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Registro Completo |
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Biblioteca(s): |
Embrapa Gado de Leite. |
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Data corrente: |
14/01/2020 |
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Data da última atualização: |
06/02/2024 |
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Tipo da produção científica: |
Artigo em Periódico Indexado |
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Autoria: |
FREITAS, V. J. F.; CAMPELO, I. S.; SILVA, M. M. A. S.; CAVALCANTI, C. M.; TEIXEIRA, D. I. A.; CAMARGO, L. S. de A.; MELO L. M.; RÁDIS-BAPTISTA, G. |
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Afiliação: |
Vicente J. F. Freitas; Iana S. Campelo; Mirelly M .A. S. Silva; Camila M. Cavalcanti; Dárcio I. A. Teixeira; LUIZ SERGIO DE ALMEIDA CAMARGO, CNPGL; Luciana M. Melo; Gandhi Rádis-Baptista. |
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Título: |
Disulphide-less crotamine is effective for formation of DNA-peptide complex but is unable to improve bovine embryo transfection. |
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Ano de publicação: |
2020 |
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Fonte/Imprenta: |
Zygote, v. 28, n. 1, p. 72-79, 2020. |
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DOI: |
https://doi.org/10.1017/s0967199419000716 |
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Idioma: |
Inglês |
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Conteúdo: |
This study aimed to investigate the ability of disulphide-less crotamine (dLCr) to complex DNA and to evaluate whether the DNA-dLCr complex is capable of improving transfection in bovine embryos. Three experiments were performed to: (i) evaluate the formation and stability of the DNA-dLCr complex; (ii) assess the dLCr embryotoxicity by exposure of bovine embryos to dLCr; and (iii) assess the efficiency of bovine embryo transfection after microinjection of the DNA-dLCr complex or green fluorescent protein (GFP) plasmid alone (control). DNA complexation by dLCr after 30 min of incubation at 1:100 and 1:50 proportions presented higher efficiency (P < 0.05) than the two controls: native crotamine (NCr) 1:10 and lipofectamine. There was no difference between DNA-dLCr 1:25 and the controls. The DNA-dLCr complexation was evaluated at different proportions and times. In all, at least half of maximum complexation was achieved within the initial 30 min. No embryotoxicity of dLCr was verified after exposure of in vitro fertilized embryos to different concentrations of the peptide. The effectiveness of dLCr to improve exogenous gene expression was evaluated by microinjection of the DNA-dLCr complex into in vitro fertilized zygotes, followed by verification of both embryo development and GFP expression. From embryos microinjected with DNA only, 4.6% and 2.8% expressed the GFP transgene at day 5 and day 7, respectively. The DNA-dLCr complex did not increase the number of GFP-positive embryos. In conclusion, dLCr forms a complex with DNA and its application in in vitro culture is possible. However, the dLCr peptide sequence should be redesigned to improve GFP expression. MenosThis study aimed to investigate the ability of disulphide-less crotamine (dLCr) to complex DNA and to evaluate whether the DNA-dLCr complex is capable of improving transfection in bovine embryos. Three experiments were performed to: (i) evaluate the formation and stability of the DNA-dLCr complex; (ii) assess the dLCr embryotoxicity by exposure of bovine embryos to dLCr; and (iii) assess the efficiency of bovine embryo transfection after microinjection of the