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Registro Completo |
Biblioteca(s): |
Embrapa Pecuária Sudeste. |
Data corrente: |
28/09/2010 |
Data da última atualização: |
30/06/2023 |
Tipo da produção científica: |
Resumo em Anais de Congresso |
Autoria: |
SARAIVA, N. Z.; OLIVEIRA, C. S.; TETZNER, T. A. D.; SOUZA, M. M.; LIMA, M. R. de; NICIURA, S. C. M.; GARCIA, J. M. |
Afiliação: |
N. Z. SARAIVA, UNESP/JABOTICABAL; C. S. OLIVEIRA, UNESP/JABOTICABAL; T. A. D. TETZNER, UNESP/JABOTICABAL; M. M. SOUZA, UNESP/JABOTICABAL; M. R. DE LIMA, UNESP/JABOTICABAL; SIMONE CRISTINA MEO NICIURA, CPPSE; J. M. GARCIA, UNESP/JABOTICABAL. |
Título: |
Bovine cytoplasts prepared by demecolcine-induced enucleation of activated oocytes. |
Ano de publicação: |
2010 |
Fonte/Imprenta: |
In: ANNUAL CONFERENCE OT THE INTERNATIONAL EMBRYO TRANSFER SOCIETY, 36., 2010, Cordoba. Proceedings... Córdoba: ITES, 2010; Reproduction, Fertility and development, v. 22, n. 1, 2010. |
Páginas: |
p. 197 |
Idioma: |
Português |
Conteúdo: |
One of the most critical steps of the standard NT procedure is the removal of oocyte chromosomes for the production of enucleated cytoplasts. This process involves ultraviolet (UV) irradiation, which causes damage to the membrane and intracellular components of bovine oocytes. The objective of the present study was to evaluate the use of demecolcine, a microtubule depolymerizing agent, for chemical-induced enucleation of activated bovine oocytes. In the first experiment, oocytes obtained from cow ovaries collected in a slaughterhouse were IVM in TCM-199 medium supplemented with 10% FCS, FSH, hCG, estradiol, pyruvate, and amikacin for 26 h; then, they were artificially activated with 5 ?M ionomycin for 5 min and 10 ?g mL-1 cycloheximide for 4 h. The following groups were established: control, C (no activation and no demecolcine); activated, A (exposure only to activating agents); and demecolcine-exposed oocytes, DEME (activation for 4 h and 0.05 ?g mL-1 demecolcine for 2 to 4 h after 0, 0.5, 1.0, 1.5, and 2.0 h of activation). The treatment DEME comprised the groups G1 (demecolcine from 0 to 2 h of activation; DEME 0-2 h); G2 (DEME 0-4 h); G3 (DEME 0.5-2.5 h); G4 (DEME 0.5-4 h); G5 (DEME 1-3 h); G6 (DEME 1-4 h); G7 (DEME 1.5-3.5 h); G8 (DEME 1.5-4 h); and G9 (DEME 2-4h). The oocytes were stained with 10 ?g mL-1 Hoechst 33342 for 15 min and enucleation rates (EN) were evaluated under epifluorescence microscope (330-385 nm).After EN evaluation, a second experiment was performed to verify the efficiency of demecolcine-induced enucleation in group G9, which showed the best result in the first experiment. After demecolcine treatment, the oocytes were incubated in HEPES-buffered SOF with 10% FCS and cytochalasin B for removal of the 2PB and minimal adjacent cytoplast under an inverted optical microscope. Traditional enucleation was performed on the control group without exposure of the oocytes to demecolcine. The same conditions were employed except that UV light was used to confirm enucleation. Samples of cytoplasts were stained with Hoechst for 15 min and analyzed for enucleation efficiency. Five and 3 replicates were evaluated, respectively, in experiments 1 and 2, and the results were analyzed by chi-square test in the statistical software Minitab®, release 14.1 (Minitab Inc., State College, PA, USA). A level of 5% significance was used. Regarding enucleation rates, all treated groups were significantly different compared with the C (0/114) and A (0/130) groups. Considering the DEME groups, G8 (46/109; 42.2%) and G9 (61/113; 54.0%) presented superior rates (P < 0.05) to all other groups (26.8 to 36.3%), but they were similar despite