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| Registros recuperados : 16 | |
| 1. |  | SANTOS, J. D. R.; ARASHIRO, E. K. N.; BALARO, M. F. A.; SOUZA-FABJAN, J. M. G.; PINTO, P. H. N.; SOUZA, C. V.; ALFRADIQUE, V. A. P.; BADE, A. L. C.; FONSECA, J. F. da; BRANDÃO, F. Z. Cervical transposition test at estrus as a tool to select ewes for transcervical embryo collection. Animal Reprodroduction, v. 15, n. 3, p. 492, Jul./Sept. 2018. Abstracts A110. Edição dos Proceedings of the 32nd Annual Meeting of the Brazilian Embryo Technology Society (SBTE); Florianópolis, SC, Brazil, August 16th to 18th, 2018.| Biblioteca(s): Embrapa Caprinos e Ovinos. |
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| 2. | | BRAGANÇA, G. M.; BATISTA, R. I. T. P.; FABJAN, J. M. G. de S.; ALFRADIQUE, V. A. P.; CÔRTES, L. R.; CAMARGO, L. S. de A.; FONSECA, J. F. da; BRANDÃO, F. Z. FSH dose and strategy of administration during ovarian simulation alter the gene expression profile in ovine cumulus-oocyte complexes. In: ANNUAL MEETING OF THE BRAZILIAN EMBRYO TECNNOLOGY SOCIETY, 14., 2017, Cabo de Santo Agostinho. Proceedings... Cabo de Santo Agostinho: SBTE, 2017. p. 746.| Biblioteca(s): Embrapa Gado de Leite. |
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| 3. | | BRAGANÇA, G. M.; BATISTA, R. I. T. P.; SOUZA FABJAN, J. M. G. de; ALFRADIQUE, V. A. P.; CORTÊS, L. R.; CAMARGO, L. S. de A.; FONSECA, J. F. da; BRANDÃO, F. Z. FSH dose and strategy of administration during ovarian stimulation alter the gene expression profile in ovine cumulus-oocyte complexes. Animal Reprodroduction, v. 14, n. 3, p. 746, Jul./Sept. 2017. Proceedings of the 31st Annual Meeting of the Brazilian Embryo Technology Society (SBTE), Cabo de Santo Agostinho, PE, Brazil, August 17 to 19, 2017.| Biblioteca(s): Embrapa Caprinos e Ovinos. |
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| 4. | | PINTO, P. H. N.; BALARO, M. F. A.; SARAIVA, H. F. R. de A.; BRAIR, V. L.; ALFRADIQUE, V. A. P.; CÔRTESA, L. R.; COSENTINO, I. O.; SOUZA-FABJANA, J. M. G.; FONSECA, J. F. da; BRANDÃO, F. Z. Successive in vivo embryo production in Santa Inês sheep. Animal Production Science, v. 60, n. 4, p. 497-502, Dec. 2020.| Biblioteca(s): Embrapa Caprinos e Ovinos. |
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| 5. | | ROSA, R. M.; BALARO, M. F. A.; PINTO, P. H. N.; SARAIVA, H. F. R. A.; BATISTA, R. I. T. P.; ALFRADIQUE, V. A. P.; RIBEIRO, L. S.; FONSECA, J. F. da; UNGERFELD, R.; BRANDÃO, F. Z. Follicular wave synchronization on in vivo embryo production in Santa Ines sheep. Animal Reproduction, v. 13, n. 3, p. 474, Jul./Sept. 2016. Proceedings of the 30th Annual Meeting of the Brazilian Embryo Technology Society (SBTE); Foz do Iguaçu, PR, Brazil, August 25th to 27th, 2016, and 32nd Meeting of the European Embryo Transfer Association (AETE); Barcelona, Spain,...| Biblioteca(s): Embrapa Caprinos e Ovinos. |
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| 6. | | BRAGANÇA, G. M.; BATISTA, R. I. T. P.; SOUZA-FABJAN, J. M. G.; ALFRADIQUE, V. A. P.; ARASHIRO, E. K. N.; COSENTINO, I. O.; PINTO, P. H. N.; CAMARGO, L. S. de A.; FONSECA, J. F. da; BRANDÃO, F. Z. Dose and administration protocol for FSH used for ovarian stimulation affect gene expression in sheep cumulus-oocyte complexes. Reproduction, Fertility and Development, v. 30, n. 9, p. 1234-1244, 2018.| Biblioteca(s): Embrapa Gado de Leite. |