DNA-dLCr complex or green fluorescent protein (GFP) plasmid alone (control). DNA complexation by dLCr after 30 min of incubation at 1:100 and 1:50 proportions presented higher efficiency (P < 0.05) than the two controls: native crotamine (NCr) 1:10 and lipofectamine. There was no difference between DNA-dLCr 1:25 and the controls. The DNA-dLCr complexation was evaluated at different proportions and times. In all, at least half of maximum complexation was achieved within the initial 30 min. No embryotoxicity of dLCr was verified after exposure of in vitro fertilized embryos to different concentrations of the peptide. The effectiveness of dLCr to improve exogenous gene expression was evaluated by microinjection of the DNA-dLCr complex into in vitro fertilized zygotes, followed by verification of both embryo development and GFP expression. From embryos microinjected with DNA only, 4.6% and 2.8% expressed the GFP transgene at day 5 and day 7, respectively. The DNA-dLCr complex did not increase the number of GFP-positive embr... Mostrar Tudo |
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Palavras-Chave: |
Gene delivery; Microinjection; Nucleic acid-peptide complex. |
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Thesaurus Nal: |
Embryotoxicity; Transgenesis. |
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Categoria do assunto: |
-- |
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Marc: |
LEADER 02565naa a2200277 a 4500
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245 $aDisulphide-less crotamine is effective for formation of DNA-peptide complex but is unable to improve bovine embryo transfection.$h[electronic resource]
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520 $aThis study aimed to investigate the ability of disulphide-less crotamine (dLCr) to complex DNA and to evaluate whether the DNA-dLCr complex is capable of improving transfection in bovine embryos. Three experiments were performed to: (i) evaluate the formation and stability of the DNA-dLCr complex; (ii) assess the dLCr embryotoxicity by exposure of bovine embryos to dLCr; and (iii) assess the efficiency of bovine embryo transfection after microinjection of the DNA-dLCr complex or green fluorescent protein (GFP) plasmid alone (control). DNA complexation by dLCr after 30 min of incubation at 1:100 and 1:50 proportions presented higher efficiency (P < 0.05) than the two controls: native crotamine (NCr) 1:10 and lipofectamine. There was no difference between DNA-dLCr 1:25 and the controls. The DNA-dLCr complexation was evaluated at different proportions and times. In all, at least half of maximum complexation was achieved within the initial 30 min. No embryotoxicity of dLCr was verified after exposure of in vitro fertilized embryos to different concentrations of the peptide. The effectiveness of dLCr to improve exogenous gene expression was evaluated by microinjection of the DNA-dLCr complex into in vitro fertilized zygotes, followed by verification of both embryo development and GFP expression. From embryos microinjected with DNA only, 4.6% and 2.8% expressed the GFP transgene at day 5 and day 7, respectively. The DNA-dLCr complex did not increase the number of GFP-positive embryos. In conclusion, dLCr forms a complex with DNA and its application in in vitro culture is possible. However, the dLCr peptide sequence should be redesigned to improve GFP expression.
650 $aEmbryotoxicity
650 $aTransgenesis
653 $aGene delivery
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700 1 $aCAMPELO, I. S.
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700 1 $aCAMARGO, L. S. de A.
700 1 $aMELO L. M.
700 1 $aRÁDIS-BAPTISTA, G.
773 $tZygote$gv. 28, n. 1, p. 72-79, 2020.
