| |
|
|
|
Registro Completo |
|
Biblioteca(s): |
Embrapa Pecuária Sul. |
|
Data corrente: |
26/01/2017 |
|
Data da última atualização: |
26/01/2017 |
|
Tipo da produção científica: |
Artigo em Periódico Indexado |
|
Autoria: |
GASPAR, E. B.; BATISTA, M. F.; RAMOS, J. V.; RIZZARDO, J. S.; DOMINGUES, R.; GULIAS-GOMES, C. C. |
|
Afiliação: |
EMANUELLE BALDO GASPAR, CPPSUL; Mariana Feijó Batista; Jeferson Vidart Ramos; Juliana Soares Rizzardo; ROBERT DOMINGUES, CPPSUL; CLAUDIA CRISTINA GULIAS GOMES, CPPSUL. |
|
Título: |
Padronização de ensaio imunoadsorvente ligado a enzima (ELISA) para detecção de IgG total, IgG1 e IgG2 contra antígenos de larvas, intestino e glândulas salivares de Rhipicephalus (Boophilus) microplus. |
|
Ano de publicação: |
2016 |
|
Fonte/Imprenta: |
Revista Congrega Urcamp, Bagé, v. 13, 2016. |
|
Idioma: |
Português |
|
Notas: |
Revista da Jornada de Pós-Graduação e Pesquisa - Congrega Urcamp. Autoria consta no resumo da publicação. |
|
Conteúdo: |
PADRONIZAÇÃO DE ENSAIO IMUNOADSORVENTE LIGADO A ENZIMA (ELISA) PARA DETECÇÃO DE IgG total, IgG1 e IgG2 CONTRA ANTÍGENOS DE LARVAS, INTESTINO E GLÂNDULAS SALIVARES DE Rhipicephalus (Boophilus) microplus Emanuelle Baldo Gaspar, Mariana Feijó Batista, Jeferson Vidart Ramos, Juliana Soares Rizzardo, Robert Domingues, Claudia Cristina Gulias Gomes Resumo I ? Introdução e justificativa: O ensaio imunoadsorvente ligado à enzima, ELISA, permite a detecção/quantificação da concentração de antígenos ou anticorpos. Dentre outras aplicações, este teste pode ser padronizado para detecção de anticorpos produzidos em resposta a antígenos de ectoparasitas. II ? Objetivo: O objetivo deste trabalho foi padronizar novos testes de ELISA para avaliar a imunidade humoral ao Rhipicephalus microplus, pela mensuração de IgG total, e das subclasses IgG1 e IgG2 em soro de bovinos. III ? Metodologia: Como antígenos, foram utilizados extratos solúveis de larvas (EL), e de intestinos (EI) ou glândula salivar (EGS) de adultos jovens do carrapato R. microplus, os quais foram adsorvidos a placas de 96 poços. A padronização de cada teste foi feita com a utilização de duas placas, uma controle negativo (soros pré-imune) e outra positivo (soros de bovinos coletados após sucessivas infestações artificiais com carrapato). Nas placas, os ensaios foram feitos por titulação cruzada, com diluições seriadas, tanto do antígeno, quanto do soro teste. Alguns parâmetros foram padronizados em todos os testes: diluição do antígeno em tampão carbonato-bicarbonato; Bloqueio com PBS + polisorbato 20 0,05% + leite desnatado 5%; Diluição das pastilhas de revelador conforme instrução do fabricante (SigmaFast OPD®); Parada das reações com H2SO4 3M; Duração de 1 hora e temperatura de 37°C para todas incubações, exceto para o OPD, que foi de 15 minutos a temperatura ambiente; Leitura das amostras em leitor de microplacas a 492 nm. IV ? Resultados: Para a escolha das concentrações ideais de antígeno e soro teste a serem utilizadas, os antígenos (EL, EGS ou EI) foram diluídos na base dois, partindo de uma concentração inicial de 1,5 mg/mL, em 11 diluições seriadas, nos seguintes intervalos: EL: 1/25 a 1/25600; EGS: 1/50 a 1/51200; EI: 1/25 a 1/25600, para a padronização do ELISA para detecção de IgG total; EL: 1/12,5 a 1/12800; EGS: 1/50 a 1/51200; EI: 1/12,5 a 1/12800, para a padronização do ELISA para detecção de IgG1; EL: 1/12,5 a 1/12800; EGS: 1/12,5 a 1/12800; EI: 1/12,5 a 1/12800, para a padronização do ELISA para