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Registro Completo |
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Biblioteca(s): |
Embrapa Gado de Corte. |
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Data corrente: |
03/06/2015 |
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Data da última atualização: |
26/04/2024 |
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Autoria: |
CAITANO, M. A. B.; JANK, C. C.; SANTOS, L. R. dos; SOARES, C. O.; ROSINHA, G. M. S. |
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Afiliação: |
MARRIELEN APARECIDA BENITES CAITANO, UNIVERSIDADE PARA O DESENVOLVIMENTO DO ESTADO E DA REGIÃO DO PANTANAL; CARINA CALIXTO JANK, UNIVERSIDADE FEDERAL DE MATO GROSSO DO SUL; LENITA RAMIRES DOS SANTOS, CNPGC; CLEBER OLIVEIRA SOARES, CNPGC; GRACIA MARIA SOARES ROSINHA, CNPGC. |
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Título: |
Clonagem e expressão heteróloga do gene pgk de Brucella abortus. |
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Ano de publicação: |
2013 |
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Fonte/Imprenta: |
Bio(in)formação, v. 6, n. 6, 2013. |
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Páginas: |
p. 249-266 |
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Idioma: |
Português |
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Conteúdo: |
A brucelose é uma das doenças emergentes mais importantes mundialmente na atualidade, afetando diversas espécies animais e o homem. A situação brasileira no controle de doenças infecciosas de animais requer melhorias para atingir os padrões internacionais e aumentar a produção. Por estes motivos o MAPA vem incentivado o desenvolvimento de novas vacinas e formas de diagnósticos para a brucelose bovina. Enzimas metabólicas têm sido descritas no envolvimento da virulência de Brucella abortus. Uma delas é a fosfoglicerato cinase (PGK), codificada pelo gene pgk. Neste trabalho objetivou-se a produção da proteína recombinante PGK (PGKr) de B. abortus em sistema heterólogo de expressão, para caracterização da cepa vacinal geneticamente modificada, B. abortus 2308 p r 8 pgk por western blot e posterior utilização em testes sorológicos. Para isto, foi realizada a extração de DNA genômico da cepa S2308 de B. abortus e o gene pgk foi amplificado pela Reação em Cadeia da Polimerase (PCR) a partir de primers específicos. O produto da PCR foi ligado ao plasmídeo pMAL-c2E. O clone recombinante, foi submetido à indução da produção da proteína em Escherichia coli. A PGKr foi purificada por cromatografia de afinidade e duas frações purificadas foram dosadas por Bradford, obtendo-se 2,62 mg da PGKr. Camundongos BALB/c foram injetados com a proteína emulsionada em adjuvante Montanide, via subcutânea. Foram realizadas três inoculações com intervalos de três semanas. Quinze dias após as inoculações, os soros sanguíneos destes animais foram coletados e separados para avaliação pelo método de Western Blot. Os soros confirmaram a produção de anticorpos contra o antígeno e pode-se observar que no ensaio com a cepa selvagem o anticorpo reagiu mostrando que a produção da proteína PGK está intacta nesta cepa e com a cepa mutante S2308 08 pgk o anticorpo não reagiu, mostrando que a produção da proteína PGK é nula, confirmando realmente a deleção do gene pgk nesta cepa. MenosA brucelose é uma das doenças emergentes mais importantes mundialmente na atualidade, afetando diversas espécies animais e o homem. A situação brasileira no controle de doenças infecciosas de animais requer melhorias para atingir os padrões internacionais e aumentar a produção. Por estes motivos o MAPA vem incentivado o desenvolvimento de novas vacinas e formas de diagnósticos para a brucelose bovina. Enzimas metabólicas têm sido descritas no envolvimento da virulência de Brucella abortus. Uma delas é a fosfoglicerato cinase (PGK), codificada pelo gene pgk. Neste trabalho objetivou-se a produção da proteína recombinante PGK (PGKr) de B. abortus em sistema heterólogo de expressão, para caracterização da cepa vacinal geneticamente modificada, B. abortus 2308 p r 8 pgk por western blot e posterior utilização em testes sorológicos. Para isto, foi realizada a extração de DNA genômico da cepa S2308 de B. abortus e o gene pgk foi amplificado pela Reação em Cadeia da Polimerase (PCR) a partir de primers específicos. O produto da PCR foi ligado ao plasmídeo pMAL-c2E. O clone recombinante, foi submetido à indução da produção da proteína em Escherichia coli. A PGKr foi purificada por cromatografia de afinidade e duas frações purificadas foram dosadas por Bradford, obtendo-se 2,62 mg da PGKr. Camundongos BALB/c foram injetados com a proteína emulsionada em adjuvante Montanide, via subcutânea. Foram realizadas três inoculações com intervalos de três semanas. Quinze dias após as inoculaçõ... Mostrar Tudo |
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Palavras-Chave: |
Fosfoglicerato cinase. |
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Thesagro: |
Bovino; Brucelose; Clonagem. |
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Thesaurus Nal: |
Brucellaceae. |
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Categoria do assunto: |
-- |
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URL: |
https://ainfo.cnptia.embrapa.br/digital/bitstream/item/124979/1/18.pdf
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Marc: |
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520 $aA brucelose é uma das doenças emergentes mais importantes mundialmente na atualidade, afetando diversas espécies animais e o homem. A situação brasileira no controle de doenças infecciosas de animais requer melhorias para atingir os padrões internacionais e aumentar a produção. Por estes motivos o MAPA vem incentivado o desenvolvimento de novas vacinas e formas de diagnósticos para a brucelose bovina. Enzimas metabólicas têm sido descritas no envolvimento da virulência de Brucella abortus. Uma delas é a fosfoglicerato cinase (PGK), codificada pelo gene pgk. Neste trabalho objetivou-se a produção da proteína recombinante PGK (PGKr) de B. abortus em sistema heterólogo de expressão, para caracterização da cepa vacinal geneticamente modificada, B. abortus 2308 p r 8 pgk por western blot e posterior utilização em testes sorológicos. Para isto, foi realizada a extração de DNA genômico da cepa S2308 de B. abortus e o gene pgk foi amplificado pela Reação em Cadeia da Polimerase (PCR) a partir de primers específicos. O produto da PCR foi ligado ao plasmídeo pMAL-c2E. O clone recombinante, foi submetido à indução da produção da proteína em Escherichia coli. A PGKr foi purificada por cromatografia de afinidade e duas frações purificadas foram dosadas por Bradford, obtendo-se 2,62 mg da PGKr. Camundongos BALB/c foram injetados com a proteína emulsionada em adjuvante Montanide, via subcutânea. Foram realizadas três inoculações com intervalos de três semanas. Quinze dias após as inoculações, os soros sanguíneos destes animais foram coletados e separados para avaliação pelo método de Western Blot. Os soros confirmaram a produção de anticorpos contra o antígeno e pode-se observar que no ensaio com a cepa selvagem o anticorpo reagiu mostrando que a produção da proteína PGK está intacta nesta cepa e com a cepa mutante S2308 08 pgk o anticorpo não reagiu, mostrando que a produção da proteína PGK é nula, confirmando realmente a deleção do gene pgk nesta cepa.