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| 7. | | BRAGANÇA, G. M.; ALFRADIQUE, V. A. P.; BATISTA, R. I. T. P.; SOUZA-FABJAN, J. M. G. de; ARASHIRO, E. K. N.; BALARO, M. F. A.; OLIVEIRA, I. C. de; BRANDÃO, F. Z.; CÔRTES, L. R.; FONSECA, J. F. da. Efeito de diferentes protocolos hormonais para superestimulação ovariana sobre o número e a qualidade de oócitos em ovelhas da raça Santa Inês. Revista Brasileira de Reprodução Animal, Belo Horizonte, v. 41, n. 1, p. 470, jan./mar. 2017. Edição dos anais do XXII Congresso Brasileiro de Reprodução Animal (CBRA), Santos, SP, Brasil, maio 2017.| Biblioteca(s): Embrapa Caprinos e Ovinos. |
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| 8. | | OLIVEIRA, C. C. S.; SOUZA-FABJAN, J. M. G.; FONSECA, J. F. da; BATISTA, R. I. T. P.; BALARO, M. F. A.; SARAIVA, H. F. R. de A.; ALFRADIQUE, V. A. P.; CÔRTES, L. R.; BRANDÃO, F. Z. Mini-Percoll processing of domestic ruminant frozen-thawed semen dispenses the use of heparin in capacitating medium. Revista Brasileira de Reprodução Animal, Belo Horizonte, v. 41, n. 1, p. 498, jan./mar. 2017. Edição dos anais do XXII Congresso Brasileiro de Reprodução Animal (CBRA), Santos, SP, Brasil, maio 2017.| Biblioteca(s): Embrapa Caprinos e Ovinos. |
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| 9. | | ALFRADIQUE, V. A. P.; OLIVARES, C. C. S.; SOUZA-FABJAN, J. M. G. de; FONSECA, J. F. da; BATISTA, R. I. T. P.; BALARO, M. F. A.; SARAIVA, H. F. R. de A.; CÔRTES, L. R.; BRANDÃO, F. Z. Mini-percoll technique induces Similar capacitation features in domestic ruminant frozen-thawed spermatozoa regardless of the presence of heparin. Acta Scientiae Veterinariae, v. 47, Pub. 1707, p. 1-8, 2019.| Biblioteca(s): Embrapa Caprinos e Ovinos. |
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| 10. | | OLIVARES, C. C. S.; ALFRADIQUE, V. A. P.; SOUZA FABJAN, J. M. G.; FONSECA, J. F. da; SARAIVA, H. F. R. A.; CÔRTES, L. R.; COSTA, L. C. da; BRANDÃO, F. Z. Influence of mini-Percoll techniques in sperm capacitation and plasma membrane integrity of ram frozen-thawed sperm. Animal Reproduction, v. 13, n. 3, p. 552, Jul./Sept. 2016. Proceedings of the 30th Annual Meeting of the Brazilian Embryo Technology Society (SBTE); Foz do Iguaçu, PR, Brazil, August 25th to 27th, 2016, and 32nd Meeting of the European Embryo Transfer Association (AETE); Barcelona, Spain,...| Biblioteca(s): Embrapa Caprinos e Ovinos. |
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| 11. | | PINTO, P. H. N.; BRAGANÇA, G. M.; RIBEIRO, L. dos S.; BALARO, M. F. A.; BRAIR, V. L.; CONSENTINO, I. O.; ALFRADIQUE, V. A. P.; FONSECA, J. F. da; BRANDÃO, F. Z. Repetibilidade de resposta para produção in vivo de embriões em ovelhas Santa Inês. Revista Brasileira de Reprodução Animal, Belo Horizonte, v. 41, n. 1, p. 485, jan./mar. 2017. Resumo apresentado nos anais do XXII Congresso Brasileiro de Reprodução Animal, Santos, SP, 2017.| Biblioteca(s): Embrapa Caprinos e Ovinos. |
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| 12. | | SARAIVA, H. F. R. de A.; BATISTA, R. I. T. P.; ALFRADIQUE, V. A. P.; PINTO, P. H. N.; RIBEIRO, L. S.; OLIVEIRA, C. S.; SOUZA FABJAN, J. M. G. de; CAMARGO, L. S. de A.; FONSECA, J. F. da; BRANDÃO, F. Z. L-carnitine supplementation during vitrification did not improve survival and quality rates, but altered CrAT and PRDX1 expression in in vivo-produced ovine embryos. Animal Reprodroduction, v. 14, n. 3, p. 898, Jul./Sept. 2017. Proceedings of the 31st Annual Meeting of the Brazilian Embryo Technology Society (SBTE); Cabo de Santo Agostinho, PE, Brazil, August 17th to 19th, 2017. Abstracts.| Biblioteca(s): Embrapa Caprinos e Ovinos. |
