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Registro Completo |
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Biblioteca(s): |
Embrapa Gado de Leite. |
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Data corrente: |
14/01/2020 |
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Data da última atualização: |
06/02/2024 |
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Tipo da produção científica: |
Artigo em Periódico Indexado |
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Autoria: |
FREITAS, V. J. F.; CAMPELO, I. S.; SILVA, M. M. A. S.; CAVALCANTI, C. M.; TEIXEIRA, D. I. A.; CAMARGO, L. S. de A.; MELO L. M.; RÁDIS-BAPTISTA, G. |
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Afiliação: |
Vicente J. F. Freitas; Iana S. Campelo; Mirelly M .A. S. Silva; Camila M. Cavalcanti; Dárcio I. A. Teixeira; LUIZ SERGIO DE ALMEIDA CAMARGO, CNPGL; Luciana M. Melo; Gandhi Rádis-Baptista. |
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Título: |
Disulphide-less crotamine is effective for formation of DNA-peptide complex but is unable to improve bovine embryo transfection. |
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Ano de publicação: |
2020 |
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Fonte/Imprenta: |
Zygote, v. 28, n. 1, p. 72-79, 2020. |
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DOI: |
https://doi.org/10.1017/s0967199419000716 |
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Idioma: |
Inglês |
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Conteúdo: |
This study aimed to investigate the ability of disulphide-less crotamine (dLCr) to complex DNA and to evaluate whether the DNA-dLCr complex is capable of improving transfection in bovine embryos. Three experiments were performed to: (i) evaluate the formation and stability of the DNA-dLCr complex; (ii) assess the dLCr embryotoxicity by exposure of bovine embryos to dLCr; and (iii) assess the efficiency of bovine embryo transfection after microinjection of the DNA-dLCr complex or green fluorescent protein (GFP) plasmid alone (control). DNA complexation by dLCr after 30 min of incubation at 1:100 and 1:50 proportions presented higher efficiency (P < 0.05) than the two controls: native crotamine (NCr) 1:10 and lipofectamine. There was no difference between DNA-dLCr 1:25 and the controls. The DNA-dLCr complexation was evaluated at different proportions and times. In all, at least half of maximum complexation was achieved within the initial 30 min. No embryotoxicity of dLCr was verified after exposure of in vitro fertilized embryos to different concentrations of the peptide. The effectiveness of dLCr to improve exogenous gene expression was evaluated by microinjection of the DNA-dLCr complex into in vitro fertilized zygotes, followed by verification of both embryo development and GFP expression. From embryos microinjected with DNA only, 4.6% and 2.8% expressed the GFP transgene at day 5 and day 7, respectively. The DNA-dLCr complex did not increase the number of GFP-positive embryos. In conclusion, dLCr forms a complex with DNA and its application in in vitro culture is possible. However, the dLCr peptide sequence should be redesigned to improve GFP expression. MenosThis study aimed to investigate the ability of disulphide-less crotamine (dLCr) to complex DNA and to evaluate whether the DNA-dLCr complex is capable of improving transfection in bovine embryos. Three experiments were performed to: (i) evaluate the formation and stability of the DNA-dLCr complex; (ii) assess the dLCr embryotoxicity by exposure of bovine embryos to dLCr; and (iii) assess