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Registro Completo |
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Biblioteca(s): |
Embrapa Gado de Corte. |
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Data corrente: |
25/11/2015 |
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Data da última atualização: |
04/03/2016 |
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Tipo da produção científica: |
Artigo em Anais de Congresso |
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Autoria: |
LOUZAN, A. L. R. M.; CAITANO, M. A. B.; SANTOS, M. G. dos; VERBISCK, N. V.; ROSINHA, G. M. S. |
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Afiliação: |
UFMS; UFMS; MARIA GORETTI DOS SANTOS, CNPGC; NEWTON VALERIO VERBISCK, CNPGC; GRACIA MARIA SOARES ROSINHA, CNPGC. |
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Título: |
Maldi-tof mass spectrometry identification and differenteiation of Brucella species. |
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Ano de publicação: |
2015 |
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Fonte/Imprenta: |
In: MEDITERRANEAN SEA REGION COUNTRIES MASS SPECTROMETRY WORKSHOP (MEDMS III), 3., 2015., Athens, Greece. [Poster]. Athens, Greece: Univeristy of Athens, 2015. p. 61. |
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Idioma: |
Inglês |
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Conteúdo: |
Brucella species are Gram-negative bacteria that cause BrucelIosis, also known as Mediterranean or Malta fever, a highly contagious and chronic disease that occurs worldwide. Brucellosis may affect human after close contact with infected animal secretions and by ingestion of contaminated animal products, such as those made with unpausterized milk or undercooked meat. Livestock, including cattle, sheep, goats, pigs and dogs are the most common reservoirs for Brucella bacteria, which the detection stilI relies on microbiological culture and serological tests. However, in the last decade, matrix-assisted laser desorption ionization time-of-flight mass spectrometry (MALDI- TOF MS) has been used for microrganism identification at genus and species leveI. CurrentIy, MALDI-TOF MS is being used as a rapid, cost effective and reliable methodology for bacteria identification even at the subspecies leveI. Here we show that MALDI- TOF MS is useful for Brucella identification and differentiation, B. abortus (strains 544, S2308, 19 and RB51), B. suis, B. ovis and B. canis reference samples were grown and, after ethanol inactivation, proteins were extracted with formic acidlacetonitrile. Mass spectra were acquired with alpha-cyano-4-hydroxy cinnamic acid in an Autoflex III Smartbeam mass spectrometer (Bruker Daltonics). MALDI Biotyper software (Bruker Daltonics) dendogram analysis provided that the mass spectra profiles (MSPs) obtained can distinguish alI the species of Brucella studied herein. Moreover, fingerprints of the wild-type S2308 and vaccine 19 and RB51 B. abortus strains are clearly different. The next step wilI be to use these MSPs to detect and identify Brucella from infected cattle. Financial support: Embrapa, FUNDECT, CNPq and CAPES. MenosBrucella species are Gram-negative bacteria that cause BrucelIosis, also known as Mediterranean or Malta fever, a highly contagious and chronic disease that occurs worldwide. Brucellosis may affect human after close contact with infected animal secretions and by ingestion of contaminated animal products, such as those made with unpausterized milk or undercooked meat. Livestock, including cattle, sheep, goats, pigs and dogs are the most common reservoirs for Brucella bacteria, which the detection stilI relies on microbiological culture and serological tests. However, in the last decade, matrix-assisted laser desorption ionization time-of-flight mass spectrometry (MALDI- TOF MS) has been used for microrganism identification at genus and species leveI. CurrentIy, MALDI-TOF MS is being used as a rapid, cost effective and reliable methodology for bacteria identification even at the subspecies leveI. Here we show that MALDI- TOF MS is useful for Brucella identification and differentiation, B. abortus (strains 544, S2308, 19 and RB51), B. suis, B. ovis and B. canis reference samples were grown and, after ethanol inactivation, proteins were extracted with formic acidlacetonitrile. Mass spectra were acquired with alpha-cyano-4-hydroxy cinnamic acid in an Autoflex III Smartbeam mass spectrometer (Bruker Daltonics). MALDI Biotyper software (Bruker Daltonics) dendogram analysis provided that the mass spectra profiles (MSPs) obtained can distinguish alI the species of Brucella studied he... Mostrar Tudo |
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Thesagro: |
Brucella. |
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Thesaurus Nal: |
Brucellosis; Spectroscopy. |
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Categoria do assunto: |
-- |
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Marc: |
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520 $aBrucella species are Gram-negative bacteria that cause BrucelIosis, also known as Mediterranean or Malta fever, a highly contagious and chronic disease that occurs worldwide. Brucellosis may affect human after close contact with infected animal secretions and by ingestion of contaminated animal products, such as those made with unpausterized milk or undercooked meat. Livestock, including cattle, sheep, goats, pigs and dogs are the most common reservoirs for Brucella bacteria, which the detection stilI relies on microbiological culture and serological tests. However, in the last decade, matrix-assisted laser desorption ionization time-of-flight mass spectrometry (MALDI- TOF MS) has been used for microrganism identification at genus and species leveI. CurrentIy, MALDI-TOF MS is being used as a rapid, cost effective and reliable methodology for bacteria identification even at the subspecies leveI. Here we show that MALDI- TOF MS is useful for Brucella identification and differentiation, B. abortus (strains 544, S2308, 19 and RB51), B. suis, B. ovis and B. canis reference samples were grown and, after ethanol inactivation, proteins were extracted with formic acidlacetonitrile. Mass spectra were acquired with alpha-cyano-4-hydroxy cinnamic acid in an Autoflex III Smartbeam mass spectrometer (Bruker Daltonics). MALDI Biotyper software (Bruker Daltonics) dendogram analysis provided that the mass spectra profiles (MSPs) obtained can distinguish alI the species of Brucella studied herein. Moreover, fingerprints of the wild-type S2308 and vaccine 19 and RB51 B. abortus strains are clearly different. The next step wilI be to use these MSPs to detect and identify Brucella from infected cattle. Financial support: Embrapa, FUNDECT, CNPq and CAPES.