detecção de IgG2. Já o soro teste foi diluído na base dois, em oito diluições seriadas, nos seguintes intervalos: ELISA para detecção de IgG total: 1/50 a 1/3200. Detecção de IgG1: placas adsorvidas com EL e EI: soro diluído 1/12,5 a 1/800; placas adsorvidas com EGS: soro diluído 1/50 a 1/3200; Detecção de IgG2: soro diluído 1/12,5 a 1/800; Com os resultados da leitura foram confeccionados gráficos expressando as curvas de absorbância. A análise destas curvas e da razão entre absorbância no soro positivo/negativo permitiu a escolha das diluições dos extratos [antígeno (Ag)] e soro teste: ELISA para detecção de IgG total (conjugado 1/10.000 em todos): EL: Ag 1/200; Soro: 1/200; EGS: Ag 1/100; Soro 1/200; EI: Ag 1/800; soro 1/100. ELISA para detecção de IgG1 (conjugado 1/20.000 em todos): EL: Ag 1/25; Soro: 1/50; EGS: Ag 1/100; Soro 1/200; EI: Ag 1/25; soro 1/50. ELISA para detecção de IgG2 (conjugado 1/10.000 em todos): EL: Ag 1/50; Soro: 1/50; EGS: Ag 1/100; Soro 1/50; EI: Ag 1/12,5; soro 1/100. V ? Conclusão: Os testes de ELISA padronizados mostraram-se factíveis e de fácil execução, permitindo futuras avaliações de desenvolvimento e caracterização de resposta imune ao carrapato, em bovinos de diferentes raças e em indivíduos com diferentes graus de suscetibilidade ao carrapato. MenosPADRONIZAÇÃO DE ENSAIO IMUNOADSORVENTE LIGADO A ENZIMA (ELISA) PARA DETECÇÃO DE IgG total, IgG1 e IgG2 CONTRA ANTÍGENOS DE LARVAS, INTESTINO E GLÂNDULAS SALIVARES DE Rhipicephalus (Boophilus) microplus Emanuelle Baldo Gaspar, Mariana Feijó Batista, Jeferson Vidart Ramos, Juliana Soares Rizzardo, Robert Domingues, Claudia Cristina Gulias Gomes Resumo I ? Introdução e justificativa: O ensaio imunoadsorvente ligado à enzima, ELISA, permite a detecção/quantificação da concentração de antígenos ou anticorpos. Dentre outras aplicações, este teste pode ser padronizado para detecção de anticorpos produzidos em resposta a antígenos de ectoparasitas. II ? Objetivo: O objetivo deste trabalho foi padronizar novos testes de ELISA para avaliar a imunidade humoral ao Rhipicephalus microplus, pela mensuração de IgG total, e das subclasses IgG1 e IgG2 em soro de bovinos. III ? Metodologia: Como antígenos, foram utilizados extratos solúveis de larvas (EL), e de intestinos (EI) ou glândula salivar (EGS) de adultos jovens do carrapato R. microplus, os quais foram adsorvidos a placas de 96 poços. A padronização de cada teste foi feita com a utilização de duas placas, uma controle negativo (soros pré-imune) e outra positivo (soros de bovinos coletados após sucessivas infestações artificiais com carrapato). Nas placas, os ensaios foram feitos por titulação cruzada, com diluições seriadas, tanto do antígeno, quanto do soro teste. Alguns parâmetros foram padronizados em todos os testes: diluição do ... Mostrar Tudo |
|
Thesagro: |
Antígeno; Carrapato; Técnica imunoenzimática. |
|
Categoria do assunto: |
-- |
|
URL: |
https://ainfo.cnptia.embrapa.br/digital/bitstream/item/154022/1/1068-3376-1-PB.pdf
|
|
Marc: |
LEADER 04801naa a2200229 a 4500
001 2061857
005 2017-01-26
008 2016 bl uuuu u00u1 u #d
100 1 $aGASPAR, E. B.
245 $aPadronização de ensaio imunoadsorvente ligado a enzima (ELISA) para detecção de IgG total, IgG1 e IgG2 contra antígenos de larvas, intestino e glândulas salivares de Rhipicephalus (Boophilus) microplus.$h[electronic resource]
260 $c2016
500 $aRevista da Jornada de Pós-Graduação e Pesquisa - Congrega Urcamp. Autoria consta no resumo da publicação.
