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Registro Completo |
Biblioteca(s): |
Embrapa Pecuária Sudeste. |
Data corrente: |
05/09/2007 |
Data da última atualização: |
10/08/2011 |
Tipo da produção científica: |
Resumo em Anais de Congresso |
Autoria: |
PERECIN, F.; YAMAZAKI, W.; FERREIRA, C. R.; MÉO, S. C.; BIASE, F. H.; MERIGHE, G. K. F.; SARAIVA, N. Z.; TETZNER, T. A. D.; MEIRELLES, F. V.; GARCIA, J. M. |
Afiliação: |
Felipe Perecin, FCAV/UNESP, JABOTICABAL, SP.; Walt Yamazaki, FCAV/UNESP, JABOTICABAL, SP.; Christina R. Ferreira, FZEA/USP, PIRASSUNUNGA, SP.; SIMONE CRISTINA MEO, CPPSE. |
Título: |
Efeito do protocolo de sincronização celular na produção de clones bovinos. |
Ano de publicação: |
2007 |
Fonte/Imprenta: |
Acta Scientiae Veterinariae, v. 35, supl. 3, p. s1181, 2007. In: REUNIÃO ANUAL DA SOCIEDADE BRASILEIRA DE TECNOLOGIA DE EMBRIÕES, 21., 2007, Salvador. Anais... Salvador: UFRGS, 2007. |
Páginas: |
p. 1267 |
Idioma: |
Português |
Conteúdo: |
Os métodos de sincronização da célula doadora de núcleo para uso em clonagem baseiam-se no bloqueio reverslvel do ciclo celular em pontos especlficos. Idealmente, espera-se que esse bloqueio não provoque prejulzo à viabilidade do embrião reconstituldo após a transferência de núcleo. Este trabalho teve por objetivo avaliar a eficiência do processo de clonagem (taxa de eletrofusão, produção de blastocistos e estabelecimento de prenhez) a partir de dois protocolos de sincronização celular: privação de soro fetal bovino (SFB) ou cultivo celular até confluência. Oócitos bovinos foram recuperados por aspiração folicular postmortem e maturados in vitro (MIV) por 18h em TCM-199 suplementado com 10% de SFB, 1 ug/mL FSH, 50ug/ mL hCG, 1 ug/mL estradiol, 0,2mM piruvato de sódio e 83,4~g/mL amicacina em atmosfera úmida de 5% de CO2 em ar a 38,5°C. Oócitos apresentando extrusão do primeiro corpúsculo polar foram selecionados, corados com 10ug/mL de Hoechst 33342 e enucleados em fluido sintético de oviduto (SOF) tamponado com HEPES, suplementado com 10% de SFB e 7,5ug/mL de citocalasina B. A reconstituição oocitâria foi realizada com dois grupos de fibroblastos bovinos: Grupo A - cultivados sob privação de SFB por 3 a 5 dias (Dulbecco's Modified Eagle Medium -DMEM suplementado com 0,5% de SFB); ou Grupo B -cultivados até confluência (DMEM suplementado com 10% de SFB). Conjuntos citoplasto+fibroblasto foram eletrofundidos em solução de manitol 0,28M, com dois pulsos de corrente direta de 2,OKv/cm e duração de 20s cada. A ativação foi realizada por exposição à ionomicina (5 minutos, 5~M) seguida de incubação em SOF suplementado com 20mM cloreto de estrôncio e .\ O~g/mL de citocalasina B por 6 horas. Os provâveis zigotos foram co-cultivados com células da granulosa em SOF suplementado com 2,5% de SFB e 0,5% de BSA em atmosfera úmida de 5% de CO2 em ar a 38,5°C por 7 dias. Alguns blastocistos de cada grupo foram transferidos para fêmeas receptoras previamente sincronizadas. As taxas de eletrofusão e produção de blastocistos dos dois grupos foram submetidas à ANOVA, com nlvel de significância de 5%. Houve diferença signiticativaentre os grupos A e B quanto às taxas de eletrofusão: 3,66o/a:!:137,% (549 fundido sem 1631 reconstituidos) contra 40,07% % 11,95% (696 fundidos em 1737 reconstituidos), respectivamente; e quanto ao desenvolvimento até blastocisto: 20,58% % 13,84% (113 blastocistos em 549) contra 34,77o/a:!:1 0,47% (242 blastocistos em 696), respectivamente. Tais diferenças proporcionaram produção média de 5,65 e 12,74 blastocistos por sessão de micromanipulação nos grupos A e B, respectivamente. No grupo A não foram diagnosticadas prenhezes aos 30 dias em 25 receptoras inovuladas; no grupo B foram diagnosticadas 4 gestações a partir de II inovulações (36,4%). Embora a privação de SFB permita o desenvolvimento a termo de clones bovinos (Campbell et al., Nature, 380:64, 1996), existem relatos de maior fragmentação de DNA após utilização da privação (Gibbons et aI., Biol Reprod, 66:895, 2002). Ainda, as menores taxas de eletrofusão, produção de blastocistos e estabelecimento de prenhez observadas no grupo A em comparação ao B, indicam que o uso de fibrob'astos submetidos à privação de SFB não é justiticâvel para o procedimento de clonagem em bovinos. MenosOs métodos de sincronização da célula doadora de núcleo para uso em clonagem baseiam-se no bloqueio reverslvel do ciclo celular em pontos especlficos. Idealmente, espera-se que esse bloqueio não provoque prejulzo à viabilidade do embrião reconstituldo após a transferência de núcleo. Este trabalho teve por objetivo avaliar a eficiência do processo de clonagem (taxa de eletrofusão, produção de blastocistos e estabelecimento de prenhez) a partir de dois protocolos de sincronização celular: privação de soro fetal bovino (SFB) ou cultivo celular até confluência. Oócitos bovinos foram recuperados por aspiração folicular postmortem e maturados in vitro (MIV) por 18h em TCM-199 suplementado com 10% de SFB, 1 ug/mL FSH, 50ug/ mL hCG, 1 ug/mL estradiol, 0,2mM piruvato de sódio e 83,4~g/mL amicacina em atmosfera úmida de 5% de CO2 em ar a 38,5°C. Oócitos apresentando extrusão do primeiro corpúsculo polar foram selecionados, corados com 10ug/mL de Hoechst 33342 e enucleados em fluido sintético de oviduto (SOF) tamponado com HEPES, suplementado com 10% de SFB e 7,5ug/mL de citocalasina B. A reconstituição oocitâria foi realizada com dois grupos de fibroblastos bovinos: Grupo A - cultivados sob privação de SFB por 3 a 5 dias (Dulbecco's Modified Eagle Medium -DMEM suplementado com 0,5% de SFB); ou Grupo B -cultivados até confluência (DMEM suplementado com 10% de SFB). Conjuntos citoplasto+fibroblasto foram eletrofundidos em solução de manitol 0,28M, com dois pulsos de corrente direta de 2... Mostrar Tudo |
Palavras-Chave: |
Efeito do protocolo; Produção de clones bovinos; Sincronização celular. |
Categoria do assunto: |
-- |
URL: |
https://ainfo.cnptia.embrapa.br/digital/bitstream/item/39612/1/POCISCM2007.00170.pdf
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Marc: |
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Embrapa Pecuária Sudeste (CPPSE) |
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1. | | PIRES, R. M. L.; PIRES, R. L.; MÉO, S. C. Quimerismo 60, xx/60, xy e freemartismo em bovinos nascidos de partos gemelares heterossexuais. Boletim de Indústria Animal, Nova Odessa, v. 66, n. 1, p. 45-55, jun./mar. 2009.Tipo: Artigo em Periódico Indexado | Circulação/Nível: B - 4 |
Biblioteca(s): Embrapa Pecuária Sudeste. |
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2. | | SARAIVA, N. Z.; PERECIN, F.; MÉO, S. C.; FERREIRA, C. R.; TETZNER, T. A. D.; GARCIA, J. M. Demecolcine effects on microtubule kinetics and chemically assisted enucleation of bovine oocytes. Cloning and Stem Cells, v. 11, n. 1, p. 141-152, mar. 2009.Tipo: Artigo em Periódico Indexado | Circulação/Nível: A - 1 |
Biblioteca(s): Embrapa Pecuária Sudeste. |
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3. | | SARAIVA, N. Z.; PERECIN, F.; MÉO, S. C.; FERREIRA, C. R.; TETZNER, T. A. D.; VANTINI, R.; GARCIA, J. M. Efeitos da demecolcina sobre a cinética da maturação nuclear e a migração dos grânulos corticais em oócitos bovinos. Acta Scientiae Veterinariae, v. 35, supl. 3, p. s1276, 2007; In: REUNIÃO ANUAL DA SOCIEDADE BRASILEIRA DE TECNOLOGIA DE EMBRIÕES, 21., 2007, Salvador. Anais... Salvador: UFRGS, 2007. p. 1276.Tipo: Resumo em Anais de Congresso |