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Registro original: |
Embrapa Gado de Corte (CNPGC) |
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Biblioteca |
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Tipo/Formato |
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Cutter |
Registro |
Volume |
Status |
URL |
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Registro Completo
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Biblioteca(s): |
Embrapa Amazônia Oriental. |
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Data corrente: |
25/03/2014 |
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Data da última atualização: |
10/06/2022 |
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Tipo da produção científica: |
Artigo em Anais de Congresso |
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Autoria: |
CARVALHO, J. O. P. de; SILVA, J. N. M.; LOPES, J. do C. A. |
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Afiliação: |
JOAO OLEGARIO PEREIRA DE CARVALHO, CPATU; JOSÉ NATALINO MACÊDO SILVA, Embrapa Amazônia Oriental; JOSE DO CARMO ALVES LOPES, CPATU. |
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Título: |
Spatial distribution of tree species of a terra firme rain forest in brazilian Amazonia. |
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Ano de publicação: |
1993 |
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Fonte/Imprenta: |
In: CONGRESSO FLORESTAL PANAMERICANO, 1.; CONGRESSO FLORESTAL BRASILEIRO, 7., 1993, Curitiba. Floresta para o Desenvolvimento: Política, Ambiente, Tecnologia e Mercado: anais. São Paulo: SBS; [S.l.]: SBEF, 1993. |
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Páginas: |
v. 1, p. 393-396. |
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Idioma: |
Inglês |
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Conteúdo: |
Foram registradas as mudanças na distribuição espacial de espécies em uma floresta densa de terra firme na Amazônia brasileira. num período de oito anos. Foram estudadas duas intensidades de exploração e comparadas à uma floresta não explorada (testemunha). Foram estabeleci das 48 parcelas permanentes na floresta explorada e 12 na testemunha. A área explorada foi medida quatro vezes: um ano antes da exploração: um, cinco e sete anos depois da exploração. A floresta não explorada foi medida três vezes durante o período estudado. Quarenta e sete por cento das espécies, considerando árvores com dap > 5 cm, mostraram distribuição agrupada. Espécies pioneiras ocorreram em grupo na área explorada, principalmente a partir do quinto ano após a exploração, e especialmente com árvores pequenas. A maioria delas dificilmente atinge da p de 30 cm. A distribuição espacial não está sempre relacionada com a abundância das espécies, considerando que a maioria das espécies agrupadas tinham menos de sete árvores por hectare (27 árvores amostradas). |
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Palavras-Chave: |
Distribuição espacial. |
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Thesagro: |
Floresta. |
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Thesaurus NAL: |
Amazonia. |
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Categoria do assunto: |
K Ciência Florestal e Produtos de Origem Vegetal |
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URL: |
https://ainfo.cnptia.embrapa.br/digital/bitstream/item/199123/1/Spatial-distribution.pdf
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Marc: |
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300 $av. 1, p. 393-396.
520 $aForam registradas as mudanças na distribuição espacial de espécies em uma floresta densa de terra firme na Amazônia brasileira. num período de oito anos. Foram estudadas duas intensidades de exploração e comparadas à uma floresta não explorada (testemunha). Foram estabeleci das 48 parcelas permanentes na floresta explorada e 12 na testemunha. A área explorada foi medida quatro vezes: um ano antes da exploração: um, cinco e sete anos depois da exploração. A floresta não explorada foi medida três vezes durante o período estudado. Quarenta e sete por cento das espécies, considerando árvores com dap > 5 cm, mostraram distribuição agrupada. Espécies pioneiras ocorreram em grupo na área explorada, principalmente a partir do quinto ano após a exploração, e especialmente com árvores pequenas. A maioria delas dificilmente atinge da p de 30 cm. A distribuição espacial não está sempre relacionada com a abundância das espécies, considerando que a maioria das espécies agrupadas tinham menos de sete árvores por hectare (27 árvores amostradas).
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650 $aFloresta
653 $aDistribuição espacial
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700 1 $aLOPES, J. do C. A.
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Registro original: |
Embrapa Amazônia Oriental (CPATU) |
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