520 $aPADRONIZAÇÃO DE ENSAIO IMUNOADSORVENTE LIGADO A ENZIMA (ELISA) PARA DETECÇÃO DE IgG total, IgG1 e IgG2 CONTRA ANTÍGENOS DE LARVAS, INTESTINO E GLÂNDULAS SALIVARES DE Rhipicephalus (Boophilus) microplus Emanuelle Baldo Gaspar, Mariana Feijó Batista, Jeferson Vidart Ramos, Juliana Soares Rizzardo, Robert Domingues, Claudia Cristina Gulias Gomes Resumo I ? Introdução e justificativa: O ensaio imunoadsorvente ligado à enzima, ELISA, permite a detecção/quantificação da concentração de antígenos ou anticorpos. Dentre outras aplicações, este teste pode ser padronizado para detecção de anticorpos produzidos em resposta a antígenos de ectoparasitas. II ? Objetivo: O objetivo deste trabalho foi padronizar novos testes de ELISA para avaliar a imunidade humoral ao Rhipicephalus microplus, pela mensuração de IgG total, e das subclasses IgG1 e IgG2 em soro de bovinos. III ? Metodologia: Como antígenos, foram utilizados extratos solúveis de larvas (EL), e de intestinos (EI) ou glândula salivar (EGS) de adultos jovens do carrapato R. microplus, os quais foram adsorvidos a placas de 96 poços. A padronização de cada teste foi feita com a utilização de duas placas, uma controle negativo (soros pré-imune) e outra positivo (soros de bovinos coletados após sucessivas infestações artificiais com carrapato). Nas placas, os ensaios foram feitos por titulação cruzada, com diluições seriadas, tanto do antígeno, quanto do soro teste. Alguns parâmetros foram padronizados em todos os testes: diluição do antígeno em tampão carbonato-bicarbonato; Bloqueio com PBS + polisorbato 20 0,05% + leite desnatado 5%; Diluição das pastilhas de revelador conforme instrução do fabricante (SigmaFast OPD®); Parada das reações com H2SO4 3M; Duração de 1 hora e temperatura de 37°C para todas incubações, exceto para o OPD, que foi de 15 minutos a temperatura ambiente; Leitura das amostras em leitor de microplacas a 492 nm. IV ? Resultados: Para a escolha das concentrações ideais de antígeno e soro teste a serem utilizadas, os antígenos (EL, EGS ou EI) foram diluídos na base dois, partindo de uma concentração inicial de 1,5 mg/mL, em 11 diluições seriadas, nos seguintes intervalos: EL: 1/25 a 1/25600; EGS: 1/50 a 1/51200; EI: 1/25 a 1/25600, para a padronização do ELISA para detecção de IgG total; EL: 1/12,5 a 1/12800; EGS: 1/50 a 1/51200; EI: 1/12,5 a 1/12800, para a padronização do ELISA para detecção de IgG1; EL: 1/12,5 a 1/12800; EGS: 1/12,5 a 1/12800; EI: 1/12,5 a 1/12800, para a padronização do ELISA para detecção de IgG2. Já o soro teste foi diluído na base dois, em oito diluições seriadas, nos seguintes intervalos: ELISA para detecção de IgG total: 1/50 a 1/3200. Detecção de IgG1: placas adsorvidas com EL e EI: soro diluído 1/12,5 a 1/800; placas adsorvidas com EGS: soro diluído 1/50 a 1/3200; Detecção de IgG2: soro diluído 1/12,5 a 1/800; Com os resultados da leitura foram confeccionados gráficos expressando as curvas de absorbância. A análise destas curvas e da razão entre absorbância no soro positivo/negativo permitiu a escolha das diluições dos extratos [antígeno (Ag)] e soro teste: ELISA para detecção de IgG total (conjugado 1/10.000 em todos): EL: Ag 1/200; Soro: 1/200; EGS: Ag 1/100; Soro 1/200; EI: Ag 1/800; soro 1/100. ELISA para detecção de IgG1 (conjugado 1/20.000 em todos): EL: Ag 1/25; Soro: 1/50; EGS: Ag 1/100; Soro 1/200; EI: Ag 1/25; soro 1/50. ELISA para detecção de IgG2 (conjugado 1/10.000 em todos): EL: Ag 1/50; Soro: 1/50; EGS: Ag 1/100; Soro 1/50; EI: Ag 1/12,5; soro 1/100. V ? Conclusão: Os testes de ELISA padronizados mostraram-se factíveis e de fácil execução, permitindo futuras avaliações de desenvolvimento e caracterização de resposta imune ao carrapato, em bovinos de diferentes raças e em indivíduos com diferentes graus de suscetibilidade ao carrapato.