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Registro original: |
Embrapa Gado de Corte (CNPGC) |
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Biblioteca |
ID |
Origem |
Tipo/Formato |
Classificação |
Cutter |
Registro |
Volume |
Status |
URL |
Voltar
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Registro Completo
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Biblioteca(s): |
Embrapa Caprinos e Ovinos. |
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Data corrente: |
13/07/2012 |
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Data da última atualização: |
10/08/2017 |
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Tipo da produção científica: |
Orientação de Tese de Pós-Graduação |
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Autoria: |
ALVES, L. A. de O. |
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Afiliação: |
LUIS ANTONIO DE OLIVEIRA ALVES. |
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Título: |
Produção de antígeno e separação da proteína P28 através de microfiltragem seriada para sorodiagnóstico da artrite encefalite caprina. |
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Ano de publicação: |
2011 |
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Fonte/Imprenta: |
2011. |
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Páginas: |
80 f. |
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Idioma: |
Português |
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Notas: |
Dissertação (Mestrado Acadêmico em Ciências Veterinária) - Universidade Estadual do Ceará, Fortaleza. Orientadora: Maria Fátima da Silva Teixeira; Co-orientadora: Alice Andrioli Pinheiro, Embrapa Caprinos e Ovinos (CNPC). |
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Conteúdo: |
Resumo: O vírus da Artrite Encefalite Caprina (CAEV) é um lentivírus que causa uma enfermidade crônica que não possui tratamento ou vacinação como ferramenta de controle, sendo responsável por perdas econômicas significativas em todo mundo. O diagnóstico é principalmente baseado em exames sorológicos, onde os antígenos utilizados para o diagnóstico são compostos basicamente pelas proteínas estruturais p28 e gp135. Este estudo teve como objetivo produzir um antígeno (Ag) a partir de cultura de células de Membrana Sinovial Caprina (MSC) infectadas com CAEV, pela técnica de microfiltração seriada, substituindo a ultracentrifugação em colchão de sacarose ( Ag UCCS) para utilização em um ELISA indireto (ELISA-i). Amostras de 188 soros caprinos, que previamente foram testados pelo Western Blot (WB) com Ag UCCS, foram submetidos à análise pelo ELISA-i com o novo antígeno produzido, que mostrou uma concordância de 92% em relação ao antígeno UCCS. A sensibilidade e especificidade do ELISA em relação ao WB foram de 95,65% e 88,5% respectivamente. A nova técnica criada a partir de microfiltrações, mostrou-se efetiva para o diagnóstico sorológico de anticorpos para CAEV em comparação ao antígeno ultracentrifugado, apresentando-se, portanto, como uma alternativa viável para produção de antígeno purificado de lentivírus de pequenos ruminantes. Abstract: The caprine arthritis encephalitis virus (CAEV) is a lentivirus which causes a chronic character disease that does not have treatment or vaccination as a control tool, being responsable for significant economical losses all over the world. The diagnosis is mainly based on serological exams, in which the antigens (Ag) used for diagnosis are basically composed by p28 and gp135 structural proteins. This study aimed to produce an antigen (Ag) from the culture of goat synovial membrane cells (MSC) infected by CAEV by serial microfiltering technique replacing ultracentrifugation in sacarosis Mattress (UCCS) for the indirect diagnosis ELISA tests (i-ELISA). Samples of 188 serum from goats, previously examined by Western Blot (WB) with Ag UCCS were submitted to analysis by i-ELISA with new antigen produced, demonstrating an accordance of 92% in relation to UCCS antigen. The specificity and sensitivity relating to WB were of 95.65% and 88.5% respectively. The new technique created from the microfiltering showed itself effective to the serological antibodies diagnosis of CAEV comparing to the ultracentrifuged one, presenting itself, therefore, as to viable alternative for purified antigen of lentivirus of small ruminants. MenosResumo: O vírus da Artrite Encefalite Caprina (CAEV) é um lentivírus que causa uma enfermidade crônica que não possui tratamento ou vacinação como ferramenta de controle, sendo responsável por perdas econômicas significativas em todo mundo. O diagnóstico é principalmente baseado em exames sorológicos, onde os antígenos utilizados para o diagnóstico são compostos basicamente pelas proteínas estruturais p28 e gp135. Este estudo teve como objetivo produzir um antígeno (Ag) a partir de cultura de células de Membrana Sinovial Caprina (MSC) infectadas com CAEV, pela técnica de microfiltração seriada, substituindo a ultracentrifugação em colchão de sacarose ( Ag UCCS) para utilização em um ELISA indireto (ELISA-i). Amostras de 188 soros