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| 13. | | SARAIVA, H. F. R. de A.; BATISTA, R. I. T. P.; ALFRADIQUE, V. A. P.; PINTO, P. H. N.; RIBEIRO, L. S.; OLIVEIRA, C. S.; SOUZA-FABJAN, J. M. G. de; CAMARGO, L. S. de A.; FONSECA, J. F. da; BRANDÃO, F. Z. L-carnitine supplementation during vitrification did not improve survival and quality rates, but altered CrAT and PRDXI expression in in vivo-produced ovine embryos. In: ANNUAL MEETING OF THE BRAZILIAN EMBRYO TECNNOLOGY SOCIETY, 14., 2017, Cabo de Santo Agostinho. Proceedings... Cabo de Santo Agostinho: SBTE, 2017. p. 901.| Biblioteca(s): Embrapa Gado de Leite. |
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| 14. | | SARAIVA, H. F. R. de A.; BATISTA, R. I. T. P.; ALFRADIQUE, V. A. P.; PINTO, P. H. N.; RIBEIRO, L. S.; OLIVEIRA, C. S.; SOUZA-FABJAN, J. M. G. de; CAMARGO, L. S. de A.; FONSECA, J. F. da; BRANDÃO, F. Z. l-carnitine supplementation during vitrification or warming of in vivo-produced ovine embryos does not affect embryonic survival rates, but alters CrAT and PRDX1 expression. Theriogenology, v. 105, p. 150-157, Jan. 2018.| Biblioteca(s): Embrapa Caprinos e Ovinos. |
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| 15. | | SARAIVA, H. F. R. de A.; BATISTA, R. I. T. P.; ALFRADIQUE, V. A. P.; PINTO, P. H. N.; RIBEIRO, L. S.; OLIVEIRA, C. S.; SOUZA-FABJAN, J. M. G. de; CAMARGO, L. S. de A.; FONSECA, J. F. da; BRANDAO, F. Z. L-carnitine supplementation during vitrification or warming of in vivo-produced ovine embryos does not affect embryonic survival rates, but alters CrAT and PRDXI expression. Theriogenology, v. 105, p. 150-157, jan. 2018.| Biblioteca(s): Embrapa Gado de Leite. |
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| 16. | | BRAGANÇA, G. M.; BATISTA, R. I. T. P.; SOUZA-FABJAN, J. M. G.; ALFRADIQUE, V. A. P.; ARASHIRO, E. K. N.; PINTO, P. H. N.; SANTOS, J. D. R.; CAMARGO, L. S. de A.; MENCHACA, A.; FONSECA, J. F. da; BRANDÃO, F. Z. Exogenous progestogens differentially alter gene expression of immature cumulus-oocyte complexes in sheep. Domestic Animal Endocrinology, v. 74, e106518, 2021.| Biblioteca(s): Embrapa Caprinos e Ovinos; Embrapa Gado de Leite. |
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| Registros recuperados : 16 | |
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Registro Completo
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Biblioteca(s): |
Embrapa Caprinos e Ovinos. |
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Data corrente: |
05/09/2016 |
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Data da última atualização: |
23/09/2019 |
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Tipo da produção científica: |
Resumo em Anais de Congresso |
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Autoria: |
OLIVARES, C. C. S.; ALFRADIQUE, V. A. P.; SOUZA FABJAN, J. M. G.; FONSECA, J. F. da; SARAIVA, H. F. R. A.; CÔRTES, L. R.; COSTA, L. C. da; BRANDÃO, F. Z. |
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Afiliação: |
Universidade Federal Fluminense (UFF) - Niteroi, RJ; UFF - Niteroi, RJ; UFF - Niteroi, RJ; JEFERSON FERREIRA DA FONSECA, CNPC; UFF - Niteroi, RJ; UFF - Niteroi, RJ; UFF - Niteroi, RJ; UFF - Niteroi, RJ. |
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Título: |
Influence of mini-Percoll techniques in sperm capacitation and plasma membrane integrity of ram frozen-thawed sperm. |
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Ano de publicação: |
2016 |
