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Registro Completo |
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Biblioteca(s): |
Embrapa Gado de Leite. |
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Data corrente: |
14/01/2020 |
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Data da última atualização: |
06/02/2024 |
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Tipo da produção científica: |
Artigo em Periódico Indexado |
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Autoria: |
FREITAS, V. J. F.; CAMPELO, I. S.; SILVA, M. M. A. S.; CAVALCANTI, C. M.; TEIXEIRA, D. I. A.; CAMARGO, L. S. de A.; MELO L. M.; RÁDIS-BAPTISTA, G. |
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Afiliação: |
Vicente J. F. Freitas; Iana S. Campelo; Mirelly M .A. S. Silva; Camila M. Cavalcanti; Dárcio I. A. Teixeira; LUIZ SERGIO DE ALMEIDA CAMARGO, CNPGL; Luciana M. Melo; Gandhi Rádis-Baptista. |
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Título: |
Disulphide-less crotamine is effective for formation of DNA-peptide complex but is unable to improve bovine embryo transfection. |
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Ano de publicação: |
2020 |
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Fonte/Imprenta: |
Zygote, v. 28, n. 1, p. 72-79, 2020. |
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DOI: |
https://doi.org/10.1017/s0967199419000716 |
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Idioma: |
Inglês |
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Conteúdo: |
This study aimed to investigate the ability of disulphide-less crotamine (dLCr) to complex DNA and to evaluate whether the DNA-dLCr complex is capable of improving transfection in bovine embryos. Three experiments were performed to: (i) evaluate the formation and stability of the DNA-dLCr complex; (ii) assess the dLCr embryotoxicity by exposure of bovine embryos to dLCr; and (iii) assess the efficiency of bovine embryo transfection after microinjection of the DNA-dLCr complex or green fluorescent protein (GFP) plasmid alone (control). DNA complexation by dLCr after 30 min of incubation at 1:100 and 1:50 proportions presented higher efficiency (P < 0.05) than the two controls: native crotamine (NCr) 1:10 and lipofectamine. There was no difference between DNA-dLCr 1:25 and the controls. The DNA-dLCr complexation was evaluated at different proportions and times. In all, at least half of maximum complexation was achieved within the initial 30 min. No embryotoxicity of dLCr was verified after exposure of in vitro fertilized embryos to different concentrations of the peptide. The effectiveness of dLCr to improve exogenous gene expression was evaluated by microinjection of the DNA-dLCr complex into in vitro fertilized zygotes, followed by verification of both embryo development and GFP expression. From embryos microinjected with DNA only, 4.6% and 2.8% expressed the GFP transgene at day 5 and day 7, respectively. The DNA-dLCr complex did not increase the number of GFP-positive embryos. In conclusion, dLCr forms a complex with DNA and its application in in vitro culture is possible. However, the dLCr peptide sequence should be redesigned to improve GFP expression. MenosThis study aimed to investigate the ability of disulphide-less crotamine (dLCr) to complex DNA and to evaluate whether the DNA-dLCr complex is capable of improving transfection in bovine embryos. Three experiments were performed to: (i) evaluate the formation and stability of the DNA-dLCr complex; (ii) assess the dLCr embryotoxicity by exposure of bovine embryos to dLCr; and (iii) assess the efficiency of bovine embryo transfection after microinjection of the DNA-dLCr complex or green fluorescent protein (GFP) plasmid alone (control). DNA complexation by dLCr after 30 min of incubation at 1:100 and 1:50 proportions presented higher efficiency (P < 0.05) than the two controls: native crotamine (NCr) 1:10 and lipofectamine. There was no difference between DNA-dLCr 1:25 and the controls. The DNA-dLCr complexation was evaluated at different proportions and times. In all, at least half of maximum complexation was achieved within the initial 30 min. No embryotoxicity of dLCr was verified after exposure of in vitro fertilized embryos to different concentrations of the peptide. The effectiveness of dLCr to improve exogenous gene expression was evaluated by microinjection of the DNA-dLCr complex into in vitro fertilized zygotes, followed by verification of both embryo development and GFP expression. From embryos microinjected with DNA only, 4.6% and 2.8% expressed the GFP transgene at day 5 and day 7, respectively. The DNA-dLCr complex did not increase the number of GFP-positive embr... Mostrar Tudo |
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Palavras-Chave: |
Gene delivery; Microinjection; Nucleic acid-peptide complex. |
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Thesaurus Nal: |
Embryotoxicity; Transgenesis. |
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Categoria do assunto: |
-- |
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Marc: |
LEADER 02565naa a2200277 a 4500
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520 $aThis study aimed to investigate the ability of disulphide-less crotamine (dLCr) to complex DNA and to evaluate whether the DNA-dLCr complex is capable of improving transfection in bovine embryos. Three experiments were performed to: (i) evaluate the formation and stability of the DNA-dLCr complex; (ii) assess the dLCr embryotoxicity by exposure of bovine embryos to dLCr; and (iii) assess the efficiency of bovine embryo transfection after microinjection of the DNA-dLCr complex or green fluorescent protein (GFP) plasmid alone (control). DNA complexation by dLCr after 30 min of incubation at 1:100 and 1:50 proportions presented higher efficiency (P < 0.05) than the two controls: native crotamine (NCr) 1:10 and lipofectamine. There was no difference between DNA-dLCr 1:25 and the controls. The DNA-dLCr complexation was evaluated at different proportions and times. In all, at least half of maximum complexation was achieved within the initial 30 min. No embryotoxicity of dLCr was verified after exposure of in vitro fertilized embryos to different concentrations of the peptide. The effectiveness of dLCr to improve exogenous gene expression was evaluated by microinjection of the DNA-dLCr complex into in vitro fertilized zygotes, followed by verification of both embryo development and GFP expression. From embryos microinjected with DNA only, 4.6% and 2.8% expressed the GFP transgene at day 5 and day 7, respectively. The DNA-dLCr complex did not increase the number of GFP-positive embryos. In conclusion, dLCr forms a complex with DNA and its application in in vitro culture is possible. However, the dLCr peptide sequence should be redesigned to improve GFP expression.