caprinos, que previamente foram testados pelo Western Blot (WB) com Ag UCCS, foram submetidos à análise pelo ELISA-i com o novo antígeno produzido, que mostrou uma concordância de 92% em relação ao antígeno UCCS. A sensibilidade e especificidade do ELISA em relação ao WB foram de 95,65% e 88,5% respectivamente. A nova técnica criada a partir de microfiltrações, mostrou-se efetiva para o diagnóstico sorológico de anticorpos para CAEV em comparação ao antígeno ultracentrifugado, apresentando-se, portanto, como uma alternativa viável para produção de antígeno purificado de lentivírus de pequenos ruminantes. Abstract: The caprine arthritis encephalitis virus (CAEV) is a lentivirus which causes a chronic character disease that does not have treatment or ... Mostrar Tudo |
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Palavras-Chave: |
Antigen; Artrite encefalite caprina; CAEV; Lentivirose; Maedi-Visna; Vírus da artrite encefalite caprina. |
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Thesagro: |
Antígeno; Caprino; Doença animal; Elisa; Ovino. |
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Thesaurus NAL: |
Caprine arthritis encephalitis virus; Lentivirus. |
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Categoria do assunto: |
-- |
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URL: |
https://ainfo.cnptia.embrapa.br/digital/bitstream/item/62013/1/TS-Producao-de-antigeno-e-separacao-da-proteina.pdf
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Marc: |
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245 $aProdução de antígeno e separação da proteína P28 através de microfiltragem seriada para sorodiagnóstico da artrite encefalite caprina.$h[electronic resource]
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300 $a80 f.
500 $aDissertação (Mestrado Acadêmico em Ciências Veterinária) - Universidade Estadual do Ceará, Fortaleza. Orientadora: Maria Fátima da Silva Teixeira; Co-orientadora: Alice Andrioli Pinheiro, Embrapa Caprinos e Ovinos (CNPC).
520 $aResumo: O vírus da Artrite Encefalite Caprina (CAEV) é um lentivírus que causa uma enfermidade crônica que não possui tratamento ou vacinação como ferramenta de controle, sendo responsável por perdas econômicas significativas em todo mundo. O diagnóstico é principalmente baseado em exames sorológicos, onde os antígenos utilizados para o diagnóstico são compostos basicamente pelas proteínas estruturais p28 e gp135. Este estudo teve como objetivo produzir um antígeno (Ag) a partir de cultura de células de Membrana Sinovial Caprina (MSC) infectadas com CAEV, pela técnica de microfiltração seriada, substituindo a ultracentrifugação em colchão de sacarose ( Ag UCCS) para utilização em um ELISA indireto (ELISA-i). Amostras de 188 soros caprinos, que previamente foram testados pelo Western Blot (WB) com Ag UCCS, foram submetidos à análise pelo ELISA-i com o novo antígeno produzido, que mostrou uma concordância de 92% em relação ao antígeno UCCS. A sensibilidade e especificidade do ELISA em relação ao WB foram de 95,65% e 88,5% respectivamente. A nova técnica criada a partir de microfiltrações, mostrou-se efetiva para o diagnóstico sorológico de anticorpos para CAEV em comparação ao antígeno ultracentrifugado, apresentando-se, portanto, como uma alternativa viável para produção de antígeno purificado de lentivírus de pequenos ruminantes. Abstract: The caprine arthritis encephalitis virus (CAEV) is a lentivirus which causes a chronic character disease that does not have treatment or vaccination as a control tool, being responsable for significant economical losses all over the world. The diagnosis is mainly based on serological exams, in which the antigens (Ag) used for diagnosis are basically composed by p28 and gp135 structural proteins. This study aimed to produce an antigen (Ag) from the culture of goat synovial membrane cells (MSC) infected by CAEV by serial microfiltering technique replacing ultracentrifugation in sacarosis Mattress (UCCS) for the indirect diagnosis ELISA tests (i-ELISA). Samples of 188 serum from goats, previously examined by Western Blot (WB) with Ag UCCS were submitted to analysis by i-ELISA with new antigen produced, demonstrating an accordance of 92% in relation to UCCS antigen. The specificity and sensitivity relating to WB were of 95.65% and 88.5% respectively. The new technique created from the microfiltering showed itself effective to the serological antibodies diagnosis of CAEV comparing to the ultracentrifuged one, presenting itself, therefore, as to viable alternative for purified antigen of lentivirus of small ruminants.
650 $aCaprine arthritis encephalitis virus
650 $aLentivirus
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650 $aCaprino
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653 $aArtrite encefalite caprina
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653 $aLentivirose
653 $aMaedi-Visna
653 $aVírus da artrite encefalite caprina
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Registro original: |
Embrapa Caprinos e Ovinos (CNPC) |
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