the great tendency (P = 0.07) to difference. We observed high efficiency (P < 0.05) of demecolcine-induced enucleation (90/110; 81.8%) compared with a traditional technique (61/95; 64.2%). In conclusion, the present study shows that demecolcine-induced enucleation of activated oocytes enables good rates of enucleation and has greater efficiency than the traditional technique as well as avoiding UV irradiation of the cytoplast. MenosOne of the most critical steps of the standard NT procedure is the removal of oocyte chromosomes for the production of enucleated cytoplasts. This process involves ultraviolet (UV) irradiation, which causes damage to the membrane and intracellular components of bovine oocytes. The objective of the present study was to evaluate the use of demecolcine, a microtubule depolymerizing agent, for chemical-induced enucleation of activated bovine oocytes. In the first experiment, oocytes obtained from cow ovaries collected in a slaughterhouse were IVM in TCM-199 medium supplemented with 10% FCS, FSH, hCG, estradiol, pyruvate, and amikacin for 26 h; then, they were artificially activated with 5 ?M ionomycin for 5 min and 10 ?g mL-1 cycloheximide for 4 h. The following groups were established: control, C (no activation and no demecolcine); activated, A (exposure only to activating agents); and demecolcine-exposed oocytes, DEME (activation for 4 h and 0.05 ?g mL-1 demecolcine for 2 to 4 h after 0, 0.5, 1.0, 1.5, and 2.0 h of activation). The treatment DEME comprised the groups G1 (demecolcine from 0 to 2 h of activation; DEME 0-2 h); G2 (DEME 0-4 h); G3 (DEME 0.5-2.5 h); G4 (DEME 0.5-4 h); G5 (DEME 1-3 h); G6 (DEME 1-4 h); G7 (DEME 1.5-3.5 h); G8 (DEME 1.5-4 h); and G9 (DEME 2-4h). The oocytes were stained with 10 ?g mL-1 Hoechst 33342 for 15 min and enucleation rates (EN) were evaluated under epifluorescence microscope (330-385 nm).After EN evaluation, a second experiment was performed... Mostrar Tudo |
Palavras-Chave: |
Bovine; Cytoplasts. |
Thesaurus Nal: |
oocytes. |
Categoria do assunto: |
W Química e Física |
Marc: |
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41. | | KUNDE, R. J.; SANTOS, D. C. dos; VIGNOLO, G. K.; LIMA, C. L. R. de; FLORES, C. A.; PILLON, C. N. Frações físicas da matéria orgânica em solos sob campo natural na região da serra do sudeste do Rio Grande do Sul. In: ENCONTRO DE INICIAÇÃO CIENTÍFICA E PÓS GRADUAÇÃO DA EMBRAPA CLIMA TEMPERADO, 3., 2010, Pelotas. resumos e palestras... Pelotas: Embrapa Clima Temperado, 2010. Anais: Carreira, ética e inovação: o que você está fazendo? Pelotas: Embrapa Clima Temperado, 2010. Editado por Ivan Rodrigues de Almeida, Leonardo Ferreira Dutra e Jamir Luis Silva da Silva. 1 CD-ROM.Tipo: Resumo em Anais de Congresso |
Biblioteca(s): Embrapa Clima Temperado. |
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42. | | KUNDE, R. J.; SANTOS, D. C. dos; VIGNOLO, G. K.; LIMA, C. L. R. de; BORBA, M. F. S.; PILLON, C. N. Frações da matéria orgânica em diferentes solos da serra do sudeste do Rio Grande do Sul. In: ENCONTRO DE INICIAÇÃO CIENTÍFICA E PÓS GRADUAÇÃO DA EMBRAPA CLIMA TEMPERADO, 3., 2010, Pelotas. resumos e palestras... Pelotas: Embrapa Clima Temperado, 2010. Anais: Carreira, ética e inovação: o que você está fazendo? Pelotas: Embrapa Clima Temperado, 2010. Editado por Ivan Rodrigues de Almeida, Leonardo Ferreira Dutra e Jamir Luis Silva da Silva. 1 CD-ROM.Tipo: Resumo em Anais de Congresso |