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Fonte/Imprenta: |
Animal Reproduction, v. 13, n. 3, p. 552, Jul./Sept. 2016. |
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Idioma: |
Inglês |
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Notas: |
Proceedings of the 30th Annual Meeting of the Brazilian Embryo Technology Society (SBTE); Foz do Iguaçu, PR, Brazil, August 25th to 27th, 2016, and 32nd Meeting of the European Embryo Transfer Association (AETE); Barcelona, Spain, September 9th and 10th, 2016. |
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Conteúdo: |
Abstract: The success of IVF and subsequent development of embryos are directly related to sperm selection and quality. This study aimed to evaluate the effect of different forces and time of centrifugation in mini-Percoll (MP) techniques for sperm selection on capacitation status and plasma membrane (PM) integrity of ram frozen-thawed sperm. Commercial semen from 10 rams of Santa Inês breed, aging 2-5 years old, were used. At post-thawing (PT), the PM integrity was evaluated by CASA using the SCA® system (Sperm Class Analyzer ? Microptic Automatic Diagnostic Systems, Barcelona, Spain). For traditional Percoll (Sigma Chemical, St. Louis, USA), a 2 mL-gradient (90/45% density) was subjected to a 700 x g centrifugation for 10 min followed by 200 x g for 5 min. The MP techniques consisted in an 800 µL-gradient (90/45% density) subjected to either: I) two centrifugations of 5000 x g for 5 min; II) two centrifugations of 2500 x g for 5 min; III) two centrifugations of 1250 x g for 5 min; IV) 700 x g for 10 min, followed by 200 x g for 5 min. At the end of all treatments, aliquots (post-protocols = 0 h) were taken for evaluation of PM integrity and capacitation status by chlortetracycline stain (Sigma Chemical, St. Louis, USA). Later on, samples of all treatments were submitted to incubation at 37°C, 1 h, 2 h and 3 h and the same parameters were assessed. The variables were subjected to either ANOVA or Kruskal-Wallis tests depending on normality, Tukey and Fisher-LSD analysis (P < 0.05). There was no difference (P > 0.05) among all treatments for capacitation status and PM integrity. The capacitated rate was higher (P < 0.05) at 3 h (28.6 ± 2.5%) when compared with 0 h (23.3 ± 1.7%) and 1 h (23.8 ± 1.4%) of incubation, regardless of the treatment. There was no difference (P > 0.05) for PM integrity among the protocols at 0h. Regardless of the treatment, the intact and damaged PM rate, respectively, were similar (P > 0.05) for PT (16.4 ± 2.0% vs. 84.0 ± 2.0%) and 0 h (19.0 ± 2.9% vs. 81.1 ± 2.9%; average of all treatments). When analyzing just intact cells, the PT values were greater (P < 0.05) than any incubation interval, whereas the latter were lower than 0 h values (P < 0.05). In conclusion, MP may be used as an ideal alternative to the traditional Percoll, decreasing costs and time of sperm handling, without cell damages in ram sperm. Chemical, St. Louis, USA). [Influência de diferentes técnicas de mini-percoll na capacitação espermática e integridade de membrana plasmática de sêmen descongelado de carneiros]. Resumo: O sucesso da FIV e posterior desenvolvimento embrionário são diretamente relacionados com a qualidade seminal e seleção espermática. O presente estudo teve como objetivo avaliar o efeito de diferentes forças e tempo de centrifugação de diferentes técnicas de seleção espermática de mini-Percoll (MP) no status da capacitação espermática e integridade da membrana plasmática (MP) de sêmen descongelado de carneiros. Foram utilizadas 10 palhetas de sêmen comercial congelado de diferentes carneiros da raça Santa Inês, com idade entre 2-5 anos. Na avaliação pós descongelamento (PD), a integridade de MP foi analisada pelo CASA por meio do sistema SCA® (Sperm Class Analyzer ? Microptic Automatic Diagnostic Systems, Barcelona, Espanha). A técnica de Percoll (Sigma Chemical, St. Louis, USA) tradicional consistiu em utilizar 2 mL de gradiente (90/45%) e centrifugar a uma força de 700 x g por 10 minutos, seguida de outra centrifugação a 200 x g por 5 minutos. As técnicas de MP consistiram em utilizar um volume de 800 ?L de gradiente (90/45%) que foram submetidos aos seguintes tempos e forças de centrifugação: I) duas centrifugações de 5000 x g por 5 minutos; II) duas centrifugações de 2500 x g por 5 minutos; III) duas centrifugações de1250 x g por 5 minutos; IV) 700 x g por 10 minutos, seguidas de outra centrifugação a 200 x g por 5 minutos. No fim dos tratamentos (pós protocolos = 0 h), alíquotas foram retiradas para avaliação da integridade de MP e status da capacitação espermática pela coloração de clortetraciclina (Sigma Chemical, St. Louis, USA). Posteriormente, as amostras de todos os tratamentos foram incubadas a 37 °C, 1 h, 2 h e 3 h e os mesmos parâmetros foram avaliados. As variáveis foram submetidas às análises de ANOVA ou teste de Kruskal-Wallis dependendo da normalidade, e testes de Tukey e Fisher-LSD (P < 0,05). Não houve diferença (P > 0,05) entre os tratamentos durante a avaliação do status da capacitação espermática e da integridade de MP. A taxa de capacitação foi maior (P < 0.05) em 3 h de incubação (28,6 ± 2,5%) quando comparado com 0 h (23,3 ± 1,7%) e 1 h (23,8 ± 1,4%), independente do tratamento utilizado. Não houve diferença (P > 0,05) em relação à integridade de MP entre os tratamentos a 0 h. Independente do tratamento utilizado, as taxas de MP íntegra e lesada, respectivamente, foram semelhantes (P > 0,05) no PD (16,4 ± 2,0% vs. 84,0 ± 2,0%; média de todos os tratamentos) e no momento 0 h (19,0 ± 2,9% vs. 81,1 ± 2,9%; média de todos os tratamentos). Quando foram analisadas somente células íntegras, os valores no PD foram maiores (P < 0,05) do que todos os intervalos de incubação, enquanto que todos os intervalos de incubação apresentaram taxas menores que os valores encontrados no momento 0 h (P < 0,05). Em conclusão, as técnicas de MP podem ser utilizadas como uma alternativa ideal ao método tradicional de Percoll durante a seleção espermática de sêmen congelado de carneiros, diminuindo custos e tempo de preparação espermática, sem que haja danos aos espermatozoides. MenosAbstract: The success of IVF and subsequent development of embryos are directly related to sperm selection and quality. This study aimed to evaluate the effect of different forces and time of centrifugation in mini-Percoll (MP) techniques for sperm selection on capacitation status and plasma membrane (PM) integrity of ram frozen-thawed sperm. Commercial semen from 10 rams of Santa Inês breed, aging 2-5 years old, were used. At post-thawing (PT), the PM integrity was evaluated by CASA using the SCA® system (Sperm Class Analyzer ? Microptic Automatic Diagnostic Systems, Barcelona, Spain). For traditional Percoll (Sigma Chemical, St. Louis, USA), a 2 mL-gradient (90/45% density) was subjected to a 700 x g centrifugation for 10 min followed by 200 x g for 5 min. The MP techniques consisted in an 800 µL-gradient (90/45% density) subjected to either: I) two centrifugations of 5000 x g for 5 min; II) two centrifugations of 2500 x g for 5 min; III) two centrifugations of 1250 x g for 5 min; IV) 700 x g for 10 min, followed by 200 x g for 5 min. At the end of all treatments, aliquots (post-protocols = 0 h) were taken for evaluation of PM integrity and capacitation status by chlortetracycline stain (Sigma Chemical, St. Louis, USA). Later on, samples of all treatments were submitted to incubation at 37°C, 1 h, 2 h and 3 h and the same parameters were assessed. The variables were subjected to either ANOVA or Kruskal-Wallis tests depending on normality, Tukey and Fisher-LSD analysis (P <... Mostrar Tudo |
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Palavras-Chave: |
Mini-Percoll; Sperm preparation; Sperm selection. |
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Thesagro: |
Espermatozóide; Ovelha; Ovino; Reprodução animal; Sêmen. |
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Thesaurus NAL: |
Sheep; Spermatozoa. |
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Categoria do assunto: |
L Ciência Animal e Produtos de Origem Animal |
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URL: |
https://ainfo.cnptia.embrapa.br/digital/bitstream/item/147097/1/cnpc-2016-Influence-of.pdf
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Marc: |
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520 $aAbstract: The success of IVF and subsequent development of embryos are directly related to sperm selection and quality. This study aimed to evaluate the effect of different forces and time of centrifugation in mini-Percoll (MP) techniques for sperm selection on capacitation status and plasma membrane (PM) integrity of ram frozen-thawed sperm. Commercial semen from 10 rams of Santa Inês breed, aging 2-5 years old, were used. At post-thawing (PT), the PM integrity was evaluated by CASA using the SCA® system (Sperm Class Analyzer ? Microptic Automatic Diagnostic Systems, Barcelona, Spain). For traditional Percoll (Sigma Chemical, St. Louis, USA), a 2 mL-gradient (90/45% density) was subjected to a 700 x g centrifugation for 10 min followed by 200 x g for 5 min. The MP techniques consisted in an 800 µL-gradient (90/45% density) subjected to either: I) two centrifugations of 5000 x g for 5 min; II) two centrifugations of 2500 x g for 5 min; III) two centrifugations of 1250 x g for 5 min; IV) 700 x g for 10 min, followed by 200 x g for 5 min. At the end of all treatments, aliquots (post-protocols = 0 h) were taken for evaluation of PM integrity and capacitation status by chlortetracycline stain (Sigma Chemical, St. Louis, USA). Later on, samples of all treatments were submitted to incubation at 37°C, 1 h, 2 h and 3 h and the same parameters were assessed. The variables were subjected to either ANOVA or Kruskal-Wallis tests depending on normality, Tukey and Fisher-LSD analysis (P < 0.05). There was no difference (P > 0.05) among all treatments for capacitation status and PM integrity. The capacitated rate was higher (P < 0.05) at 3 h (28.6 ± 2.5%) when compared with 0 h (23.3 ± 1.7%) and 1 h (23.8 ± 1.4%) of incubation, regardless of the treatment. There was no difference (P > 0.05) for PM integrity among the protocols at 0h. Regardless of the treatment, the intact and damaged PM rate, respectively, were similar (P > 0.05) for PT (16.4 ± 2.0% vs. 84.0 ± 2.0%) and 0 h (19.0 ± 2.9% vs. 81.1 ± 2.9%; average of all treatments). When analyzing just intact cells, the PT values were greater (P < 0.05) than