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700 1 $aCAMARGO, L. S. de A.
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700 1 $aRÁDIS-BAPTISTA, G.
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Registro original: |
Embrapa Gado de Leite (CNPGL) |
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Biblioteca |
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| Registros recuperados : 24 | |
| 7. |  | RAMOS, K. M.; FELFINI, J. M:; FRANCO, A. C.; SOUSA-SILVA, J. C.; FAGG, C. W. Desenvolvimento inicial de plantulas de Amburana cearensis (Fr. Allem.) A. C. Smith., em diferentes condicoes de sombreamento. In: CONGRESSO NACIONAL DE BOTANICA, 51., Brasilia, DF. Resumos. Brasilia: Sociedade de Botanica do Brasil, 2000. p. 52.| Biblioteca(s): Embrapa Cerrados. |
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| 11. | | SOUSA, M. W. dos S.; POZZOBON, M. T.; FAGG, C. W.; VALLS, J. F. M.; OLIVEIRA, R. C. de. Poaceae. Taxon, v. 66, n. 6, p. E35-E39, 2017. Publicado em: IOPB Column: IAPT/IOPB chromosome data 26. MARHOLD, K.; KUCERA, J. (Ed.).| Tipo: Artigo em Periódico Indexado | Circulação/Nível: A - 1 |
| Biblioteca(s): Embrapa Recursos Genéticos e Biotecnologia. |
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| 12. | | OLIVEIRA, R. C. de; VALLS, J. F. M.; GOMES, S. M.; FAGG, C. W.; POZZOBON, M. T. A new species of Paspalum, Notata group (Poaceae, Paspaleae), from the Cerrado biome, Brazil: description, chromosome number, and leaf blade anatomy. Phytotaxa, v. 203, n. 2, p. 159-168, 2015.| Tipo: Artigo em Periódico Indexado | Circulação/Nível: B - 1 |
| Biblioteca(s): Embrapa Recursos Genéticos e Biotecnologia. |
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| 13. | | RIBEIRO, A. R. O.; SOUSA, M. W. S.; OLIVEIRA, R. C. de; ARAUJO, A. C. G.; FAGG, C. W.; POZZOBON, M. T. Cytological studies in four species of Mesosetum (Arthropogoninae) reveal the lowest chromosome number among the Neotropical Poaceae. Plant Systematics and Evolution, v. 301, n. 10, p. 2377-2386, 2015.| Tipo: Artigo em Periódico Indexado | Circulação/Nível: B - 1 |
| Biblioteca(s): Embrapa Recursos Genéticos e Biotecnologia. |
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| 14. | | SOUZA-SILVA, J. C.; AMORIM, C. E. G.; RAMOS, K. M. O.; DIAS, P. A.; FELFILI, J. M; FAGG, C. W.; FRANCO, A. C. Crescimento inicial de inga cylindrica (vell.) mart. sob diferentes condições de sombreamento. In: CONGRESSO NACIONAL DE BOTÂNICA, 54.; REUNIÃO AMAZÔNICA DE BOTÂNICA, 3., 2003, Belém, PA. Desafios da botânica brasileira no novo milênio: inventário, sistematização, conservação e uso da biodiversidade vegetal: anais. Belém, PA: Sociedade Botânica do Brasil: Universidade Federal Rural da Amazônia: Museu Paraense Emílio Goeldi: Embrapa Amazônia Oriental, 2003. 1 p.| Tipo: Resumo em Anais de Congresso |
| Biblioteca(s): Embrapa Cerrados. |
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| 15. | | AMORIM, C. E. G.; RAMOS, K. M. O.; FELFILI, J. M.; FAGG, C. W.; SOUZA-SILVA, J. C.; FRANCO, A. C. Desenvolvimento inicial de Dilodendron bipinnatum Radkl. em diferentes condições de sombreamento em viveiro. In: CONGRESSO NACIONAL DE BOTÂNICA, 54.; REUNIÃO AMAZÔNICA DE BOTÂNICA, 3., 2003, Belém, PA. Desafios da botânica brasileira no novo milênio: inventário, sistematização, conservação e uso da biodiversidade vegetal: anais. Belém, PA: Sociedade Botânica do Brasil: Universidade Federal Rural da Amazônia: Museu Paraense Emílio Goeldi: Embrapa Amazônia Oriental, 2003. 1 p.| Tipo: Resumo em Anais de Congresso |