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Registro original: |
Embrapa Gado de Leite (CNPGL) |
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Biblioteca |
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| Registros recuperados : 17 | |
| 5. |  | LOUREIRO, M. de F.; KASCHUK, G.; ALBERTON, O.; HUNGRIA, M.; CORREA, F. Diferenças qualitativas na microbiota do solo relacionadas ao manejo do solo e das culturas. In: REUNIÃO BRASILEIRA DE FERTILIDADE DO SOLO E NUTRIÇÃO DE PLANTAS, 25.; REUNIÃO BRASILEIRA SOBRE MICORRIZAS, 9.; SIMPÓSIO BRASILEIRO DE MICROBIOLOGIA DO SOLO, 7.; REUNIÃO BRASILEIRA DE BIOLOGIA DO SOLO, 4., 2002, Rio de Janeiro. Fertbio 2002: agricultura: bases ecológicas para o desenvolvimento social e econômico sustentado. Rio de Janeiro, 2002. p. 172. Guia do congressista e em CD-ROM.| Biblioteca(s): Embrapa Soja. |
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| 7. | | LOUREIRO, M, de F.; MARIANOWSKI, T.; NICOLÁS, M. F.; ELIAS NETO, N.; HUNGRIA, M. Uso de marcadores moleculares para la identificación de especies de Discolobium nativas del Pantanal Matogrosense de Brasil. In: REUNIÓN LATINOAMERICANA DE RHIZOBIOLOGIA, 21.; CONGRESO NACIONAL DE LA FIJACIÓN BIOLÓGICA DE NITRÓGENO, 6., 2002. Cocoyoc. Memorias... [S.l.]: Centro de Investigación sobre Fijación de Nitrógeno; Universidade Nacional Autónoma de México, 2002. p. 91.| Tipo: Resumo em Anais de Congresso |
| Biblioteca(s): Embrapa Soja. |
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| 8. | | ELIAS NETO, N.; LOUREIRO, M. de F.; NICOLÁS, M. F.; MARIANOWSKI, T.; TORRES, A. R.; HUNGRIA, M. Identification of Discolobium species indigenous to the Brazilian Pantanal ecosystem by microsatellite (SSRs) markers. Semina, Ciência Agrárias, Londrina, v. 33, Supl. 1, p. 3017-3022, 2012.| Tipo: Artigo em Periódico Indexado | Circulação/Nível: B - 1 |
| Biblioteca(s): Embrapa Soja. |
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| 9. | | CRISPINO, C. C.; FRANCHINI, J. C.; MORAES, J. Z.; SIBALDELLE, R. N. R.; LOUREIRO, M. de F.; SANTOS, E. N. dos; CAMPO, R. J.; HUNGRIA, M. Adubação nitrogenada na cultura da soja. Londrina: Embrapa Soja, 2001. 6 p. (Embrapa Soja. Comunicado Técnico, 75).| Biblioteca(s): Embrapa Soja. |
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| 10. | | HUNGRIA, M.; CAMPO, R. J.; CHUEIRE, L. M. O.; MENDES, I. C.; FRANCHINI, J. C.; ANDRADE, D. S.; NICOLÁS, M. F.; GRANGE, L.; LOUREIRO, M. de F. Aspectos agronômicos da fixação simbiótica do nitrogênio no Brazil. In: REUNIÓN LATINOAMERICANA DE RHIZOBIOLOGIA, 21.; CONGRESO NACIONAL DE LA FIJACIÓN BIOLÓGICA DE NITRÓGENO, 6., 2002. Cocoyoc. Memorias... [S.l.]: Centro de Investigación sobre Fijación de Nitrógeno; Universidade Nacional Autónoma de México, 2002. p. 53.| Tipo: Resumo em Anais de Congresso |
| Biblioteca(s): Embrapa Soja. |
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| 11. | | LOUREIRO, M. de F.; HUNGRIA, M.; SILVA NETO, J. L. da; CHUEIRE, L. M. de O.; SAMPAIO, M. J. A.; FRANCO, A. A. Habilidade fotossintética e fixadora de N2 de isolados do caule e das raízes de Aeschynomene fluminensis. In: SIMPÓSIO BRASILEIRO SOBRE MICROBIOLOGIA DO SOLO, 3.; REUNIÃO DE LABORATÓRIOS PARA RECOMENDAÇÃO DE ESTIRPES DE RHIZOBIUM E BRADYRHIZOBIUM, 6., 1994, Londrina. Resumos... Londrina: IAPAR, 1994. Não paginado. Trabalho n. 69.| Biblioteca(s): Embrapa Soja. |
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| 12. | | HUNGRIA, M.; CAMPO, R. J.; CRISPINO, C. C.; FRANCHINI, J. C.; SIBALDELLI, R. N. R.; MORAES, J. Z.; SANTOS, E. N. dos; LOUREIRO, M de F. Identificação de estirpes de Bradyrhizobium japonicum (B. elkanii) mais eficientes e competitivas para a cultura da soja e avaliação de respostas à inoculação (04.2001.338.01). In: HOFFMANN-CAMPO, C .B.; SARAIVA, O. F. (Org.). Resultados de pesquisa da Embrapa Soja - 2001: microbiologia de solos. Londrina: Embrapa Soja, 2002. p. 16-20. (Embrapa Soja. Documentos, 197).| Biblioteca(s): Embrapa Soja. |