650 $aAntígeno
650 $aCarrapato
650 $aTécnica imunoenzimática
700 1 $aBATISTA, M. F.
700 1 $aRAMOS, J. V.
700 1 $aRIZZARDO, J. S.
700 1 $aDOMINGUES, R.
700 1 $aGULIAS-GOMES, C. C.
773 $tRevista Congrega Urcamp, Bagé$gv. 13, 2016.
Download
Esconder MarcMostrar Marc Completo |
|
Registro original: |
Embrapa Pecuária Sul (CPPSUL) |
|
|
Biblioteca |
ID |
Origem |
Tipo/Formato |
Classificação |
Cutter |
Registro |
Volume |
Status |
URL |
Voltar
|
|
|
 | Acesso ao texto completo restrito à biblioteca da Embrapa Agrobiologia. Para informações adicionais entre em contato com cnpab.biblioteca@embrapa.br. |
Registro Completo
|
Biblioteca(s): |
Embrapa Agrobiologia. |
|
Data corrente: |
26/04/1999 |
|
Data da última atualização: |
26/04/1999 |
|
Autoria: |
BALDANI, V. L. D.; OLIVEIRA, E.; BALOTA, E.; BALDANI, J. I.; KIRCHHOF, G.; DOBEREINER, Johanna. |
|
Título: |
Burkholderia brasilensis sp. nov., uma nova especie de bacteria diazotrofica endofitica. |
|
Ano de publicação: |
1997 |
|
Fonte/Imprenta: |
Anais da Academia Brasileira de Ciencias, Rio de Janeiro, v. 69, n. 1, p. 116, 1997. |
|
Idioma: |
Português |
|
Conteúdo: |
Durante o desenvolvimento dos trabalhos de levantamento ecologico de bacterias diazotroficas, associadas a gramineas, foi observado a presenca de uma especie nova, denominada "bacteria E", tendo sido isolada de cana-de-acucar, batata doce, mandioca e principalmente de arroz. Este microrganismo cresce em meio JMV semi-solido sem N, pH 5,0 com manitol como fonte de carbono. Testes feitos ate o momento com este grupo de bacterias diazotroficas endofiticas, mostraram que as mesmas produzem capsula, possuem tamanho 1,5mm x 3,2mm, crescem em meio semi-solido JMV (manitol) sem nitrogenio, formando pelicula grossa na superficie do meio apos 3 a 5 dias. Crescem em niveis elevados de sacarose (10%) e em ate 1% de NaCl. Utilizam succinato, citrato, fumarato, glucose, sacarose, celobiose e maltose como unica fonte de carbono, mas nao crescem em meio com oxalato, e malonato. Produzem acido a partir de glucose, arabinose, maltose e celobiose e nao requerem biotina. Apresentam crescimento e fixacao de N2 em presenca de ate 100 mg/l de extrato de levedura, assim como resistencia intrinseca de ate 10 mg/ml dos antibioticos: rifampicina, cloranfenicol, novobiocina e neomicina, sendo sensivel a estreptomicina, canamicina e tetraciclina. Sua faixa otima, para crescimento e fixacao de N2, e de pH 4,0 a 5,5 e temperatura de 28 a 32 graus C. A atividade da nitrogenase e reprimida na presenca de NO3- e NH4+ e ocorre acumulo de NO2- no meio quando cresce em presenca de NO3- indicando ausencia da enzima redutase do nitrito... MenosDurante o desenvolvimento dos trabalhos de levantamento ecologico de bacterias diazotroficas, associadas a gramineas, foi observado a presenca de uma especie nova, denominada "bacteria E", tendo sido isolada de cana-de-acucar, batata doce, mandioca e principalmente de arroz. Este microrganismo cresce em meio JMV semi-solido sem N, pH 5,0 com manitol como fonte de carbono. Testes feitos ate o momento com este grupo de bacterias diazotroficas endofiticas, mostraram que as mesmas produzem capsula, possuem tamanho 1,5mm x 3,2mm, crescem em meio semi-solido JMV (manitol) sem nitrogenio, formando pelicula grossa na superficie do meio apos 3 a 5 dias. Crescem em niveis