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43. | | KUNDE, R. J.; SANTOS, D. C. dos; VIGNOLO, G. K.; LIMA, C. L. R. de; BORBA, M. F. S.; PILLON, C. N. Frações da matéria orgânica em diferentes solos da serra do sudeste do Rio Grande do Sul. In: ENCONTRO DE INICIAÇÃO CIENTÍFICA E PÓS GRADUAÇÃO DA EMBRAPA CLIMA TEMPERADO, 3., 2010, Pelotas. resumos e palestras... Pelotas: Embrapa Clima Temperado, 2010. Anais: Carreira, ética e inovação: o que você está fazendo? Pelotas: Embrapa Clima Temperado, 2010. Editado por Ivan Rodrigues de Almeida, Leonardo Ferreira Dutra e Jamir Luis Silva da Silva. 1 CD-ROM. Editado por Ivan Rodrigues de Almeida, Leonardo Ferreira Dutra e Jamir Luis Silva da Silva.Tipo: Resumo em Anais de Congresso |
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44. | | PILLON, C. N.; ROSA, C. M. da; SANTOS, D. C. dos; FARIAS, M. O.; CRUZ, L. E. C. da; KUNDE, R. J. Dinâmica da matéria orgânica do solo em sistemas de integração lavoura-pecuária-floresta no bioma Pampa. In: WORKSHOP INTEGRAÇÃO LAVOURA-PECUÁRIA-FLORESTA NO BIOMA PAMPA, 1., 2009. Pelotas. Palestras... Pelotas: Embrapa Clima Temperado, 2009.1 CD-ROM. Editado por Jamir Luis Silva da Silva, Jaime Airton Wunsch, Carlos Alberto Flores.Tipo: Artigo em Anais de Congresso / Nota Técnica |
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45. | | SANTOS, D. C.; KUNDE, R. J.; LIMA, C. L. R.; LEAL, O. A.; SANTOS, C. H.; MILORI, D. M. B. P.; PILLON, C. N. Efeito do manejo do solo sob os compartimentos físicos e humidificação da matéria orgânica de um latossolo háplico. In: REUNIÃO SUL-BRASILEIRA DE CIÊNCIA DO SOLO, 8., 2010, Santa Maria, RS. A ciência do solo frente à diversidade da agricultura: do Saraquá à agricultura de precisão: anais. Santa Maria: UFSM, 2010. não paginado.Tipo: Artigo em Anais de Congresso |
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46. | | SANTOS, D. C.; KUNDE, R. J.; LIMA, C. R. L.; LEAL, O. A.; SANTOS, C. H.; MILORI, D. M. B. P.; PILLON, C. N. Efeito do manejo do solo sob os compartimentos físicos e humificação da matéria orgânica de um planosolo háplico. In: REUNIÃO SUL-BRASILEIRA DE CIÊNCIA DO SOLO, 8., 2010, Santa Maria. A ciência do solo frente à diversidade da agricultura: do saraquá à agricultura de precisão. Santa Maria: Sociedade Brasileira de Ciência do Solo, UFSM, 2010. 1 CD-ROMTipo: Artigo em Anais de Congresso |
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47. | | ABEIJON, L. M.; CARVALHO, J. DOS S.; SANTOS, D. C. DOS; KUNDE, R. J.; PILLON, C. N.; SILVEIRA, C. A. P. Efeito de doses de agromineral como fonte de potássio sobre atributos químicos e biológicos do solo na cultura do pessegueiro (cv. chimarrita). In: CONGRESSO BRASILEIRO DE CIÊNCIA DO SOLO, 33., 2011, Uberlândia. Solos nos biomas brasileiros: sustentabilidade e mudanças climáticas: anais. [Uberlândia]: SBCS: UFU, ICIAG, 2011. 1 CD-ROM.Tipo: Artigo em Anais de Congresso |
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48. | | LEAL, O. A.; CASTILHOS, R. M. V.; SANTOS, D. C.; PILLON, C. N.; KUNDE, R. J.; MILORE, D. M. B. P. The effect of cover crops on the humification of organic material in a built soil after coal mining. In: INTERNATIONAL BIOCHAR CONFERENCE, 3., 2010, Rio de Janeiro. Processing from terra preta de índios to the whole world. Rio de Janeiro: Embrapa Solos, 2010. p. 106-107.Tipo: Artigo em Anais de Congresso |
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49. | | CARVALHO, J. C; FISS, A. V.; ABEIJON, L. M.; KUNDE, R. J.; SANTOS, D. C.; SILVA, J. L. S. da; PILLON, C. N. Macroinvertebrados do solo influenciados por sistema de integração lavoura-pecuária. In: ENCONTRO DE INICIAÇÃO CIENTÍFICA E PÓS-GRADUAÇÃO DA EMBRAPA CLIMA TEMPERADO, 4., 2012, Pelotas. Ciência e inovação para 2050: qual o futuro que queremos? Resumos e palestras... Pelotas: Embrapa Clima Temperado, 2012. 1 CD-ROM.Tipo: Resumo em Anais de Congresso |