the efficiency of bovine embryo transfection after microinjection of the DNA-dLCr complex or green fluorescent protein (GFP) plasmid alone (control). DNA complexation by dLCr after 30 min of incubation at 1:100 and 1:50 proportions presented higher efficiency (P < 0.05) than the two controls: native crotamine (NCr) 1:10 and lipofectamine. There was no difference between DNA-dLCr 1:25 and the controls. The DNA-dLCr complexation was evaluated at different proportions and times. In all, at least half of maximum complexation was achieved within the initial 30 min. No embryotoxicity of dLCr was verified after exposure of in vitro fertilized embryos to different concentrations of the peptide. The effectiveness of dLCr to improve exogenous gene expression was evaluated by microinjection of the DNA-dLCr complex into in vitro fertilized zygotes, followed by verification of both embryo development and GFP expression. From embryos microinjected with DNA only, 4.6% and 2.8% expressed the GFP transgene at day 5 and day 7, respectively. The DNA-dLCr complex did not increase the number of GFP-positive embr... Mostrar Tudo |
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Palavras-Chave: |
Gene delivery; Microinjection; Nucleic acid-peptide complex. |
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Thesaurus Nal: |
Embryotoxicity; Transgenesis. |
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Categoria do assunto: |
-- |
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Marc: |
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Registro original: |
Embrapa Gado de Leite (CNPGL) |
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Biblioteca |
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Tipo/Formato |
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| Registros recuperados : 12 | |
| 1. |  | ECKSTEIN, C.; RODRIGUES, R. O.; LOPES, L. B. Ocorrência de aglutininas anti- leptospira spp. em fêmeas bovinas abatidas em abatedouro frigorífico em colíder, Mato Grosso. IN: Semana Acadêmica - Sinop/2014, 1., 2014,Sinop, MT. Resumos... I Semana Acadêmica - Sinop/2014, III Jornada Científica da Embrapa Agrossilvipastoril, Seminário Integrador PIBID e Tutoria, Mostra de Ensino e Extensão. Brasília, DF : Embrapa, 2014. p. 138 1| Tipo: Resumo em Anais de Congresso |
| Biblioteca(s): Embrapa Agrossilvipastoril. |
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| 2. | | MOURA, E. A. de; CHAGAS, P. C.; RODRIGUES, R. O.; CHAGAS, E. A. Estudo fenológico e qualidade de produção de ata em cultivo comercial nas condições de cerrado de Roraima. In: ENCONTRO DO PROGRAMA DE INICIAÇÃO CIENTÍFICA, 14., 2015, Boa Vista, RR. Anais... Boa Vista, RR: UFRR, 2015.| Tipo: Artigo em Anais de Congresso |
| Biblioteca(s): Embrapa Roraima. |
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| 4. | | RODRIGUES, R. O.; HERRMANN, G. P.; HEINEMANN, M. B.; LAGE, A. P.; LOPES, L. B.; MOREIRA, E. C. Comparação entre a imunidade induzida em bovinos vacinados com bacterinas polivalentes comerciais e uma monovalente experimental. Pesquisa Veterinária Brasileira, Rio de Janeiro, v. 31, n. 1, p. 10-16, 2011.| Tipo: Artigo em Periódico Indexado | Circulação/Nível: B - 1 |
| Biblioteca(s): Embrapa Agrossilvipastoril. |
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| 6. | | MAYER, F. Q.; REIS, E. M.; BEZERRA, A. V. A.; RODRIGUES, R. O.; MICHEL, T.; CERVA, C.; BERTAGNOLLI, A. C. Nasal swab real-time PCR is not suitable for in vivo diagnosis of bovine tuberculosis. Pesquisa Veterinária Brasileira, Rio de Janeiro, v. 37, n. 6, p. 49-554, jun. 2017. Título em português: A PCR em tempo real de swab nasal não é adequada para o diagnóstico in vivo de tuberculose bovina.| Biblioteca(s): Embrapa Unidades Centrais. |