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| 13. | | HUNGRIA, M.; CAMPO, R. J.; FRANCHINI, J. C.; CHUEIRE, L. M. O.; MENDES, I. C.; ANDRADE, D. S.; COLOZZI FILHO, A.; BALOTA, E. L.; LOUREIRO, M. de F. Microbial quantitative and qualitative changes in soils under different crops and tillage management systems in Brazil. In: INTERNATIONAL TECHNICAL WORKSHOP ON BIOLOGICAL MANAGEMENT OF SOIL ECOSYSTEMS FOR SUSTAINABLE AGRICULTURE, 2002, Londrina. Program, abstracts and related documents. Londrina: Embrapa Soybean: FAO, 2002. p. 76. (Embrapa Soja. Documentos, 182). Organizado por George G. Brown, Mariangela Hungria, Lenita Jacob Oliveira, Sally Bunning, Adriana Montañez.| Biblioteca(s): Embrapa Cerrados; Embrapa Soja. |
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| 14. | | HUNGRIA, M.; CAMPO, R. J.; CHUEIRE, L. M. O.; BANGEL, E. V.; COLOZZI-FILHO, A.; GRANGE, L.; KASCHUK, G.; LOUREIRO, M. de F. Uso de marcadores moleculares para maximizar a contribuição dos rizóbios fixadores de nitrogênio e dos fungos micorrízicos arbusculares: caracterização da diversidade sob diferentes manejos agrícolas e avaliação das respostas à inoculação. In: SARAIVA, O. F. (Org.). Resultados de pesquisa da Embrapa Soja - 2003: microbiologia de solos. Londrina: Embrapa Soja, 2004. p. 59-62. (Embrapa Soja. Documentos, 243).| Biblioteca(s): Embrapa Soja. |
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| 15. | | HUNGRIA, M.; CAMPO, R. J.; CHUEIRE, L. M. O.; BANGEL, E. V.; GALLI-TERASAWA, L. V.; GLIENKE-BLANCO, C.; MENDES, I. C.; GERMANO, M. G.; MACIEL, C. D.; LOUREIRO, M de F. Identificação de estirpes de Bradyrhizobium japonicum/B. elkanii mais eficientes e competitivas para a cultura da soja e avaliação das respostas à reinoculação em áreas com populações estabelecidas distintas de Bradyrhizobium (06.04.01.338-01). In: SARAIVA, O. F. (Org.). Resultados de pesquisa da Embrapa Soja - 2003: microbiologia de solos. Londrina: Embrapa Soja, 2004. p. 7-16. (Embrapa Soja. Documentos, 243).| Biblioteca(s): Embrapa Soja. |
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| 16. | | HUNGRIA, M.; MENNA, P.; BANGEL, E. V.; BARCELLOS, F. G.; GRANGE, L.; PINTO, F. G. S.; RIBEIRO, R. A.; BATISTA, J. S. S.; BINDE, D. R.; PLOTEGHER, F.; KASCHUK, G.; ALBERTON, O.; LOUREIRO, M. de F.; CAMPO, R. J.; CHUEIRE, L. M. O. Identificação das metodologias mais adequadas para a análise da diversidade genética intra e interespecífica em rizóbios. In: RELARE, 14., 2008, Bonito. Programa e resumos. [S.l.]: Embrapa Agropecuária Oeste, 2008. p. 12.| Tipo: Resumo em Anais de Congresso |
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| 17. | | HUNGRIA, M.; MENNA, P.; BANGEL, E. V.; BARCELLOS, F. G.; GRANGE, L.; PINTO, F. G. S.; RIBEIRO, R. A.; BATISTA, J. S. S.; BINDE, D. R.; PLOTEGHER, F.; KASCHUK, G.; ALBERTON, O.; LOUREIRO, M. de F.; CAMPO, R. J.; CHUEIRE, L. M. O. Identificação das metodologias mais adequadas para a análise da diversidade genética intra e interespecífica em rizóbios. In: REUNIÃO DA REDE DE LABORATÓRIOS PARA RECOMENDAÇÃO, PADRONIZAÇÃO E DIFUSÃO DE TECNOLOGIA DE INOCULANTES MICROBIOLÓGICOS DE INTERESSE AGRÍCOLA, 14., 2008, Bonito. Anais... Dourados: Embrapa Agropecuária Oeste, 2010. p. 37-38. RELARE. Organizado por Fábio M. Mercante, Oscar F. de Lima Filho, Suelma P. da S. Bonatto.| Tipo: Resumo em Anais de Congresso |
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