Data/hora: 23/09/2024 14:00:26

Biblioteca(s): 	Embrapa Recursos Genéticos e Biotecnologia.	
Data corrente: 	10/07/2006	
Data da última atualização: 	06/06/2007	
Autoria: 	FERREIRA, B. C.; SIHLER, W.; CARNEIRO, M.; SOUZA, M. L. de.	
Título: 	Replicação de um baculovírus recombinante contendo o gene rolA de Agrobacterium rhizogenes em cultura de células de inseto.	
Ano de publicação: 	2005	
Fonte/Imprenta: 	Brasília: Embrapa Recursos Genéticos e Biotecnologia, 2005.	
Páginas: 	18p.	
Série: 	(Embrapa Recursos Genéticos e Biotecnologia. Boletim de Pesquisa e Desenvolvimento, 111)	
Idioma: 	Português	
Conteúdo: 	As características morfológicas conferidas a plantas infectadas por Agrobacterium rhizogenes têm como principal responsável o gene rolA. Entre as anomalias causadas por esse gene estão a redução do tamanho da planta, inibição do crescimento da raiz e retardo na floração. Em trabalhos anteriores foi construído um baculovírus recombinante com o gene rolA no locus do gene da poliedrina. O gene rolA foi clonado no vetor pFastBac HTb usado para transformação em células DH10Bac cells (Invitrogen), que contêm o genoma viral de Autographa californica Nucleopolyhedrovirus (AcMNPV). Este DNA viral recombinante foi cotransfectado em células de inseto Sf9 resultando em um vírus deficiente na produção da poliedrina, o qual foi chamado de v-rolA (Sihler et al, 2002). No presente trabalho foi investigada a infecção do vírus v-rolA nas diferentes linhagens celulares de Trichoplusia ni (Tn5B1-4) e de Spodoptera frugiperda, IPLB-SF-21AE e Sf9. O inóculo viral foi removido depois de uma hora de adsorção e as células foram incubadas em meio TNMFH a 27°C por 48h. O progresso de infecção foi monitorado por microscopia óptica. Alterações morfológicas como hipertrofia nuclear e formação de corpo denso foram observados nas células Tn5B1-4, SF21 e Sf9 após 24h. O DNA do vírus recombinante foi extraído de células infectadas, digeridas com enzima Pst I e amplificado através da técnica de PCR. As amostras de DNA foram analisadas por eletroforese em gel de agarose mostrando que o vírus se replicou em todas as linhagens celulares.	
Palavras-Chave: 	Agrobacterium rhizogenes; Baculovírus recombinante - replicação; Células - inseto- cultura; Gene rolA.	
Categoria do assunto: 	--	
URL: 	http://ainfo.cnptia.embrapa.br/digital/bitstream/CENARGEN/26831/1/bp111.pdf
http://www.cenargen.embrapa.br/publica/trabalhos/bp111.pdf	
Registro original: 	Embrapa Recursos Genéticos e Biotecnologia (CENARGEN)	
Exemplares: 	CENARGEN - (26831-1) - UMT - FL - DD -  -  - BOPEDE111 - DIS