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| 8. | | CARVALHO, D.; TEJOKSKI, T. M.; JAENISCH, F. R. F.; RODRIGUES, R. O.; BRITO, K. C. T.; BRITO, B. G. Susceptibilidade de duas linhagens comerciais de frango de corte no desenvolvimento de dermatite necrótica e possível relação dos genes iss e iutA de Escherichia coli com a reprodução experimental da doença. Pesquisa Veterinária Brasileira, Brasília, DF, v. 37, n. 12, p. 1395-1400, dezembro. 2017. Título em inglês: Susceptibility of two commercial lineages of broilers in the development of necrotic dermatitis and relationship of iss and iutA genes from Escherichia coli with the experimental reproduction of the disease.| Tipo: Artigo em Periódico Indexado | Circulação/Nível: A - 2 |
| Biblioteca(s): Embrapa Suínos e Aves; Embrapa Unidades Centrais. |
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| 9. | | SANTOS, R. dos; OLIVEIRA, J. A. de; LOPES, F.; CASTRO, B. G. de; RODRIGUES, R. O.; NICOLINO, R. R.; LOPES, L. B. Prevalence of anti-Leptospira spp. antibodies in cows in the municipalities of Nova Guarita and Nova Santa Helena, Mato Grosso State, Brazil. Medicina Veterinária, v. 12, n. 4, p. 276-282, 2018.| Tipo: Artigo em Periódico Indexado | Circulação/Nível: B - 2 |
| Biblioteca(s): Embrapa Agrossilvipastoril. |
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| 10. | | SANTOS, R. dos; OLIVEIRA, J. A. de; LOPES, F.; CASTRO, B. G. de; RODRIGUES, R. O.; NICOLINO, R. R.; LOPES, L. B. Prevalência de anticorpos anti-Leptospira spp. em vacas nos municípios de Nova Guarita e Nova Santa Helena, Mato Grosso. In: FARIAS NETO, A. L. de; NASCIMENTO, A. F. do; ROSSONI, A. L.; MAGALHÃES, C. A. de S.; ITUASSU, D. R.; HOOGERHEIDE, E. S. S.; IKEDA, F. S.; FERNANDES JUNIOR, F.; FARIA, G. R.; ISERNHAGEN, I.; VENDRUSCULO, L. G.; MORALES, M. M.; CARNEVALLI, R. A. (Ed.). Embrapa Agrossilvipastoril: primeiras contribuições para o desenvolvimento de uma agropecuária sustentável. Brasília, DF: Embrapa, 2019. pt. 5, cap. 2, p. 371-374.| Tipo: Capítulo em Livro Técnico-Científico |
| Biblioteca(s): Embrapa Agrossilvipastoril. |
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| 11. | | ROMANELLI, P. R.; MINHO, A. P.; MATOS, A. M. R. N. de; CAVALCANTE, A. C. R.; FERREIRA, F. P.; KOHEK JUNIOR, I.; MAREZE, M.; FREIRE, R. L.; RODRIGUES, R. O.; NAVARRO, I. T. Avaliação soroepidemiológica do Toxoplasma gondii e Neospora caninum em ovinos do estado do Rio Grande do Sul. In: CONGRESSO DA SOCIEDADE BRASILEIRA DE PARASITOLOGIA, 24.; CONGRESSO LATINOAMERICANO DE PARASITOLOGIA, 23., 2015, Salvador. Parasitologia: passado, presente, futuro: resumos dos pôsteres. Goiânia: SBP: FLAP, 2015. p. 202.| Tipo: Resumo em Anais de Congresso |
| Biblioteca(s): Embrapa Pecuária Sul. |
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| 12. | | ROMANELLI, P. R.; MATOS, A. M. R. N. de; PINTO-FERREIRA, F.; CALDART, E. T.; MAREZE, M.; MATOS, R. L. N.; FREIRE, R. L.; MITSUKA-BREGANÓ, R.; HEADLEY, S. A.; MINHO, A. P.; CAVALCANTE, A. C. R.; OKANO, W.; KOHEK JÚNIOR, I.; RODRIGUES, R. O.; NAVARRO, I. T. Seroepidemiology of ovine toxoplasmosis and neosporosis in breeding rams from Rio Grande do Sul, Brazil. Transboundary and Emerging Diseases, v. 67, suppl. 2, p. 208-211, jul. 2020.| Tipo: Artigo em Periódico Indexado | Circulação/Nível: A - 2 |
| Biblioteca(s): Embrapa Pecuária Sudeste. |
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| Registros recuperados : 12 | |
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