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51. | | KUNDE, R. J.; CARVALHO, J. dos S.; SILVA, J. L. S. da; BAMBERG, A. L.; PILLON, C. N.; LIMA, A. C. R. de. Qualidade estrutural do solo de uma propriedade agrícola familiar sob Integração lavoura-pecuária. In: ENCONTRO DE INICIAÇÃO CIENTÍFICA E PÓS-GRADUAÇÃO DA EMBRAPA CLIMA TEMPERADO, 5., 2014, Pelotas. Qual o papel da ciência na agricultura familiar?: anais. Pelotas: Embrapa Clima Temperado, 2015. 120 p.Tipo: Resumo em Anais de Congresso |
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52. | | KUNDE, R. J.; LIMA, A. C. R. DE; SILVA, J. L. S. da; VALGAS, R. A.; KOHLER, T. W.; PILLON, C. N. Qualidade física, química e biológica de um Neossolo Litólico sob integração lavoura-pecuária no Bioma Pampa. Research, Society and Development, v. 9, n. 10, e7399109015, 2020. 20 p.Tipo: Artigo em Periódico Indexado | Circulação/Nível: B - 2 |
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53. | | KUNDE, R. J.; SANTOS, D. C.; LEAL, O. A.; VIGNOLO, G. K.; LIMA, C. L. R.; BORBA, M. F. S.; PILLON, C. N. Qualidade física de solos em uma topossequência na Serra do Sudeste do Rio Grande do Sul. In: REUNIÃO SUL-BRASILEIRA DE CIÊNCIA DO SOLO, 8., 2010, Santa Maria. A ciência do solo frente à diversidade da agricultura: do saraquá à agricultura de precisão. Santa Maria: Sociedade Brasileira de Ciência do Solo: UFSM, 2010. 1 CD-ROM.Tipo: Artigo em Anais de Congresso |
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54. | | KUNDE, R. J.; SANTOS, D. C.; LEAL, O. A.; VIGNOLO, G. K.; LIMA, C. L. R.; BORBA, M. F. S.; PILLON, C. N. Qualidade física de solos em uma topossequência na serra do sudoeste do Rio Grande do Sul. In: REUNIÃO SUL-BRASILEIRA DE CIÊNCIA DO SOLO, 8., 2010, Santa Maria. A ciência do solo frente à diversidade da agricultura: do saraquá à agricultura de precisão. Santa Maria: Sociedade Brasileira de Ciência do Solo, UFSM, 2010. 1 CD-ROMTipo: Artigo em Anais de Congresso |
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55. | | KUNDE, R. J.; LEAL, O. dos A.; SANTOS, D. C. dos; VIGNOLO, G. K.; LIMA, C. L. R. de; SILVA, S. D. dos A. e; PILLON, C. N. Propriedades químicas de um argissolo sob plantio direto de culturas promissoras a produção de biocombustível. In: SIMPÓSIO ESTADUAL DE AGROENERGIA, 3.; REUNIÃO TÉCNICA ANUAL DE AGROENERGIA, 3.; REUNIÃO TÉCNICA DA MANDIOCA, 10.; REUNIÃO TÉCNICA DA BATATA-DOCE, 2., Pelotas, 2010. Anais... Pelotas: Embrapa Clima Temperado, 2010. Organizado por Sérgio Delmar dos Anjos e Silva, Ivan Rodrigues de Almeida e Ana Cláudia Barneche de Oliveira. 1 CD-ROM.Tipo: Artigo em Anais de Congresso |
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56. | | KUNDE, R. J.; SILVA, B. E. P.; SARTO, M. T.; CASTRO, L. A. S. de; DUTRA, L. F.; MORAES, D. M. de. Potencial de uso do extrato de tagetes erecta no cultivo in vitro de batata-doce. In: CONGRESSO DE INICIAÇÃO CIENTÍFICA, 27.; ENCONTRO DE PÓS-GRADUAÇÃO UFPEL, 20.; SEMANA INTEGRADA DE ENSINO, PESQUISA E EXTENSÃO, 4., 2018, Pelotas. Anais... Pelotas: UFPel, 2018.Tipo: Artigo em Anais de Congresso |
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57. | | KUNDE, R. J.; CARVALHO, J. S.; FISS, A. V.; SILVA, S. D. dos A. e; PILLON, C. N.; LIMA, C. L. R. Teores de carbono orgânico total e distribuição relativa em macro e microagregados de um latossolo vermelho cultivado com cana-de-açúcar no rio grande do sul. In: ENCONTRO DE INICIAÇÃO CIENTÍFICA E PÓS-GRADUAÇÃO DA EMBRAPA CLIMA TEMPERADO, 4., 2012, Pelotas. Ciência e inovação para 2050: qual o futuro que queremos? Resumos e palestras... Pelotas: Embrapa Clima Temperado, 2012. 1 CD-ROM.Tipo: Resumo em Anais de Congresso |
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