any incubation interval, whereas the latter were lower than 0 h values (P < 0.05). In conclusion, MP may be used as an ideal alternative to the traditional Percoll, decreasing costs and time of sperm handling, without cell damages in ram sperm. Chemical, St. Louis, USA). [Influência de diferentes técnicas de mini-percoll na capacitação espermática e integridade de membrana plasmática de sêmen descongelado de carneiros]. Resumo: O sucesso da FIV e posterior desenvolvimento embrionário são diretamente relacionados com a qualidade seminal e seleção espermática. O presente estudo teve como objetivo avaliar o efeito de diferentes forças e tempo de centrifugação de diferentes técnicas de seleção espermática de mini-Percoll (MP) no status da capacitação espermática e integridade da membrana plasmática (MP) de sêmen descongelado de carneiros. Foram utilizadas 10 palhetas de sêmen comercial congelado de diferentes carneiros da raça Santa Inês, com idade entre 2-5 anos. Na avaliação pós descongelamento (PD), a integridade de MP foi analisada pelo CASA por meio do sistema SCA® (Sperm Class Analyzer ? Microptic Automatic Diagnostic Systems, Barcelona, Espanha). A técnica de Percoll (Sigma Chemical, St. Louis, USA) tradicional consistiu em utilizar 2 mL de gradiente (90/45%) e centrifugar a uma força de 700 x g por 10 minutos, seguida de outra centrifugação a 200 x g por 5 minutos. As técnicas de MP consistiram em utilizar um volume de 800 ?L de gradiente (90/45%) que foram submetidos aos seguintes tempos e forças de centrifugação: I) duas centrifugações de 5000 x g por 5 minutos; II) duas centrifugações de 2500 x g por 5 minutos; III) duas centrifugações de1250 x g por 5 minutos; IV) 700 x g por 10 minutos, seguidas de outra centrifugação a 200 x g por 5 minutos. No fim dos tratamentos (pós protocolos = 0 h), alíquotas foram retiradas para avaliação da integridade de MP e status da capacitação espermática pela coloração de clortetraciclina (Sigma Chemical, St. Louis, USA). Posteriormente, as amostras de todos os tratamentos foram incubadas a 37 °C, 1 h, 2 h e 3 h e os mesmos parâmetros foram avaliados. As variáveis foram submetidas às análises de ANOVA ou teste de Kruskal-Wallis dependendo da normalidade, e testes de Tukey e Fisher-LSD (P < 0,05). Não houve diferença (P > 0,05) entre os tratamentos durante a avaliação do status da capacitação espermática e da integridade de MP. A taxa de capacitação foi maior (P < 0.05) em 3 h de incubação (28,6 ± 2,5%) quando comparado com 0 h (23,3 ± 1,7%) e 1 h (23,8 ± 1,4%), independente do tratamento utilizado. Não houve diferença (P > 0,05) em relação à integridade de MP entre os tratamentos a 0 h. Independente do tratamento utilizado, as taxas de MP íntegra e lesada, respectivamente, foram semelhantes (P > 0,05) no PD (16,4 ± 2,0% vs. 84,0 ± 2,0%; média de todos os tratamentos) e no momento 0 h (19,0 ± 2,9% vs. 81,1 ± 2,9%; média de todos os tratamentos). Quando foram analisadas somente células íntegras, os valores no PD foram maiores (P < 0,05) do que todos os intervalos de incubação, enquanto que todos os intervalos de incubação apresentaram taxas menores que os valores encontrados no momento 0 h (P < 0,05). Em conclusão, as técnicas de MP podem ser utilizadas como uma alternativa ideal ao método tradicional de Percoll durante a seleção espermática de sêmen congelado de carneiros, diminuindo custos e tempo de preparação espermática, sem que haja danos aos espermatozoides.
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