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Registro Completo |
Biblioteca(s): |
Embrapa Gado de Corte. |
Data corrente: |
03/06/2015 |
Data da última atualização: |
26/04/2024 |
Autoria: |
CAITANO, M. A. B.; JANK, C. C.; SANTOS, L. R. dos; SOARES, C. O.; ROSINHA, G. M. S. |
Afiliação: |
MARRIELEN APARECIDA BENITES CAITANO, UNIVERSIDADE PARA O DESENVOLVIMENTO DO ESTADO E DA REGIÃO DO PANTANAL; CARINA CALIXTO JANK, UNIVERSIDADE FEDERAL DE MATO GROSSO DO SUL; LENITA RAMIRES DOS SANTOS, CNPGC; CLEBER OLIVEIRA SOARES, CNPGC; GRACIA MARIA SOARES ROSINHA, CNPGC. |
Título: |
Clonagem e expressão heteróloga do gene pgk de Brucella abortus. |
Ano de publicação: |
2013 |
Fonte/Imprenta: |
Bio(in)formação, v. 6, n. 6, 2013. |
Páginas: |
p. 249-266 |
Idioma: |
Português |
Conteúdo: |
A brucelose é uma das doenças emergentes mais importantes mundialmente na atualidade, afetando diversas espécies animais e o homem. A situação brasileira no controle de doenças infecciosas de animais requer melhorias para atingir os padrões internacionais e aumentar a produção. Por estes motivos o MAPA vem incentivado o desenvolvimento de novas vacinas e formas de diagnósticos para a brucelose bovina. Enzimas metabólicas têm sido descritas no envolvimento da virulência de Brucella abortus. Uma delas é a fosfoglicerato cinase (PGK), codificada pelo gene pgk. Neste trabalho objetivou-se a produção da proteína recombinante PGK (PGKr) de B. abortus em sistema heterólogo de expressão, para caracterização da cepa vacinal geneticamente modificada, B. abortus 2308 p r 8 pgk por western blot e posterior utilização em testes sorológicos. Para isto, foi realizada a extração de DNA genômico da cepa S2308 de B. abortus e o gene pgk foi amplificado pela Reação em Cadeia da Polimerase (PCR) a partir de primers específicos. O produto da PCR foi ligado ao plasmídeo pMAL-c2E. O clone recombinante, foi submetido à indução da produção da proteína em Escherichia coli. A PGKr foi purificada por cromatografia de afinidade e duas frações purificadas foram dosadas por Bradford, obtendo-se 2,62 mg da PGKr. Camundongos BALB/c foram injetados com a proteína emulsionada em adjuvante Montanide, via subcutânea. Foram realizadas três inoculações com intervalos de três semanas. Quinze dias após as inoculações, os soros sanguíneos destes animais foram coletados e separados para avaliação pelo método de Western Blot. Os soros confirmaram a produção de anticorpos contra o antígeno e pode-se observar que no ensaio com a cepa selvagem o anticorpo reagiu mostrando que a produção da proteína PGK está intacta nesta cepa e com a cepa mutante S2308 08 pgk o anticorpo não reagiu, mostrando que a produção da proteína PGK é nula, confirmando realmente a deleção do gene pgk nesta cepa. MenosA brucelose é uma das doenças emergentes mais importantes mundialmente na atualidade, afetando diversas espécies animais e o homem. A situação brasileira no controle de doenças infecciosas de animais requer melhorias para atingir os padrões internacionais e aumentar a produção. Por estes motivos o MAPA vem incentivado o desenvolvimento de novas vacinas e formas de diagnósticos para a brucelose bovina. Enzimas metabólicas têm sido descritas no envolvimento da virulência de Brucella abortus. Uma delas é a fosfoglicerato cinase (PGK), codificada pelo gene pgk. Neste trabalho objetivou-se a produção da proteína recombinante PGK (PGKr) de B. abortus em sistema heterólogo de expressão, para caracterização da cepa vacinal geneticamente modificada, B. abortus 2308 p r 8 pgk por western blot e posterior utilização em testes sorológicos. Para isto, foi realizada a extração de DNA genômico da cepa S2308 de B. abortus e o gene pgk foi amplificado pela Reação em Cadeia da Polimerase (PCR) a partir de primers específicos. O produto da PCR foi ligado ao plasmídeo pMAL-c2E. O clone recombinante, foi submetido à indução da produção da proteína em Escherichia coli. A PGKr foi purificada por cromatografia de afinidade e duas frações purificadas foram dosadas por Bradford, obtendo-se 2,62 mg da PGKr. Camundongos BALB/c foram injetados com a proteína emulsionada em adjuvante Montanide, via subcutânea. Foram realizadas três inoculações com intervalos de três semanas. Quinze dias após as inoculaçõ... Mostrar Tudo |