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4. | | MÉO, S. C.; YAMAZAKI, W.; FERREIRA, C. R.; PERECIN, F.; SARAIVA, N. Z.; LEAL, C. L. V.; GARCIA, J. M. Parthenogenetic activation of bovine oocytes using single and combined strontium, ionomycin and 6-dimethylaminopurine treatments. Zygote, v. 15, p. 295-306, nov. 2007.Tipo: Artigo em Periódico Indexado | Circulação/Nível: Internacional - A |
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5. | | CARDOSO, D.; CURCI, V. C. M.; NOGUEIRA, A. H. de C.; VERÍSSIMO, C. J.; MÉO, S. C.; MOLENTO, M. B. Situação da resitência de helmintos de ovinos a anti-helmínticos na região de Araçatuba, Estado de São Paulo. In: CONGRESSO BRASILEIRO DE ZOOTECNIA, 19., 2009, Águas de Lindóia. Anais... Águas de Lindóia: FZEA/USP: ABZ, 2009Tipo: Artigo em Anais de Congresso |
Biblioteca(s): Embrapa Pecuária Sudeste. |
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6. | | MELLO, S. S.; MÉO, S. C.; GROMBONI, J. G. G.; ROCHA, M. I. P.; VENERONI, G. B. Validação dos resultados de genotipagem por Taqman por meio de sequenciamento de genes relacionados à qualidade da carne bovina. In: CONGRESSO DE INICIAÇÃO CIENTIFICA, 18., 2010, São Carlos, SP. Anais ... São Carlos: UFSCar, 2010.Tipo: Resumo em Anais de Congresso |
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7. | | MÉO, S. C.; FERREIRA, C. R.; CHIARATTI, M. R.; MEIRELLES, F. V.; REGITANO, L. C. de A.; ALENCAR, M. M. de; BARBOSA, P. F. Characterization of mitochondrial genotypes in the foundation herd of the Canchim beef cattle breed. Genetics and Molecular Research, v. 8, n. 1, p. 261-267, 2009.Tipo: Artigo em Periódico Indexado | Circulação/Nível: B - 1 |
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8. | | MEO, S. C.; FERREIRA, C. R.; PERECIN, F.; SARAIVA, N. Z.; TETZNER, T. A. D.; YAMAZAKI, W.; LEA, C. L. V.; MEIRELLES, F. V.; GARCIA, J. M. Karyoplast exchange between strontium- and 6-DMAP-parthenogenetically activated zygotes of cattle. Animal Reproduction Science, v. 116, n. 3-4, p. 381-385, dec. 2009.Tipo: Artigo em Periódico Indexado | Circulação/Nível: A - 2 |
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9. | | SARAIVA, N. Z.; OLIVEIRA, C. S.; COLLADO, M. del; LIMA, M. R.; MEO, S. C.; FIGUEIRO, M. R.; VANTINI, R.; GARCIA, J. M. Effects of cAMP modulators during in vitro prematuration of bovine oocytes on gap junctional communication and embryo development potential. Animal Reproduction, v. 13, n. 3, p. 602, Jul./Sep. 2016.Tipo: Resumo em Anais de Congresso |
Biblioteca(s): Embrapa Amazônia Oriental. |
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10. | | SARAIVA, N. Z.; PERECIN, F.; MÉO, S. C.; FERREIRA, C. R.; TETZNER, T. A. D.; OLIVEIRA, J. C.; GARCIA, J. M. Effects of demecolcine on microtubule composition and chemically assisted enucleation of bovine oocytes. Reproduction, Fertility and Development, v. 20, n. 1, p. 107-108, 2008.Tipo: Resumo em Anais de Congresso |
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11. | | FERREIRA, C. R.; BURGSTALLER, J. P.; PERECIN, F.; GARCIA, J. M.; CHIARATTI, M. R.; MÉO, S. C.; MULLER, M.; SMITH, L. C.; MEIRELLES, F. V.; STEINBORN, R. Pronounced segregation of donor mitochondria introduced by bovine Ooplasmic tranfer to the female germ-line. Biology of Reproduction, v. 82, n. 03, p. 563-571, mar. 2010.Tipo: Artigo em Periódico Indexado | Circulação/Nível: A - 1 |
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12. | | TETZNER, T. A. D.; SARAIVA, N. Z.; PERECIN, F.; FERREIRA, C. R.; MÉO, S. C.; OLIVEIRA, C. S.; MELO, D. S.; MONTEIRO, F. M.; VANTINI, R.; GARCIA, J. M. Avaliação da influência da ovalbumina (OVA) como suplemento protéico durante a etapa de fecundação in vitro de oócitos bovinos. Acta Scientiae Veterinariae, v. 35, supl. 3, p. s1181, 2007; In: REUNIÃO ANUAL DA SOCIEDADE BRASILEIRA DE TECNOLOGIA DE EMBRIÕES, 21., 2007, Salvador. Anais... Salvador: UFRGS, 2007.Tipo: Resumo em Anais de Congresso |