elevados de sacarose (10%) e em ate 1% de NaCl. Utilizam succinato, citrato, fumarato, glucose, sacarose, celobiose e maltose como unica fonte de carbono, mas nao crescem em meio com oxalato, e malonato. Produzem acido a partir de glucose, arabinose, maltose e celobiose e nao requerem biotina. Apresentam crescimento e fixacao de N2 em presenca de ate 100 mg/l de extrato de levedura, assim como resistencia intrinseca de ate 10 mg/ml dos antibioticos: rifampicina, cloranfenicol, novobiocina e neomicina, sendo sensivel a estreptomicina, canamicina e tetraciclina. Sua faixa otima, para crescimento e fixacao de N2, e de pH 4,0 a 5,5 e temperatura de 28 a 32 graus C. A atividade da nitrogenase e reprimida na presenca de NO3- e NH4+ e ocorre acumulo de NO2- no meio quando cresce em presenca de NO3- indicando ausencia da en... Mostrar Tudo |
|
Palavras-Chave: |
Bacterias; Diazotrofico; Diazotrophy; Endofito. |
|
Thesagro: |
Bactéria. |
|
Thesaurus NAL: |
endophytes. |
|
Categoria do assunto: |
-- |
|
Marc: |
LEADER 02240naa a2200253 a 4500
001 1621083
005 1999-04-26
008 1997 bl uuuu u00u1 u #d
100 1 $aBALDANI, V. L. D.
245 $aBurkholderia brasilensis sp. nov., uma nova especie de bacteria diazotrofica endofitica.
260 $c1997
520 $aDurante o desenvolvimento dos trabalhos de levantamento ecologico de bacterias diazotroficas, associadas a gramineas, foi observado a presenca de uma especie nova, denominada "bacteria E", tendo sido isolada de cana-de-acucar, batata doce, mandioca e principalmente de arroz. Este microrganismo cresce em meio JMV semi-solido sem N, pH 5,0 com manitol como fonte de carbono. Testes feitos ate o momento com este grupo de bacterias diazotroficas endofiticas, mostraram que as mesmas produzem capsula, possuem tamanho 1,5mm x 3,2mm, crescem em meio semi-solido JMV (manitol) sem nitrogenio, formando pelicula grossa na superficie do meio apos 3 a 5 dias. Crescem em niveis elevados de sacarose (10%) e em ate 1% de NaCl. Utilizam succinato, citrato, fumarato, glucose, sacarose, celobiose e maltose como unica fonte de carbono, mas nao crescem em meio com oxalato, e malonato. Produzem acido a partir de glucose, arabinose, maltose e celobiose e nao requerem biotina. Apresentam crescimento e fixacao de N2 em presenca de ate 100 mg/l de extrato de levedura, assim como resistencia intrinseca de ate 10 mg/ml dos antibioticos: rifampicina, cloranfenicol, novobiocina e neomicina, sendo sensivel a estreptomicina, canamicina e tetraciclina. Sua faixa otima, para crescimento e fixacao de N2, e de pH 4,0 a 5,5 e temperatura de 28 a 32 graus C. A atividade da nitrogenase e reprimida na presenca de NO3- e NH4+ e ocorre acumulo de NO2- no meio quando cresce em presenca de NO3- indicando ausencia da enzima redutase do nitrito...
650 $aendophytes
650 $aBactéria
653 $aBacterias
653 $aDiazotrofico
653 $aDiazotrophy
653 $aEndofito
700 1 $aOLIVEIRA, E.
700 1 $aBALOTA, E.
700 1 $aBALDANI, J. I.
700 1 $aKIRCHHOF, G.
700 1 $aDOBEREINER, Johanna.
773 $tAnais da Academia Brasileira de Ciencias, Rio de Janeiro$gv. 69, n. 1, p. 116, 1997.
Download
Esconder MarcMostrar Marc Completo |
|
Registro original: |
Embrapa Agrobiologia (CNPAB) |
|
|
Biblioteca |
ID |
Origem |
Tipo/Formato |
Classificação |
Cutter |
Registro |
Volume |
Status |
Fechar
|
| Expressão de busca inválida. Verifique!!! |
|
|