| Biblioteca(s): Embrapa Cerrados. |
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| 16. | | SOUZA-SILVA, J. C.; RAMOS, K. M. O.; DIAS, P. A.; AMORIM, C. E. G.; FELFILI, J. M.; FAGG, C. W.; FRANCO, A. C. Desenvolvimento inicial de eriotheca pubescens (Mart. & Zucc.) Schott & Endl. sob diferentes condições de sombreamento. In: CONGRESSO NACIONAL DE BOTÂNICA, 54.; REUNIÃO AMAZÔNICA DE BOTÂNICA, 3., 2003, Belém, PA. Desafios da botânica brasileira no novo milênio: inventário, sistematização, conservação e uso da biodiversidade vegetal: anais. Belém, PA: Sociedade Botânica do Brasil: Universidade Federal Rural da Amazônia: Museu Paraense Emílio Goeldi: Embrapa Amazônia Oriental, 2003. 1 p.| Tipo: Resumo em Anais de Congresso |
| Biblioteca(s): Embrapa Cerrados. |
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| 17. | | FELFILI, J. M.; AMORIM, C. E. G.; FRANCO, A. C.; SOUSA-SILVA, J. C.; FAGG, C. W.; RAMOS, K. M. O. Desenvolvimento inicial de plantulas de sterculia striata st.hil.et naud., em diferentes condições de sombreamento. In: SIMPOSIO ECOLOGIA E BIODIVERSIDADE DO CERRADO, 2002, Brasilia, DF. Perspectivas e desafios para o seculo 21: [programa e resumos]. Brasilia: Embrapa Sede, 2002. p. 18.| Biblioteca(s): Embrapa Cerrados. |
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| 18. | | AMORIM, C. E. G.; RAMOS, K. M. O; FELFILI, J. M.; FAGG, C. W.; SOUZA-SILVA, J. C.; FRANCO, A. C. Desenvolvimento inicial de Tabebuia serratifolia (Vahl.) G. Nicholson em diferentes condições de sombreamento em viveiro. In: CONGRESSO NACIONAL DE BOTÂNICA, 54.; REUNIÃO AMAZÔNICA DE BOTÂNICA, 3., 2003, Belém, PA. Desafios da botânica brasileira no novo milênio: inventário, sistematização, conservação e uso da biodiversidade vegetal: anais. Belém, PA: Sociedade Botânica do Brasil: Universidade Federal Rural da Amazônia: Museu Paraense Emílio Goeldi: Embrapa Amazônia Oriental, 2003. 1 p.| Tipo: Resumo em Anais de Congresso |
| Biblioteca(s): Embrapa Cerrados. |
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| 19. | | FELFILI, J. M.; MENDONCA, R. C.; WALTER, B. M. T.; SILVA JUNIOR, M. C.; NOBREGA, M. G. G.; FAGG, C. W.; SEVILHA, A. C.; SILVA, M. A. Flora fanerogamica das matas de galeria e ciliares do Brasil Central. In: RIBEIRO, J. F.; FONSECA, C. E. L. da; SOUSA-SILVA, J. C. (Ed.). Cerrado: caracterizacao e recuperacao de matas de galeria. Planaltina: Embrapa Cerrados, 2001. p.195-263.| Biblioteca(s): Embrapa Cerrados; Embrapa Recursos Genéticos e Biotecnologia. |
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| 20. | | MENDONCA, R. C. de; FELFILI, J. M.; FAGG, C. W.; SILVA, M. A. da; FILGUEIRAS, T. S.; WALTER, B. M. T. Floristica da regiao do Espigao Mestre do Sao Francisco, Bahia e Minas Gerais. Boletim do Herbario Ezechias Paulo Heringer, Brasilia, v. 6, p. 38-94, dez. 2000.| Biblioteca(s): Embrapa Recursos Genéticos e Biotecnologia. |
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