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13. | | MÉO, S. C.; TIZIOTO, P. C.; SIQUEIRA, F.; ROSA, A. do N.; SILVA, L. O. C. da; TORRES JUNIOR, R. A. de A.; VENERONI, G. B.; IBELLI, A. M. G.; ALENCAR, M. M. de; REGITANO, L. C. de A. Caracterização do haplótipo mitocondrial de uma amostra de touros da raça Nelore, representativa das principais linhagens comercializadas no Brasil. In: WORKSHOP DA REDE GENÔMICA ANIMAL, 1., 2009, Fortaleza. Anais... Fortaleza, Rede Genômica Animal, 2009.Tipo: Resumo em Anais de Congresso |
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14. | | PERECIN, F.; YAMAZAKI, W.; FERREIRA, C. R.; MÉO, S. C.; BIASE, F. H.; MERIGHE, G. K. F.; SARAIVA, N. Z.; TETZNER, T. A. D.; MEIRELLES, F. V.; GARCIA, J. M. Expressão de DNA metiltransferases em blastocistos bovinos produzidos in vivo e in vitro. Acta Scientiae Veterinariae, v. 35, supl. 3, p. 1181, 2007.Tipo: Resumo em Anais de Congresso |
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15. | | PERECIN, F.; YAMAZAKI, W.; FERREIRA, C. R.; MÉO, S. C.; BIASE, F. H.; MERIGHE, G. K. F.; SARAIVA, N. Z.; TETZNER, T. A. D.; MEIRELLES, F. V.; GARCIA, J. M. Efeito do protocolo de sincronização celular na produção de clones bovinos. Acta Scientiae Veterinariae, v. 35, supl. 3, p. s1181, 2007. In: REUNIÃO ANUAL DA SOCIEDADE BRASILEIRA DE TECNOLOGIA DE EMBRIÕES, 21., 2007, Salvador. Anais... Salvador: UFRGS, 2007. p. 1267Tipo: Resumo em Anais de Congresso |
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16. | | TETZNER, T. A. D.; SARAIVA, N. Z.; PERECIN, F.; FERREIRA, C. R.; MÉO, S. C.; OLIVEIRA, C. S.; MELO, D. S.; MONTEIRO, F. M.; VANTINI, R.; GARCIA, J. M. Efeitos da substituição do soro fetal bovino (SFB) e da albumina sérica bovina (BSA) pela ovalbumina (OVA) na produção in vitro de embriões bovinos. Acta Scientiae Veterinariae, v. 35, supl. 3, p. s1181, 2007; In: REUNIÃO ANUAL DA SOCIEDADE BRASILEIRA DE TECNOLOGIA DE EMBRIÕES, 21., 2007, Salvador. Anais... Salvador: UFRGS, 2007.Tipo: Resumo em Anais de Congresso |
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17. | | VERÍSSIMO, C. J.; MEO, S. C.; OLIVEIRA, D. C.; CURCI, V. M.; UENO, T. H.; RODRIGUES, C. C.; COSTA, R. D.; PEREIRA, J. R.; MARGATHO, L. F.; CHIEBAO, D. P.; MOLENTO, M. B. Monitoring the efficacy of anthelmintic drugs in small ruminants in the State of São Paulo, Brazil: preliminary results. In: WORLD ASSOCIATION FOR THE ADVANCEMENT OF VETERINARY PARASITOLOGY, 2009, Calgary. Abstract... Calgary: WAAUP, 2009. p. 40-41.Tipo: Resumo em Anais de Congresso |
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18. | | CHIARATTI, M. R.; FERREIRA, C. R.; MEIRELLES, F. V.; MÉO, S. C.; PERECIN, F.; SMITH, L. C.; FERRAZ, M. L.; SÁ FILHO, M. F. de; GIMENES, L. U.; BARUSELLI, P. S.; GASPARRINI, B.; GARCIA, J. M. Xenooplasmic transfer between buffalo and bovine enables development of homoplasmic offspring. Cellular Reprogramming, v. 12, n. 2, 2010.Tipo: Artigo em Periódico Indexado | Circulação/Nível: A - 1 |
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19. | | LARA, M. A. C; RIBEIRO, J. A.; REICHERT, R. H.; PIRES, R. M. L.; ARCARO, J. R. P.; CARVALHO, J. B. P.; DEMARCHI, J. J. A. A.; MÉO, S. C.; BUFARAH, G.; SERENO, J. R. B.; SANTOS, S. A.; ABREU, U. G. P.; MIRANDA-SANTOS, I. K. F.; CONTEL, E. P. B. Relaciones genéticas entre razas bovinas con empleo de marcadores genéticos. In: SIMPÓSIO IBEROAMERICANO SOBRE CONSERVACIÓN Y UTILIZACIÓN DE RECURSOS ZOOGENÉTICOS, 6., 2005, Chiapas, México. Anais. Chiapas, México: CYTED: Universidad Autónoma de Chiapas, 2005. p.159-163.Biblioteca(s): Embrapa Pantanal. |
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