Palavras-Chave: |
Fosfoglicerato cinase. |
Thesagro: |
Bovino; Brucelose; Clonagem. |
Thesaurus Nal: |
Brucellaceae. |
Categoria do assunto: |
-- |
URL: |
https://ainfo.cnptia.embrapa.br/digital/bitstream/item/124979/1/18.pdf
|
Marc: |
LEADER 02686naa a2200241 a 4500 001 2016972 005 2024-04-26 008 2013 bl uuuu u00u1 u #d 100 1 $aCAITANO, M. A. B. 245 $aClonagem e expressão heteróloga do gene pgk de Brucella abortus.$h[electronic resource] 260 $c2013 300 $ap. 249-266 520 $aA brucelose é uma das doenças emergentes mais importantes mundialmente na atualidade, afetando diversas espécies animais e o homem. A situação brasileira no controle de doenças infecciosas de animais requer melhorias para atingir os padrões internacionais e aumentar a produção. Por estes motivos o MAPA vem incentivado o desenvolvimento de novas vacinas e formas de diagnósticos para a brucelose bovina. Enzimas metabólicas têm sido descritas no envolvimento da virulência de Brucella abortus. Uma delas é a fosfoglicerato cinase (PGK), codificada pelo gene pgk. Neste trabalho objetivou-se a produção da proteína recombinante PGK (PGKr) de B. abortus em sistema heterólogo de expressão, para caracterização da cepa vacinal geneticamente modificada, B. abortus 2308 p r 8 pgk por western blot e posterior utilização em testes sorológicos. Para isto, foi realizada a extração de DNA genômico da cepa S2308 de B. abortus e o gene pgk foi amplificado pela Reação em Cadeia da Polimerase (PCR) a partir de primers específicos. O produto da PCR foi ligado ao plasmídeo pMAL-c2E. O clone recombinante, foi submetido à indução da produção da proteína em Escherichia coli. A PGKr foi purificada por cromatografia de afinidade e duas frações purificadas foram dosadas por Bradford, obtendo-se 2,62 mg da PGKr. Camundongos BALB/c foram injetados com a proteína emulsionada em adjuvante Montanide, via subcutânea. Foram realizadas três inoculações com intervalos de três semanas. Quinze dias após as inoculações, os soros sanguíneos destes animais foram coletados e separados para avaliação pelo método de Western Blot. Os soros confirmaram a produção de anticorpos contra o antígeno e pode-se observar que no ensaio com a cepa selvagem o anticorpo reagiu mostrando que a produção da proteína PGK está intacta nesta cepa e com a cepa mutante S2308 08 pgk o anticorpo não reagiu, mostrando que a produção da proteína PGK é nula, confirmando realmente a deleção do gene pgk nesta cepa. 650 $aBrucellaceae 650 $aBovino 650 $aBrucelose 650 $aClonagem 653 $aFosfoglicerato cinase 700 1 $aJANK, C. C. 700 1 $aSANTOS, L. R. dos 700 1 $aSOARES, C. O. 700 1 $aROSINHA, G. M. S. 773 $tBio(in)formação$gv. 6, n. 6, 2013.
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Registro original: |
Embrapa Gado de Corte (CNPGC) |
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22. | ![Imagem marcado/desmarcado](/consulta/web/img/desmarcado.png) | CAMPELO, M. F.; LEMOS, O. F. de; SANTOS, L. R. R. dos; MIRANDA, S. de R. Proliferação de brotos de cultivares de bananeira em cinco subcultivos em diferentes concentrações de benzilaminopurina a cada subcultivo. In: SEMINÁRIO DE INICIAÇÃO CIENTÍFICA DA EMBRAPA AMAZÔNIA ORIENTAL, 15., 2011, Belém, PA. A ciência de fazer ciência: anais. Belém, PA: Embrapa Amazônia Oriental, 2011. 1 CD-ROM. PIBIC-2011.Tipo: Artigo em Anais de Congresso |
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23. | ![Imagem marcado/desmarcado](/consulta/web/img/desmarcado.png) | SANTOS, L. R. dos; ZANGIROLAMI, M. de S.; SILVA, N. O.; VALDERRAMA, P.; MARÇO, P. H. Rapid non-invasive assessment of quality parameters in ground soybean using near-infrared spectroscopy. Pesquisa Agropecuária Brasileira, Brasília, DF, v. 53, n. 1, p. 97-104, jan. 2018. Título em português: Avaliação rápida não invasiva de parâmetros de qualidade em soja triturada com uso de espectroscopia de infravermelho próximo.Biblioteca(s): Embrapa Unidades Centrais. |
