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Biblioteca(s): | Embrapa Milho e Sorgo.
Tipo da produção científica: | Orientação de Tese de Pós-Graduação
Data corrente: | 27/11/2017
Data da última atualização: | 07/02/2018
Autoria: | OLIVEIRA, J. C. M. D. de.
Afiliação: | João Carlos Maia Dornelas de Oliveira.
Título: | Potencial biotecnológico de actinomicetos para produção de enzimas hidrolíticas e biocontrole in vitro de Pantoea ananatis, agente causal da mancha-branca do milho.
Ano de publicação: | 2017
Fonte/Imprenta: | 2017.
Páginas: | 94 f.
Idioma: | Português

Notas:

Dissertação (Mestrado em Ciências Agrárias) - Universidade Federal de São João del-Rei, Sete Lagoas, 2017.
Orientador: Ivanildo Evódio Marriel. 
Coorientador: Ubiraci Gomes de Paula Lana.

Conteúdo: | A mancha-branca do milho, causada pela bactéria Pantoea ananatis, é uma doença economicamente importante em todas as regiões produtoras do Brasil. Nas últimas décadas, a severidade de doenças foliares nesta cultura se intensificou, e o uso de agroquímicos é a principal medida de controle da doença. Entretanto, o uso destes produtos na agricultura apresenta algumas limitações quanto à eficiência, custos econômicos e ambientais. Assim, a busca de alternativas, como controle biológico, torna-se de grande interesse dentro dos preceitos de práticas agrícolas sustentáveis. Actinomicetos são fontes de diversos metabólitos bioativos com atividade antagonista vários micro-organismos. O objetivo deste trabalho foi selecionar isolados de actinomicetos com potencial para o biocontrole de P. ananatis e produção de enzimas hidrolíticas depositados na Coleção de Micro-organismos Multifuncionais e Fitopatógenos da Embrapa Milho e Sorgo. Após testes de pureza das culturas, a atividade antagonista dos isolados de actinomicetos contra a bactéria foi realizada utilizando a técnica de sobrecamada na presença e ausência de luz UV e confirmada pela formação de halos de inibição. Os isolados com atividade antagonista foram cultivados em meio líquido e os extratos de cultura foram utilizados para obter o perfil de antibiótico utilizando cromatografia líquida de alta eficiência acoplada a espectrofotômetro de massas. Os isolados de actinomicetos foram caracterizados morfologicamente com base no padrão de coloração do micélio aéreo e vegetativo bem como pela morfologia da cadeia de esporos. Além disso, a caracterização molecular foi realizada por meio do sequenciamento parcial do gene 16S rRNA. A produção de enzimas hidrolíticas amilase, celulase e lípase foi estimada em meio sólido específico pela determinação do índice enzimático (IE). Os resultados mostraram alta variabilidade morfológica e molecular entre os isolados de actinomicetos. A análise molecular revelou a presença de três gêneros: Streptomyces (82,6%), Amycolatopsis (10,1%) e Kitasatospora (7,3%) entre os isolados testados. O IE variou de 0 a 6,56 revelando o alto potencial biotecnológico de alguns isolados. Os isolados AMSJ 45 (S. curacoi) e LD 6 (S. hygroscopicus) apresentaram os maiores valores de amilase, enquanto que os isolados ARLJ 48 (S. chiangmaiensis) e ARLJ 53 (S. cyslabdanicus) para celulase e LD 6 (S. hygroscopicus) para lipase. Em relação à atividade antagônica, os isolados A 470 (S. pseudovenezuelae) A 432 (S. novaecaesareae) e KACP 35 (S. laculatispora) foram os mais eficientes para inibir o crescimento de P. ananatis. A análise do perfil antibiótico indicou fortemente a produção de neomicina que pode estar associada a atividade antagonista do isolado A470 o que foi confirmado pela inibição do crescimento da bactéria utilizando o teste de difusão de disco com este antibiótico. Os resultados apresentados neste estudo mostraram alta variabilidade bioquímica e genética entre os actinomicetos com alto potencial de uso em processos industriais e a identificação de estirpes que podem ser utilizadas no biocontrole de P. ananatis.
Palavras-Chave: | Biocontrole; Enzima hidrolítica.
Thesagro: | Actinomiceto; Biotecnologia.
Categoria do assunto: | S Ciências Biológicas
URL: | http://ainfo.cnptia.embrapa.br/digital/bitstream/item/167523/1/Ivanildo-Dissertacao-Joao-Carlos.pdf
Registro original: | Embrapa Milho e Sorgo (CNPMS)
Exemplares: | CNPMS - (27970-1) - UPA - TS - DD -  -  -  - DIS