Data/hora: 23/09/2024 19:59:13

Biblioteca(s): 	Embrapa Gado de Corte.	
Data corrente: 	09/02/2011	
Data da última atualização: 	09/02/2011	
Autoria: 	MELO, P. R.; ROSINHA, G. M. S.; FORNER, O.; ELISEI, C.; FRAGOSO, S.; SANTOS, L. R.; ARAUJO, F. R.; SOARES, C. O.	
Afiliação: 	PATRÍCIA RODRIGUES DE MELO, UNIDERP; GRACIA MARIA SOARES ROSINHA, CNPGC; Universidade Federal do Paraná; BOLSISTA CNPGC; Fiocruz-Paraná; BOLSISTA CNPGC; FLABIO RIBEIRO ARAUJO, CNPGC; CLEBER OLIVEIRA SOARES, CNPGC.	
Título: 	Clonagem, purificação e avaliação da proteína PLDr de Corynebacterium pseudotuberculosis como marcador de infecção de ovinos e caprinos.	
Ano de publicação: 	2010	
Fonte/Imprenta: 	In: JORNADA CIENTÍFICA DA EMBRAPA GADO DE CORTE, 6., 2010, Campo Grande, MS. Ética na pesquisa científica: [Anais da ...]. Campo Grande, MS: Embrapa Gado de Corte, 2010. 1 CD-ROM. Coordenadora: Vanessa Felipe de Souza	
Páginas: 	1 p.	
Idioma: 	Português	
Conteúdo: 	A linfadenite caseosa é uma doença infectocontagiosa caracterizada pela formação de abscessos nos linfonodos e nas vísceras, sendo causada pela bactéria Corynebacterium pseudotuberculosis. Esta doença acomete, principalmente, caprinos e ovinos e, a alta virulência da bactéria deve-se principalmente à ação da exotoxina fosfolipase D (pld). Devido ao crescimento da caprinovinocultura no Brasil e da grande incidência da linfadenite nos rebanhos deste setor, o objetivo neste estudo foi avaliar o potencial de uso da PLDr, como marcador de infecção por C. pseudotuberculosis por meio de testes sorológicos. Foram feitas reações de PCR em um volume final de 50 ?L, contendo: 5 ?L de tampão, 1,5 ?L de MgCl, 2 ?L de primer gateway foward, 2 ?L de primer reverse; 1 ?L de dNTP; 37 ?L de água milliQ; 0,5 U/ ?L de Taq DNA polimerase; 1 ?L de DNA genômico de C. pseudotuberculosis. A clonagem foi feita utilizando o sistema de expressão gateway, por meio de reações de recombinação. As reações foram transformadas em células de Escherichia coli BL21 e DH5?. A expressão foi obtida por indução das células transformadas em meio LB, com o antibiótico ampicilina, e IPTG 1 mM. A produção da proteína foi verificada pela análise em eletroforese em gel de poliacrilamida 13%, corado por coomassie blue. Por meio da análise em gel de agarose foi possível comprovar a amplificação pela PCR do gene pld com aproximadamente 924 pb e, a partir da eletroforese em gel de poliacrilamida 13%, confirmou-se a produção da proteína PLDr, com peso molecular de aproximadamente 31 KDa. Espera-se, na conclusão deste estudo, obter a PLDr purificada e certificada por western blotting e, a padronização de um teste de ELISA indireto em soros de animais naturalmente infectados com C. pseudotuberculosis.	
Thesagro: 	Corynebacterium Pseudotuberculosis.	
Categoria do assunto: 	--	
Registro original: 	Embrapa Gado de Corte (CNPGC)	
Exemplares: 	CNPGC - (13631-1) - UPC - PL - DD - CD-142 - JOR -  - DIS