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Biblioteca(s): | Embrapa Mandioca e Fruticultura.
Data corrente: | 13/11/1997
Data da última atualização: | 13/11/1997
Autoria: | TARGON, M. L. P. N.; NIKOLAEVA, O.; MANJUNATH, K. L.; LEE, R. F.; MULLER, G. W.; MACHADO, M. A.
Afiliação: | Universidade da Florida.
Título: | gene da capa proteica de um isolado brasileiro do "Citrus tristeza virus": clonagem, expressao em E. coli e producao de antissoro policlonal
Ano de publicação: | 1997
Fonte/Imprenta: | Fitopatologia Brasileira, v.22, n.1, p.99-102, 1997
ISSN: | 0100-4158
Idioma: | Português
Conteúdo: | O RNA dupla fita (dsRNA) do "citrus tristeza virus" (CTV), correspondendo a forma repicativa do RNA simples fita (ssRNA), foi isolado de 1g de tecido de casca liofilizado de laranja Pera Ipigua (Citrus sinensis Osb.) e usado como molde para a sintese da primeira fita de cDNA pela MuMLV transcriptase reversa. O gene da capa proteica foi amplificado por PCR usando primers especificos do virus. O produto da amplificacao foi clonado no vetor de expressao pMAL-c2 e celulas de E. coli DH5 foram transformadas. A expressao da proteina de fusao (proteina do capsideo do CTV mais o fragmento da proteina de ligacao da maltose de E. coli) foi induzida com IPTG. A proteina de fusao foi purificada por cromatografia em coluna de afinidade e usada como antigeno na producao de antissoro policlonal em coelhos. O rendimento medio de proteina foi de 25ug/ml de cultura. O anticorpo produzido reagiu especificamente contra a proteina do capsideo do CTV e nao apresentou reacao cruzada com proteinas da planta.
Palavras-Chave: | Citrus sp; CTV.
Thesagro: | Anticorpo; Antissoro; Vírus.
Categoria do assunto: | --
Registro original: | Embrapa Mandioca e Fruticultura (CNPMF)
Exemplares: | CNPMF - (4040-1) - ADC - AP - -- - 632.05 -  - . - DIS