOJA 2002, 2002, Foz do Iguaçu. Perspectivas do agronegócio da soja: resumos. Londrina: Embrapa Soja, 2002. |
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Páginas: |
p. 115. |
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Série: |
(Embrapa Soja. Documentos, 181). |
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Idioma: |
Português |
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Notas: |
Organizado por Odilon Ferreira Saraiva, Clara Beatriz Hoffmann-Campo. |
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Thesagro: |
Densidade de Semeadura; Pratica Cultural; Produtividade; Soja. |
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Categoria do assunto: |
-- |
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Registro original: |
Embrapa Soja (CNPSO) |
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