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24. | ![Imagem marcado/desmarcado](/consulta/web/img/desmarcado.png) | SANTOS, L. R. R. dos; LEMOS, O. F. de; RODRIGUES, S. de M.; MONDIN, M. Quantidade de DNA nuclear de genótipos do gênero Piper. In: SEMINÁRIO DE INICIAÇÃO CIENTÍFICA, 19.; SEMINÁRIO DE PÓS-GRADUAÇÃO DA EMBRAPA AMAZÔNIA ORIENTAL, 3., 2015, Belém, PA. Anais. Belém, PA: Embrapa Amazônia Oriental, 2015. p. 331-334.Tipo: Artigo em Anais de Congresso |
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31. | ![Imagem marcado/desmarcado](/consulta/web/img/desmarcado.png) | ALVARENGA, L. C. O.; ROSINHA, G. M. S.; SOARES, C. O.; SANTOS, L. R. dos; CAVIGLIONI, M. de B. C. Avaliação da imunogenicidade e proteção de vacinas recombinantes contra Corynebacterium pseudotuberculosis em camundongos. In: CONGRESSO DO CENTRO-OESTE SOBRE DOENÇAS INFECCIOSAS, EMERGENTES, REEMERGENTES E NEGLIGENCIADAS, 5., 2017, Campo Grande, MS. Anais... Campo Grande, MS: FIOCRUZ, 2017.Tipo: Resumo em Anais de Congresso |
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32. | ![Imagem marcado/desmarcado](/consulta/web/img/desmarcado.png) | CASTRO, G. L. S. de; LEMOS, O. F. de; MORAES, F. K. C.; SANTOS, L. R. R. dos. Ácido naftalenoacético promovem enraizamento in vitro de genótipos de Piper nigrum L. In: SEMINÁRIO DE INICIAÇÃO CIENTÍFICA, 18.; SEMINÁRIO DE PÓS-GRADUAÇÃO DA EMBRAPA AMAZÔNIA ORIENTAL, 2., 2014, Belém, PA. Anais. Belém, PA: Embrapa Amazônia Oriental, 2014. 1 CD-ROM.Tipo: Artigo em Anais de Congresso |
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34. | ![Imagem marcado/desmarcado](/consulta/web/img/desmarcado.png) | BEZERRA N. L.; ROSINHA, G. M. S.; ELISEI, C.; SANTOS, L. R.; ARAUJO, F. R.; BASTOS, R.; SOARES, C. O. Avaliação de antígenos recombinantes de Brucella abortus em teste sorológico para brucelose bovina. In: JORNADA CIENTÍFICA DA EMBRAPA GADO DE CORTE, 6., 2010, Campo Grande, MS. Ética na pesquisa científica: [Anais da ...]. Campo Grande, MS: Embrapa Gado de Corte, 2010. 1 CD-ROM. Coordenadora: Vanessa Felipe de Souza 1 p.Tipo: Resumo em Anais de Congresso |
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35. | ![Imagem marcado/desmarcado](/consulta/web/img/desmarcado.png) | GONÇALVES, A. N. D.; SANTOS, L. R. dos; SOARES, C. O.; CARVALHO, C. E. G.; ROSINHA, G. M. S. Avaliação de antígenos recombinantes de Corynebacterium pseudotuberculosis em teste sorológico para linfadenite caseosa em caprinos e ovinos. In: JORNADA CIENTÍFICA EMBRAPA GADO DE CORTE, 11., 2015, Campo Grande, MS. Anais... Campo Grande: Embrapa Gado de Corte, 2015. 114 p. (Embrapa Gado de Corte. Documentos, 213).Tipo: Resumo em Anais de Congresso |
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36. | ![Imagem marcado/desmarcado](/consulta/web/img/desmarcado.png) | RAMOS, G. K. de S.; LEMOS, O. F. de; CASTRO, G. L. S. de; SANTOS, L. R. R. dos. Auxina e sacarose na rizogênese in vitro de pimenteira-do-reino. In: SEMINÁRIO DE INICIAÇÃO CIENTÍFICA, 18.; SEMINÁRIO DE PÓS-GRADUAÇÃO DA EMBRAPA AMAZÔNIA ORIENTAL, 2., 2014, Belém, PA. Anais. Belém, PA: Embrapa Amazônia Oriental, 2014. 1 CD-ROM.Tipo: Artigo em Anais de Congresso |
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37. | ![Imagem marcado/desmarcado](/consulta/web/img/desmarcado.png) | SANTOS, L. R.; ELISEI, C.; ARIANO, A.; GAÚNA, N.; ROSINHA, G. M. S.; SOARES, C. O.; ARAUJO, F. R. Avaliação de novas proteínas recombinantes de membrana de Anaplasma marginale como potenciais candidatas a componentes de uma vacina contra anaplasmose bovina. In: SIMPÓSIO EMBRAPA LABEX DE SANIDADE ANIMAL, 1., 2009, Campo Grande, MS. Anais... Campo Grande, MS: Embrapa Gado de Corte, 2009. 2 p. 1 CD-ROM.Tipo: Resumo em Anais de Congresso |
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40. | ![Imagem marcado/desmarcado](/consulta/web/img/desmarcado.png) | SOUZA, C. B. L. de; LEMOS, O. F. de; SOARES, B. de O.; SANTOS, L. R. R. dos. Citocininas no cultivo in vitro de pimenteira-do-reino. In: SEMINÁRIO DE INICIAÇÃO CIENTÍFICA, 18.; SEMINÁRIO DE PÓS-GRADUAÇÃO DA EMBRAPA AMAZÔNIA ORIENTAL, 2., 2014, Belém, PA. Anais. Belém, PA: Embrapa Amazônia Oriental, 2014. 1 CD-ROM.Tipo: Artigo em Anais de Congresso |
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